Survivin蛋白在肺癌中的表达及临床意义

作者:贾建桃,王秦秦,马丽菊 

 【关键词】  Survivin；肺癌；免疫组织化学

　　摘要   目的：探讨生存素（Survivin）蛋白在肺癌中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化两步法，检测56例肺癌组织和40例正常肺组织标本的Survivin蛋白。结果：Survivin蛋白在肺癌组织中阳性表达率为60.7%，而正常肺组织无1例表达，其表达与肺癌的细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关（P<0.01），与年龄、性别、组织学类型无关（P>0.05）。结论：Survivin蛋白与肺癌细胞的恶性程度、疾病进展和较高的侵袭性密切相关。

　　关键词   Survivin；肺癌；免疫组织化学

　　Expression and Clinical Significance of Survivin Protein in Human Lung Cancer

　　Jia Jiantao,Wang Qinqin,Ma Liju

　　Department of Pathophysiology of Changzhi Medical College

　　Abstract   Objective：To syudy the expression and clinical significance of Survivin protein in lung cancer. Methods：Immunohistochemical staining technique (SP method) using antibodies against Survivin protein was carried out on specimens of 56 cases of human lung cancer and 40 cases normal control. Results：The positive rate of Survivin protein in lung cancer was 60.7%, but there is no expression in normal control group. The positive rate of Survivin protein related to grade of cell differentiation, TNM stages and lymph node metastasis of lung cancer (P＜0.01), but not to age and sex of patients with lung cancer and histological subtype of lung cancer(P＞0.05). Conclusion：The positive of Survivin protein is closely correlated with worsen, development and higher invasion of lung cancer.

　　Key words   Survivin；lung cancer；Immunohistochemistry

　　肺癌是我国发病率最高的恶性肿瘤，占恶性肿瘤死亡的第一位。survivin是新近发现的一种凋亡抑制蛋白，其组织分布具有明显的细胞选择性，在正常成人已分化的组织（胸腺、生殖腺除外）不表达，而在多种肿瘤组织中表达［１］。本实验采用免疫组织化学方法检测了56例肺癌组织和40例正常肺组织中survivin蛋白表达，并探讨其表达的意义。

　　1   材料与方法

　　1.1   标本来源      收集昆明医学院第一、第三附属医院病理科2003年～2006年手术切除的肺癌石蜡包埋标本56例，其中男性42例，女性14例；年龄30岁～78岁。所有病例术前均未行放、化疗。按照国际抗癌组织协会（UICC）所提出的TNM分期法，对全部资料进行统一分类：腺癌23例，鳞癌19例，小细胞癌9例，大细胞癌5例；高、中分化共37例，低、未分化共19例；有淋巴结转移16例，无淋巴结转移40例；Ⅰ期16例，Ⅱ期26例，Ⅲ期12例，Ⅳ期2例。对照组取病灶旁及同期肺良性疾病旁正常肺组织标本共40例。

　　1.2   方法      标本经10%中性福尔马林固定，常规脱水包埋，制成5 μｍ厚连续石蜡切片。采用辣根过氧化酶标记链霉卵白素（SP）免疫组织化学方法，一抗Survivin为鼠抗人单克隆抗体(Neo markers公司，美国)，工作浓度为1∶30；SP试剂盒为美国ZYMED公司产品。染色步骤按产品说明书进行。DAB显色。用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。

　　1.3   结果判定      光学显微镜下观察，胞核或胞浆染为棕黄色者为阳性细胞。

　　1.4   统计学处理      数据用阳性率（%）表示，显著性用χ2检验，用SPSS 11.0软件完成。

　2   结果

　　2.1   肺癌和正常肺组织Survivin蛋白的表达      Survivin蛋白棕黄色颗粒主要位于细胞质，少量位于细胞核。Survivin蛋白在各组的阳性率分别为：正常组0（0/40），肺癌组60.7%（34/56）；肺癌组Survivin蛋白的阳性率显著高于正常组（P<0.05）。

　　2.2   肺癌组织survivin蛋白与肺癌临床、病理特征的关系（见表1）。

　　表1   Survivin蛋白表达与肺癌临床、病理特征的关系（略）

　　由表1可知，Survivin蛋白阳性表达与患者年龄、性别和肺癌组织学类型无明显相关性，而与细胞分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关。

　　3   讨论     

　　凋亡抑制延长了细胞的寿命，有利于突变的累积，是恶性肿瘤形成的重要机制之一。survivin基因位于17q 25，蛋白中含有单一的杆状病毒抑制凋亡蛋白重复序列分子，该分子通过抑制凋亡通路下游的caspase-3和caspase-7的活性发挥抗凋亡作用，并作用于细胞周期的G2／M期，与纺锤体的微管蛋白特异性结合，维持有丝分裂的正常进行，与细胞的分裂增殖、生长分化有关。Survivin蛋白家族是迄今发现最强的凋亡抑制因子［２］。本研究证实60.7%肺癌标本有Survivin蛋白表达，而良性肺疾病标本均无表达，提示该蛋白可作为一种肿瘤的特异性生物学标记物，用作肺癌临床诊断的可靠指标。Survivin蛋白的表达与TNM分期、分化程度有关，TNM分期越晚、分化程度越低、Survivin蛋白阳性表达率越高，这表明Survivin蛋白的阳性表达与肿瘤细胞的恶性程度和疾病进展密切相关，这与王萌等［３］的研究结果相似。淋巴结转移组，Survivin蛋白表达阳性率高，提示Survivin蛋白表达与肿瘤有较高的侵袭性有关。Kren等［４］研究了102例非小细胞肺癌中Survivin的表达与病人生存率之间的关系，结果表明，Survivin是个独立的预后判断因子。Survivin蛋白表达与组织细胞学类型、患者年龄及性别无明显关系。      　　总之，本研究提示Survivin蛋白可能在肺癌发生发展中发挥重要作用，可作为早期诊断、预测肿瘤转移、判断患者预后的一个重要参数。

　　参考文献

　　［１］   Tamm I,Wang Y,Sausvile E,et al.IAP family protein survivin inhibits caspase activity and apoptosis induced by Fas(CD95), bax, caspase,and anticancer drugs［Ｊ］.Cancer Res, 1998,58:5　020～5　372.

　　［２］   Ambrosini G, Adida C, Altieri D C. A novel anti-apoptosis gene, surviving,expressed in cancer and lymphoma［Ｊ］.NAT Med,1977,3(8):917～921.

　　［３］   王   萌，陈公琰，蔺   铁.survivin、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究［Ｊ］．肿瘤防治研究,2006,33(1):5～7.

　　［４］   Kren L, Brazdil J, Hermanova M,et al.Prognostic significance of anti-apoptosis proteins survivin and bcl-2 in non-small-cell lung carcinomas:a clinicopathologic study of 102 cases［Ｊ］.Appl Immunohistochem Mol Morphol,2004,12(1):44～48.

　　基金项目   云南省自然基金资助项目(2002C0062M)

　　作者单位   长治医学院病理生理学教研室(046000）   昆明医学院第一附属医院(650032)