乳腺癌cerbB2的表达及其与临床病理指标的关系

　　作者：盛薇，车向明，单 涛，崔熙娟，樊 林，张 倩，高希涛 作者单位：(西安交通大学医学院第一附属医院普外科，陕西西安 710061)

　　【摘要】 目的 分析乳腺癌cerbB2的表达及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、腋窝淋巴结、肿瘤大小、病理类型等临床病理指标的关系。方法 收集术前未予任何治疗的临床病理资料齐全的原发性乳腺癌病例912例,采用免疫组化法检测cerbB2的表达，比较cerbB2表达与年龄、肿瘤大小、临床分期、肿瘤部位、绝经状况、腋窝淋巴结、ER、PR、病理类型之间的关系，并结合随访资料分析cerbB2的表达是否和预后相关。结果 cerbB2的阳性率为23%。不同年龄组间cerbB2的阳性率差异有统计学意义(P=0.009)，特别是<35岁组cerbB2过表达率高于>55岁组(P=0.006);肿块直径<2cm、2～5cm和>5cm组间cerbB2阳性率差异有统计学意义(P<0.01)，随肿瘤直径的增加cerbB2阳性率增高;腋窝淋巴结无转移、转移1～3个、转移>3个组间cerbB2阳性率差异有统计学意义 (P<0.01)，淋巴结转移>3个组cerbB2的阳性率高于其他两组;ER、PR阴性组cerbB2的阳性率高于ER、PR阳性组，差异有统计学意义(P<0.01);TMN分期中Ⅲ期cerbB2的阳性率高于其他两组，差异有统计学意义(P<0.05);在绝经状况、肿瘤部位、病理类型指标中各组cerbB2的阳性率无统计学差异。cerbB2阳性的乳腺癌患者生存时间明显短于阴性者(P<0.01)。结论 cerbB2过表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关，与年龄、ER PR呈负相关，与绝经状况、肿瘤部位、病理类型不相关。cerbB2是判断乳腺癌预后的良好指标。

　　【关键词】 乳腺癌;cerbB2;雌激素受体;孕激素受体;免疫组织化学

　　Relationship between cerbB2 expression and clinicopathological

　　parameters in breast cancerSHENG Wei, CHE Xiangming, SHAN Tao, CUI Xijuan,

　　FAN Lin, ZHANG Qian, GAO Xitao(Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital,

　　Medical School of Xi an Jiaotong University, Xi an 710061, China)ABSTRACT: Objective To observe the expression of cerbB2 and its relationships with clinicopathological parameters including estrogen receptor (ER), progestogen receptor (PR), axillary lymph node metastasis, tumor size and pathological type. Methods We collected data from the 912 primary breast cancer cases who had not undergone adjuvant therapy. The expression of cerbB2 was measured by immunohistochemistry (IHC). Then we analyzed the correlation of cerbB2 expression with age, tumor size, clinical staging, tumor site, menopause status, axillary lymph node, ER, PR and pathological classification as well as the connection between cerbB2 expression and prognosis in using followup data. Results The total positive rate of cerbB2 was 23.0%. There were significant differences in cerbB2 expression among different age groups (P=0.009), especially between those under 35 years old and those above 55 years old (P=0.006); tumor diameter <2cm, 2-5cm and >5cm groups (P<0.01), with the positive rate increased with tumor diameter; axillary lymph node metastasis (0), (1-3), (>3) groups, the last one higher than the other two. The positive expression rate of cerbB2 was significantly higher in ER and PR positive groups than in ER and PR negative groups (P<0.05). The positive expression rate of cerbB2 was significantly higher in TMN stage Ⅲ group than in the other two groups (P<0.05). However, no significant differences were found in pathological classification, menopause status or tumor site groups (P>0.05). As for prognosis, the diseasefree survival in cerbB2 (+) group was shortly that in cerbB2 (-) group. Conclusion The overexpression of cerbB2 is positively correlated with tumor size, axillay lymphatic metastasis and clinical staging but negatively correlated with age, ER and PR. It is not correlated with menopause status, tumor site or pathological classification. cerbB2 can be used as an independent indicator for the prognosis of patients with breast cancer.

　　KEY WORDS: breast cancer; cerbB2; estrogen receptor; progestogen receptor; immunohistochemistry

　　乳腺癌已成为威胁女性健康的重要危险因素，如何最大限度地减少乳腺癌对广大妇女的严重危害，一直是研究的热点。目前cerbB2基因/蛋白被公认为乳腺癌的标志物，其与临床病理因素关系的研究较多，但结果不尽一致。因此，我们希望通过本实验探讨我院诊治的乳腺癌患者(主要是西北地区患者)中cerbB2的过表达状态及其与临床病理之间的关系。

　　1 材料与方法

　　1.1 研究对象 收集西安交通大学医学院第一附属医院普外科与肿瘤外科2002年2月～2008年10月间的原发性乳腺癌可分析的存档病例912例，临床病理资料齐全。均为女性，年龄24～80岁，平均47.8岁，中位年龄46岁。术前均未行任何辅助治疗(化疗、内分泌治疗、放疗)。其中单纯癌743例，髓样癌37例，浸润性小叶癌52例，非浸润性癌80例。临床分期Ⅰ期243例，Ⅱ期493例，Ⅲ期176例。淋巴结转移阳性431例，阴性481例。

　　1.2 试剂与方法 采用免疫组织化学SP法检测cerbB2蛋白、雌激素受体(estrogen receptor, ER)、孕激素受体(progestogen receptor, PR)的表达。鼠抗人cerbB2 单克隆抗体，鼠抗人ER、PR单克隆抗体，由北京中山生物技术有限公司提供，用已知阳性切片作阳性对照，TBS代替一抗作阴性对照。其数据均以病理科免疫组化结果为准，所有数据均为回顾性资料数据。912例患者经追踪随访至2008年12月止，350例患者失访;422例随访者中死亡33例。中位随访时间为48.3个月，实际随访率46.3%，复发和(或) 其他脏器转移90例。

　　1.3 结果判断标准 使用DA KO Hercept Test评分方法：(-)无细胞染色或<30%的肿瘤细胞细胞膜较弱染色;(+)>30%的肿瘤细胞细胞膜部分较弱染色;()>30%的肿瘤细胞细胞膜完全较弱到中等染色;()>30%的肿瘤细胞细胞膜完全强染色。(-)和(+)的判为cerbB2表达阴性，而()和()的判为cerbB2表达阳性。

　　1.4 统计学方法 数据均采用SPSS13.0统计分析软件包处理。相关性单因素计算采用χ2检验进行数据差异性分析。P≤0.05为差异有统计学意义。cerbB2阳性表达组与阴性表达组患者用寿命表法估计5年生存率。

　　2 结 果

　　2.1 cerbB2的表达情况 912例标本进行IHC检测，cerbB2阴性702例(77.0%)，cerbB2阳性210例(23.0%)，其中cerbB2()128例(14.0%)，cerbB2()82例(9.0%)。

　　2.2 cerbB2表达与年龄的关系 以35岁和55岁为界划分<35、35～55和≥55岁3个年龄组。不同年龄组间cerbB2的阳性率差异有统计学意义(χ2=7.572, P<0.05)，特别是<35岁组cerbB2的阳性率高于>55岁组(P=0.006，表1)。表1 乳腺癌cerbB2表达与年龄的关系

　　2.3 cerbB2表达与肿瘤大小的关系 肿瘤直径<2cm、2～5cm及>5cm组间cerbB2阳性率的差异有统计学意义(χ2=13.774，P=0.001，表2)，随着肿瘤直径的增加cerbB2阳性率增高。表2 乳腺癌cerbB2表达与肿瘤大小的关系

　　2.4 cerbB2表达与腋窝淋巴结的关系 腋窝淋巴结无转移、转移1～3个、转移>3个组间cerbB2阳性率的差异有统计学意义(χ2=14.657，P=0.001，表3)，淋巴结转移>3个组cerbB2的阳性率高于其他两组。表3 乳腺癌cerbB2表达与腋窝淋巴结的关系

　　2.5 cerbB2表达与ER、PR的关系 ER(+)PR(+)、ER(-)PR(-)两组中cerbB2表达的差异有统计学意义(χ2=49.767，P<0.01)。在cerbB2(-)中，ER、PR的阳性率分别为53.4%、60.2%;在cerbB2(+)中ER、PR阳性率分别为30.5%、35.2% (χ2=34.081，P<0.01)。统计结果显示，cerbB2表达与ER、PR表达呈显著的负相关性(χ2=40.80，P<0.01，表4)。表4 乳腺癌cerbB2表达与ER、PR的关系

　　2.6 cerbB2表达与临床分期的关系 各组间cerbB2表达的差异有统计学意义(χ2=24.60，P<0.05)，即随着期别的递增cerbB2表达增高(表5)。表5 乳腺癌 cerbB2表达与临床分期的关系

　　2.7 cerbB2表达与肿瘤病理类型的关系 病理类型各组间cerbB2表达无统计学意义(χ2=5.892，P=0.117，表6)。表6 乳腺癌cerbB2表达与肿瘤病理类型的关系

　　2.8 cerbB2表达与肿瘤部位、绝经的关系 去除双侧乳腺癌5例，左侧和右侧乳腺癌两组中cerbB2表达无统计学意义(χ2=0.556，P=0.456)。去除因手术切除子宫致非自然绝经13例，有无绝经患者cerbB2表达也无统计学意义(χ2=2.150，P=0.147，表7)。表7 乳腺癌 cerbB2表达与肿瘤部位、绝经的关系

　　2.9 随访结果 912例患者进行生存期随访，随访截止日期为2008年12月，随访期2～80个月,平均随访50.3个月,中位随访48.3个月。共有422例得到随访，实际随访率46.3%。两组年龄、淋巴结状况、分期、肿瘤直径、病理类型和ER状况行卡方检验具有可比性(P>0.05)。结果显示，cerbB2阳性组不良预后率达54.9%，高于cerbB2阴性组的21%，差异有统计学意义(P<0.05)。生存曲线图显示，cerbB2(+)组5年生存率接近85%，cerbB2(-)组5年生存率接近93%。说明cerbB2(-)乳腺癌患者的预后要好于cerbB2(+)患者(表8、图1)。随访期间非肿瘤进展死亡、失访或研究时间截止者,均计为删失数据。表8 422例术后乳腺癌患者的随访结果

　　3 讨 论

　　cerbB2又称HER2/neu基因，是编码第2人表皮生长因子(human epidermal growth factor receptor, HER2)的癌基因，定位于人染色体17q1221.3，其表达蛋白是主要定位于细胞膜，为一具有酪氨酸激酶活性的细胞膜受体，参与调控细胞生长，促进肿瘤增殖及分化，与肿瘤的病理机制和发展密切相关[1]。研究表明，cerbB2的过表达可出现于多种上皮源性肿瘤，如乳腺、肺、前列腺、胰腺、卵巢、子宫等，约20%～30%的乳腺癌伴随cerbB2的过表达[2]。本组912例乳腺癌病例中cerbB2阳性为210例，占全组的23%，基本与文献报道相符，进一步证实了cerbB2在乳腺癌的发生中起着重要的作用。

　　本研究发现，在患者年龄组别中，cerbB2阳性率随着年龄的增高而降低，即(<35岁)组>(35～55岁)组>(≥55岁)组，这与以前的报道基本一致[3]。可能是因为随着医学的发展，新的诊断技术应用，各种肿瘤的早期诊断有所提高，所收集到的病例多数年龄较轻(<55岁)，其在老年组中的趋势难以表现;也可能是因为cerbB2扩增是一种遗传性损伤，是由于获得了强的启动因子或基因的点突变、基因重组、基因易位，而这些情况多发生于年轻患者。本研究还发现，cerbB2阳性表达随肿瘤体积的增大而增高。这可能与肿瘤细胞的增殖活性有关，推测cerbB2过量表达可能与肿瘤的生长速度有关。这与以前的研究不一致，以前认为肿瘤的大小与cerbB2的表达无关联[4]。

　　在长期被用作评估乳腺癌患者预后的主要临床病理指标中，淋巴结阳性是反映乳腺癌预后较差的可靠指标[5]。本研究结果显示，在有淋巴结转移组，cerbB2表达率高于淋巴结无转移组，与文献报道一致[6]。目前认为，cerbB2的蛋白产物是细胞正常生长、增殖和分化的调节剂。其过度表达导致调控失常，可能通过启动多种转移相关机制而增加转移能力，包括细胞迁移率、体外侵袭力，也可能是cerbB2的过度表达影响某些黏附分子，如上皮细胞钙黏蛋白(Ecadherin)等合成,从而使肿瘤细胞更易扩散，使癌细胞脱离原发灶,在间质发生浸润，易于转移。在淋巴结转移和cerbB2过表达与预后关系方面，多项研究显示，在有淋巴结转移的cerbB2阳性乳腺癌患者预后差于cerbB2阴性患者， 这一观点目前已被基本接受。因此，cerbB2可被认为是判断乳腺癌预后的一个独立指标。

　　雌、孕激素受体状态对指导内分泌治疗已被众多学者证实。一般认为，ER和/或PR阳性预后好，对内分泌治疗敏感。本研究结果显示，cerbB2表达与ER、PR表达呈显著的负相关(P<0.01)，提示cerbB2与预后差有关。与文献报道一致[79]。在具体分子机制方面，推测认为，cerbB2基因高表达时细胞酪氨酸蛋白的激酶系统具有持续活性，从而不需要内分泌调节，关闭激素调控致ER、PR阴性[10]。因此，cerbB2表达与ER、PR优化组合，可能成为乳腺癌术后拟定治疗方案的重要依据，有望成为乳腺癌的病理常规测定方法[4]。

　　临床分期是评估乳腺癌复发转移危险的重要指标之一，在指导乳腺癌治疗上有重要作用。其分期级别与cerbB2表达的关系文献报道不一。本组研究中，临床分期与cerbB2表达呈正相关，即随着临床分期升高,cerbB2过表达率增加。但有文献报道，多因素相关性分析显示，临床分期与cerbB2表达无关，仅在一定条件下与cerbB2表达呈正相关。该结果可能提示临床分期对cerbB2过表达的影响同时受患者自身内分泌状态及腋淋巴结转移状况的影响[4]。

　　关于cerbB2癌基因表达与病理类型之间的关系，一般认为浸润型乳腺癌cerbB2的阳性表达率高于非浸润性乳腺癌。本研究中，cerbB2在浸润性乳腺癌中的阳性率为(21.2%～24.4%)，非浸润性癌为12.5%，与文献报道一致[11]，但两组没有显著性差异。同时，本组资料显示，cerbB2表达与绝经、肿瘤部位无明显关系，这与目前的研究结果相符[12]。

　　为进一步证实cerbB2与预后的关系，本研究对422例患者的生存率进行分析。结果发现cerbB2过度表达者的无病生存率及5年总生存率均明显低于cerbB2阴性表达者,与当前临床研究结果一致[1315]。进一步支持cerbB2过表达是独立的预后判断指标。

　　总之，本研究结果表明，cerbB2过表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结的转移、临床分期呈正相关，与年龄、ER、PR呈负相关，与绝经状况、肿瘤部位、病理类型不相关;cerbB2可作为肿瘤治疗方案和判断预后的较有用指标。乳腺癌患者应常规检测cerbB2，这对临床病理诊断、分型、判断淋巴结转移、预测预后、指导临床治疗及提高生活质量具有重要的临床意义和实用价值。

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