胃癌组织中AEG-1的表达及与临床病理特征的关系研究

　　作者：刘凯军,李勇,王文韬　　作者单位：河北省邯郸市，峰峰集团邯郸医院普通外科(刘凯军);河北医科大学第四医院普通外科(李勇);河北省邯郸市第一医院普通外科(王文韬)

　　【摘要】目的检测胃癌组织中星形细胞上调基因-1(AEG-1)的表达情况，并分析其与肿瘤临床病理特征的关系及意义。方法　对45例胃癌组织及癌旁组织进行AEG-1、P53、增殖细胞核抗原(PCNA)进行免疫组化染色，并分析结果与临床病理特征的关系。结果　胃癌组织中AEG-1、P53、PCNA表达均明显高于癌旁组织(P<0.05)，且AEG-1与P53、AEG-1与PCNA表达均存在正相关关系(r值分别为0.3286、0.3063，P<0.05)。AEG-1表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论　AEG-1在胃癌组织中高表达，该蛋白可能通过调控P53、PCNA表达而促进胃癌的发生和进展。

　　【关键词】 胃癌,星形细胞上调基因-1,临床病理特征

　　【Abstract】　 Objective　To investigate the relationship between the expression of AEG-1 and clinicopathological characteristics in gastric carcinoma.Methods　The expressions of AEG-1，P53，PCNA in 45 cases of gastric carcinoma tissue and tumor adjacent tissue were detected by immunohistochemistry.The correlation between the detection results and clinicopathological characteristics of gastric carcinoma was analyzed.Results　The expressions of AEG-1，P53，PCNA in gastric carcinoma tissue were significantly higher than those in tumor adjacent tissue (P<0.05)，furthermore，the expression of AEG-1 was positively related with that of P53，so was between AEG-1 and PCNA (P<0.05).The overexpression of AEG-1 was closely correlated with tumor differentiation degree，clinical staging，lymph node metastasis(P<0.05).Conclusion　AEG-1 is overexpressed in gastric carcinoma tissue，which may promote the pathogenesis and progression of gastric carcinoma by regulating the expressions of P53 and PCNA.

　　【Key words】　gastric carcinoma;astrocyte up-regulation gene-1;clinicopathological characteristics

　　胃癌是我国高发的恶性肿瘤，严重危害人民健康。该病起病隐匿、进展快、预后差，因此，寻找与胃癌起病、进展关系密切的肿瘤相关因子对了解病因和发病机制、提供治疗方向有重要意义。但迄今这方面的研究还没有突破性进展。星形细胞上调基因-1(astrocyteelevatedgene-1，AEG-1)是近年来发现的与多种肿瘤关系密切的一个新基因。故本研究检测了AEG-1在胃癌组织中的表达，并分析了它与胃癌临床病理特征的关系;同时还检测了与肿瘤增殖、凋亡关系密切的P53和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)的表达，分析了AEG-1与P53、PCNA的关系及意义。报告如下。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料

　　选择2008年10月至2011年5月在峰峰集团邯郸医院普通外科住院手术并经病理证实的胃癌患者45例，所有患者均有完整的临床病理资料，术前均未接受包括放疗、化疗在内的任何治疗。其中男28例，女17例;年龄31～72岁，平均年龄(65±9)岁。高中分化癌19例，低未分化癌26例。依国际胃癌(NCCN,2010)TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期16例，Ⅲ～Ⅳ期29例。

　　1.2　方法

　　1.2.1　免疫组化染色：兔抗人AEG-1多克隆抗体购自英国Abcam 公司，兔抗人P53多克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体均购自美国Santa Cruz公司，免疫组化试剂盒均购自北京中杉生物技术公司，采用SP法分别对石蜡包埋的肿瘤组织及癌旁组织(距肿瘤边缘≥3 cm)进行上述指标免疫组化染色。染色步骤严格按试剂盒说明书进行操作。

　　1.2.2　结果判断：由两位病理医师双盲法对切片进行观察，每张切片随机取5个(×400)高倍视野，每视野计数100个细胞。AEG-1为细胞胞质、PCNA、P53为胞核呈棕黄色着染为染色阳性。按着染细胞数量分为：“–”，阳性细胞数<25%;“+”，阳性细胞数25%～50%;“++”，阳性细胞数51%～75%;“+++”，阳性细胞数≥76%;按着色强度记分：无着色0分，淡黄色1分，黄色2分，棕黄色3分。两种记分标准相乘，为0～1记为阴性(-),2～3记为弱阳性(+),4～7记为阳性(++)，≥8记为强阳性(+++)。

　　1.3　统计学分析

　　应用SPSS 13.0统计软件，计数资料采用χ2检验、秩和检验，相关性采用Spearman相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结果

　　2.1　胃癌和癌旁组织中AEG-1、P53、PCNA的表达情况及关系

　　胃癌组织中AEG-1、P53、PCNA表达均明显高于癌旁组织(P<0.05)。AEG-1、P53之间，AEG-1、PCNA之间均存在明显正相关关系(r=0.3286，P=0.028;r=0.3063，P=0.041);P53、PCNA之间表达无明显关系(r=0.2235，P=0.140)。见表1、图1～3。表1　胃癌和癌旁组织AEG-1、P53和PCNA的表达情况图1　AEG-1在胃癌组织中的阳性表达(SP×200)图2　P53在胃癌组织中的阳性表达(SP×200)图3　PCNA在胃癌组织中的阳性表达(SP×200)

　　2.2　AEG-1与胃癌临床病理特点之间的关系

　　AEG-1表达阳性的患者在性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、脉管瘤栓等方面与阴性组并差异无统计学意义(P>0.05)。中高分化癌患者AEG-1阳性率明显低于低分化组、Ⅲ～Ⅳ期患者AEG-1阳性比例明显高于Ⅰ～Ⅱ期者、淋巴结转移阳性患者AEG-1阳性率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。见表2。表2　胃癌AEG-1表达与临床病理特点的关系

　　3　讨论

　　AEG-1是2002年发现的新基因[1]。该基因位于人8号染色体(8q22)，全长3 611 bp，包含12个外显子和11个内含子。近来研究表明，该基因具有原癌基因的特性，在多种恶性肿瘤组织中表达增强，而且可以促进肿瘤的发生、进展、侵袭、转移[2-4]。Sun等[5]的研究还发现AEG-1阳性的胆囊癌患者生存期短于AEG-1阴性者，认为AEG-1可作为胆囊癌预后判断的指标。但有关AEG-1与胃癌临床病理特征的研究目前还不多见。本研究显示，AEG-1阳性者肿瘤分化较差、临床分期较晚、淋巴结转移率明显高于阴性者，与其他研究的结果类似。因此，我们认为AEG-1可能参与了胃癌的发生、发展，对肿瘤的演进有推动作用。但本研究样本量较小，还有待进一步大规模研究进行证实。

　　有研究发现AEG-1可通过影响PI3K/Akt、Wnt/β-catenin、NF-κB、MAPK等多条信号转导通路的功能而促进肿瘤细胞的增殖、抑制肿瘤细胞的凋亡[6]。为进一步了解AEG-1在胃癌细胞中的作用机制，我们还检测了与肿瘤细胞增殖、凋亡关系密切的P53、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)在胃癌和癌旁组织中的表达。P53是研究最广的癌基因，野生型P53为抑癌基因，能抑制肿瘤的进展。临床组织中能检测到的均为突变型P53，该基因具有抑制肿瘤细胞凋亡的作用[7]。本结果显示，P53在胃癌组织中表达明显高于癌旁组织，与其他报道一致。结果还发现，AEG-1与P53在胃癌组织中表达存在正相关关系，我们推测AEG-1可能影响P53表达而导致肿瘤细胞凋亡耐受。PCNA与细胞的DNA合成关系密切，恶性肿瘤细胞由于增殖活性旺盛，常有PCNA过表达[8]。本研究也发现PCNA在胃癌组织中表达强于癌旁组织，且与AEG-1表达正相关。我们分析认为AEG-1可能通过促进PCNA表达而促进胃癌细胞的增殖。但本研究仅为初始阶段，具体的AEG-1作用机制还有待进一步深入。

　　本研究虽初步证实了AEG-1与胃癌的临床病理特征有关，这种关系可能是AEG-1通过调节P53、PCNA表达而实现的，但因本研究样本较小，且仅为临床现象观察，具体机制研究尚欠深入。因此，进一步研究中应扩大样本例数，并进行AEG-1与胃癌预后关系的分析;对AEG-1的功能进行研究，确定AEG-1在胃癌中的具体作用，将对胃癌的诊治具有重要的临床意义。

　　【参考文献】

　　1　Yoo BK，Emdad L，Lee SG，et al.Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1)：A multifunctional regulator of normal and abnormal physiology.Pharmacol Ther,2011,130：1-8.

　　2　Nohata N，Hanazawa T，Kikkawa N，et al.Tumor suppressive microRNA-375 regulates oncogene AEG-1/MTDH in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC).J Hum Genet,2011,56：595-601.

　　3　Li C，Liu J，Lu R，et al.AEG-1 overexpression：a novel indicator for peritoneal dissemination and lymph node metastasis in epithelial ovarian cancers.Int J Gynecol Cancer,2011,21：602-608.

　　4　Li C，Li R，Song H，et al.Significance of AEG-1 expression in correlation with VEGF，microvessel density and clinicopathological characteristics in triple-negative breast cancer.J Surg Oncol,2011,103：184-192.

　　5　Sun W，Fan YZ，Xi H，et al.Astrocyte elevated gene-1 overexpression in human primary gallbladder carcinomas：An unfavorable and independent prognostic factor.Oncol Rep,2011,26：1133-1142.

　　6　Hu G，Wei Y，Kang Y.The multifaceted role of MTDH/AEG-1 in cancer progression.Clin Cancer Res,2009,15：5615-5620.

　　7　Goh AM，Coffill CR，Lane DP.The role of mutant p53 in human cancer.J Pathol,2011,223：116-126.

　　8　Guzińska-Ustymowicz K，Pryczynicz A，Kemona A，et al.Correlation between proliferation markers：PCNA，Ki-67，MCM-2 and antiapoptotic protein Bcl-2 in colorectal cancer.Anticancer Res,2009,29：3049-3052