胃癌组织中MMP2和Ecadherin的表达及意义

　　作者：吴泽宇,李靖华,詹文华,何裕隆,彭俊生　　作者单位：广州，中山大学附属一院胃肠胰外科[吴泽宇(现在广东省人民医院普外三科)、詹文华、何裕隆、彭俊生、蔡世荣]; 中山医学院(李靖华)

　　【摘要】 目的 检测胃癌组织中基质金属蛋白酶2(MMP2)和E钙黏附素(Ecadherin)的表达，探讨其与胃癌侵袭转移的关系。方法 对我科2003年12月至2004年4月30例胃癌手术患者，采用免疫组化染色检测胃癌组织中MMP2和Ecadherin的表达情况。结果 70%(21/30)的胃癌组织中MMP2表达阳性。MMP2表达阳性与浸润深度(P=0.022)、淋巴结转移(P=0.030)和肿瘤分化程度(P=0.043)密切相关，但与性别、年龄、肿瘤位置和直径、Lauren分型及淋巴管侵袭无关(P>0.05)。46.7%(14/30)的胃癌组织中Ecadherin表达阴性。Ecadherin表达阴性与Lauren分型(P=0.026)、肿瘤分化程度(P=0.011)、淋巴结转移(P=0.038)和淋巴管侵袭(P=0.001)密切相关。结论 胃癌组织中MMP2表达上调和Ecadherin表达下移可能参与肿瘤侵袭转移的发生。

　　【关键词】 胃肿瘤,基质金属蛋白酶2,E钙黏附素

　　【Abstract】 Objective To detect expressions of matrix metalloproteinase2 (MMP2) and Ecadherin in gastric cancer tissues and evaluate their relationship with tumor invasion and metastases. Methods Immunochemical technique (EliVisionTM plus) was used to detect expressions of MMP2 and Ecadherin in tumor tissues from 30 cases with gastric carcinoma admitted into our hospital from December 2003 to April 2004. Results Expression of MMP2 was positive in 21 specimens (70%) and negative in 9 (30%). Positive expression of MMP2 closely correlated with infiltration depth (P=0.022), lymph node metastasis (P=0.030) and tumor differentiation (P=0.043) but had none relation with age, gender, tumor location, tumor diameter, Lauren classification and lymphatic invasion (P>0.05). Of 30 specimens, 14 (46.7%) had negative expression of Ecadherin, which was significantly associated with the Lauren classification (P=0.026), lymph node metastasis (P=0.011), differentiation grade (P=0.004) and lymphatic invasion (P=0.001). ConclusionPositive expression of MMP2 and negative expression of Ecadherin may contribute to development of tumor invasion and metastases of gastric carcinoma.

　　【Key words】 Gastric tumors; Matrix metalloproteinase2; Ecadherin

　　胃癌是我国常见的恶性肿瘤。它的侵袭和转移是影响其预后的重要因素。胃癌侵袭和转移的形成是一个复杂的病理过程，涉及肿瘤细胞附着、浸润和生长等多个步骤，其机制目前尚不清楚。因此，探索胃癌侵袭转移机制就成为当前胃癌研究领域的热点。近年来，基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)和E钙黏附素(Ecadherin)在肿瘤侵袭和转移中所起的关键性作用已受到人们的广泛关注[1-4]。本文研究了胃癌组织中MMP2和Ecadherin的表达与肿瘤侵袭和转移的相互关系，将为探索胃癌侵袭转移的分子机制提供重要依据。

　　1 资料和方法

　　1.1 临床资料

　　收集我科2003年12月至2004年4月30例胃癌手术患者，其中男17例，女13例;年龄26～82岁，中位年龄58岁。全组行全胃切除16例，近端胃次全切除1例，远端胃次全切除13例。其中D1手术1例，D2手术22例，D3手术4例，姑息性切除3例。根据日本胃癌研究会规约判断临床病理特征、1997年UICC淋巴结分类和临床病理分期标准，30例患者中PN0 10例，PN1 7例，PN2 6例和PN3 7例。Ⅰ期9例，Ⅱ期4例，Ⅲ期9例和Ⅳ期8例。

　　1.2 方法

　　胃癌组织中MMP2和Ecadherin表达采用EliVisionTM plus法检测：4 μm石蜡切片经二甲苯脱蜡、梯度酒精水化后，柠檬酸缓冲液微波法修复抗原;3%过氧化氢阻断内源性过氧化物的活性;加入抗体，4 ℃过夜;DAB显色，显微镜下观察3～10 min，阳性显色为棕色或红色;蒸馏水冲洗，苏木精复染，0.1%盐酸分化，PBS返蓝;切片经梯度酒精脱水干燥，中性树胶封固;光镜下观察结果。结果判定：阳性染色者在细胞膜或细胞质有棕黄色颗粒沉着，阳性细胞占肿瘤细胞的25%以上为阳性，<25%为阴性。

　　1.3 统计学分析

　　临床病理资料的分析用χ2检验和Fisher精确概率检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　70%(21/30)的胃癌组织中MMP2表达阳性。T3和T4淋巴结转移阳性的胃癌组织中MMP2表达阳性率分别为88.9%和85%，明显高于T1和T2胃癌组织的20%和75%(P=0.022)及淋巴结转移阴性胃癌组织的40%(P=0.030)。低分化胃癌组织中MMP2表达阳性率高达88.2%，明显高于高分化和中分化胃癌组织的42.9%和50%(P=0.043)。MMP2表达与性别、年龄、肿瘤位置和直径、Lauren分型及淋巴管侵袭无明显相关(P>0.05)。见表1。

　　46.7%(14/30)的胃癌组织中Ecadherin表达阴性。弥漫型、低分化胃癌组织中Ecadherin表达阴性率分别为63.2%和70.6%，明显高于肠型胃癌的18.2%(P=0.026)、高分化及中分化胃癌组织的14.3%和16.7%(P=0.011)。淋巴结转移阳性的胃癌组织中Ecadherin表达阴性率为60%，淋巴结转移阴性胃癌组织中仅为20%(P=0.038)。淋巴管侵袭阳性的胃癌组织中Ecadherin表达阴性率为72.2%，明显高于淋巴管侵袭阴性胃癌组织的8.3%(P=0.001)。Ecadherin表达与性别、年龄、肿瘤位置、直径及浸润深度无明显相关(P>0.05)。见表1。表1 MMP2和Ecadherin表达与胃癌临床病理特征的关系

　　3 讨论

　　3.1 胃癌组织中MMP2的表达及意义

　　恶性肿瘤细胞分泌蛋白分解酶降解细胞外基质是肿瘤侵袭和转移的关键。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是其中最重要的一类蛋白水解酶。它不仅可以降解基底膜和基质，突破细胞外基质屏障，促进肿瘤侵袭和转移，而且还可通过毛细血管的内生、新生血管的生成等促进肿瘤的生长和扩散，与肿瘤的侵袭和转移有着非常密切的关系。MMP2是MMPs家族中的主要成员之一，主要降解Ⅳ、Ⅴ型胶原及明胶等，目前被广泛应用于肿瘤侵袭和转移的研究中。文献报道，胃癌组织中MMP2表达与淋巴结转移和浸润深度密切相关[5-6]。本研究结果显示，T3～T4和T2胃癌组织MMP2表达阳性率明显高于T1胃癌组织，差异有统计学意义(P=0.022)。淋巴结转移阳性的胃癌组织MMP2表达阳性率也明显高于淋巴结转移阴性胃癌组织(P=0.030)，与文献报道一致。另外，本研究发现，低分化胃癌组织MMP2表达阳性率高达88.2%，明显高于高分化和中分化胃癌组织的42.9%和50%。本研究结果提示，MMP2表达与胃癌侵袭、转移和分化存在密切联系，是胃癌生物学特征之一，有望成为判断胃癌预后的有效指标。

　　3.2 胃癌组织中Ecadherin的表达及意义

　　Ecadherin是相对分子质量为120×103的跨膜糖蛋白，广泛分布于上皮细胞间，具有钙依赖性的同型细胞黏附作用，对维持组织结构的完整性和细胞分化等方面起着重要作用。Ecadherin表达减弱或缺失则是肿瘤浸润和转移过程中的关键。文献报道，胃癌组织中Ecadherin表达异常与淋巴结转移、浸润深度和分化程度密切相关[7-9]。本研究结果显示，淋巴结转移阳性的胃癌组织中Ecadherin表达阴性率明显高于淋巴结转移阴性的胃癌组织。低分化胃癌组织中Ecadherin表达阴性率明显高于高分化和中分化胃癌组织。与Joo等[8]报道不同的是，本研究发现T3～T4胃癌组织中Ecadherin表达阴性率为66.7%，高于T1和T2胃癌组织的40%和37.5%，但差异无统计学意义。分析其原因可能是本组病例数较少，尚需进一步加大样本量以得出正确结论。此外，胃癌组织中Ecadherin表达阴性与Lauren分型和淋巴管侵袭密切相关。本文研究提示，Ecadherin下调导致癌细胞黏附性降低，易脱离并具较强的侵袭性可能参与了胃癌侵袭转移的发生。

　　【参考文献】

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　　[9] Joo Y E, Rew J S, Choi S K, et al. Expression of Ecadherin and catenins in early gastric cancer. J Clin Gastroenterol,2002,35(1):35-42.