盐酸多奈哌奇对阿尔茨海默病患者血清MMP2、MMP9、oxLDL的影响

　　作者：蔡志友 晏 勇 晏 宁 王凤英 郭坪生 叶 燕 唐 秦 王咏龙 赵 宇 作者单位：(重庆医科大学附属第一医院神经内科 重庆市神经病学重点实验室，重庆 400016)

　　【摘要】 目的 探讨盐酸多奈哌奇对阿尔茨海默(AD)的神经保护作用。方法 ELISA法测定研究对象的MMP2、MMP9和oxLDL的水平，生物化学法测定血脂。结果 高血脂组、正常血脂组经过盐酸多奈哌奇治疗后MMP2浓度明显降低(P<0.01);MMP9浓度明显降低(P<0.01);oxLDL浓度明显降低(均P<0.01);高血脂组、正常血脂组痴呆症状均减轻(P<0.01，P<0.05)。结论 盐酸多奈哌奇能够降低AD血清MMP2、MMP9和oxLDL浓度，减轻AD痴呆症状，推测盐酸多奈哌奇对AD脑保护作用可能通过保护血脑屏障结构和功能完整性、抑制氧化应激效应这一途径实现的。

　　【关键词】 阿尔茨海默病;盐酸多奈哌奇;基质金属蛋白酶;氧化低密度脂蛋白;血脑屏障

　　近年研究发现，血管性危险因素可能参与阿尔茨海默病(AD)的发生与发展。脂类代谢异常、脂质过氧化导致的动脉硬化是AD血管性危险因素。盐酸多奈哌奇(安理申)是第2个经FDA批准的一种可逆的、相对特异性乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEI)，它可有效选择性抑制中枢神经系统中Ach的降解，增加神经细胞突触间隙Ach的浓度，提高记忆脑区的神经传导功能，增强大脑信息的传递，从而起到改善大脑学习、记忆功能的作用，有明显的临床安全性和很好的耐受性〔1〕。本实验采用盐酸多奈哌奇对AD患者进行治疗干预，观察其对AD患者血清MMP2 、MMP9、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)影响，探讨盐酸多奈哌奇对AD的神经保护作用机制。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象 2005年9月～2007年5月60例AD患者，男28例，女32例，分别来自重庆医科大学附属第一、二医院、重庆市第二、三社会福利院、重庆市西郊医院老年科。AD患者入选标准：根据美国国立神经病及语言障碍和卒中研究所(NINCDS)和AD及相关疾病协会(ADRDA)推荐的临床AD诊断标准，中国精神疾病分类方案与诊断标准第2版(CCMDⅡ)，结合简易精神状态检查(MMSE)韦氏量表检测评分，确认其记忆、智能障碍程度。头部CT或MRI扫描排除其他原因所致的痴呆。排除疾病继发性痴呆疾病(如甲状腺功能减退)等;排除近期服用过降脂药及维生素类药物者，年龄55～80(平均68.25±6.22)岁。MMSE评分4～24(平均l4.65±6.20)分。高脂血症入选标准：血清总胆固醇(TC)≥5.72 mmol/L和/或低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)≥3.64 mmol/L作为入选条件，合并高血压16例，冠心病8例，排除肝肾疾病及甲状腺功能减低等引起的继发性高脂血症，排除感染、肿瘤及自身免性疾病等疾病。

　　1.2 研究方法 将AD患者分为：血脂正常组、高血脂组、血脂正常治疗组、高血脂治疗组，每组15人。治疗组给予盐酸多奈哌奇5 mg，1次/d，连续应用12 w，选择治疗后4、8、12 w为观察点进行MMSE评分测定和血清MMP2、MMP9、oxLDL、血脂水平检测。ELISA法测定MMP2、MMP9、oxLDL(美国LIFEKEY试剂盒、中国医学科学院)，生物化学法测定血脂。

　　1.3 统计学方法 所有数据以x±s表示，采用SPSS11.0软件，同一组内不同时相点的比较采用方差分析，两组之间同一时相点的比较采用t检验。

　　2 结 果

　　2.1 各组MMPs和血脂比较 见表1。血脂正常治疗组血清MMP2、MMP9、oxLDL浓度均较血脂正常组同时间点显著降低(均P<0.01)，经过盐酸多奈哌奇治疗8、12 w后MMP2、MMP9、oxLDL浓度和治疗4 w值比较明显降低(均P<0.01)，且8 和12 w间无明显变化(P>0.05)。两组间TC、LDLC无明显变化(P>0.05)(表1)。高血脂治疗组血清MMP2、MMP9、oxLDL浓度较高血脂组同时间点显著降低(均P<0.01)，经过盐酸多奈哌奇治疗4、8和12 w后MMP2、MMP9、oxLDL均较同组内前一时间点明显降低(均P<0.01)。TC、LDLC 高血脂治疗组明显随治疗时间明显降低(P<0.01)。

　　2.2 oxLDL、MMP2和MMP9与AD患者MMSE评分的相关性分析 AD患者MMSE评分和oxLDL、MMP2和MMP9的浓度呈负相关(r分别为-0.301、-0.162、-0.218，均P<0.01)。MMSE分数越高，认知损伤程度越轻，而oxLDL、MMP2和MMP9参与了AD认知功能损伤的发生与发展。

　　高血脂治疗组血清MMP2、MMP9、oxLDL浓度均较血脂正常治疗组增高(P<0.01)，高血脂组血清MMP2、MMP9、oxLDL浓度均较血脂正常组增高(P<0.01)，且高血脂治疗组4、8 w值较血脂正常治疗组明显增高(均P<0.01)(表1)。表1 血脂正常组和血脂正常治疗组比较 1)与血脂正常组同时间点比较，2)与同组内4 w比较，3)与高血脂组同时间点比较，4)与同组内8 w比较，5)与血脂正常组同时间点比较：5)P<0.01

　　3 讨 论

　　MMP是蛋白酶超家族，可由正常组织细胞、炎症细胞或肿瘤细胞等多种细胞合成分泌。主要功能为降解细胞外基质成分，对基质重构有重要意义。研究表明，动脉粥样硬化(AS)病变中有多种MMP参与，其中明胶酶(MMP2，MMP9)表达最广泛，主要降解变性胶原及基底膜的主要成分Ⅳ型胶原，被认为在斑块内基质降解、血管平滑肌细胞迁移等过程中起重要作用，斑块破裂与其高度合成有关〔2〕。研究证实，外周血中MMP2，9水平均增加，且增加程度与病变严重程度正相关〔3〕。目前循环血液中MMP2，9水平被认为是反映AS斑块的严重程度和稳定性的良好指标〔4，5〕。

　　oxLDL由血浆中的LDL经过氧化修饰形成，脂质过氧化产物，是粥样斑块的特征性成分之一。oxLDL可诱导巨噬细胞，血管内皮细胞和平滑肌细胞表达MMP2和MMP9。AS发生时oxLDL损伤动脉内膜，刺激血管内皮细胞分泌MMP降解基底膜，为oxLDL的渗透、平滑肌细胞的增殖和迁移创造条件。oxLDL也是反映AS斑块的严重程度和稳定性的良好指标〔6，7〕。

　　近年来临床和基础研究表明，脑血管病变不仅造成相当数量的血管性认知障碍，也可影响AD的患病风险〔8〕，并可能参与AD的病理生理机制〔9，10〕。许多流行病学调查揭示了AS、原发性高血压、糖尿病在内的血管性危险因素对AD的患病风险构成影响〔11，12〕。脑血管病变促进了临床前期的AD患者表现出痴呆症状〔13〕，AD与脑血管意外不仅存在共同的危险因素，还具有某些发病机制方面的内在联系〔14，15〕。在AD的预防和治疗中应重视血管性因素，加强早期无痴呆症状人群高血压病、糖尿病、AS等脑血管病危险因素的控制。

　　本实验结果标明血脂正常治疗组血清MMP2、MMP9和oxLDL浓度较血脂正常组显著降低，经盐酸多奈哌奇治疗后其浓度有所下降，而TC、LDLC在两组间无明显差异。而在高血脂组中，经过盐酸多奈哌奇的治疗后，血清MMP2、MMP9和oxLDL的浓度也有所下降，且血脂水平也有所改善，说明血脂代谢异常通过氧化应激效应，加速脑AS，破坏血脑屏障结构上和功能上的完整性，促发了AD的发生，而且盐酸多奈哌奇可以通过降低AD患者MMP2、MMP9、oxLDL的表达，抑制AD氧化应激、维护血脑屏障结构上和功能上的完整性发挥脑保护作用。

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