急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者血清白介素水平的变化及其临床意义

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者血清白介素水平的变化及其临床意义作者：张萍，顾仁骏，张帆    作者单位：453002新乡医学院第二附属医院神经内科    【摘要】  目的 探讨急性一氧化碳（CO）中毒后迟发性脑病（DEACMP）患者血清白介素（IL）水平变化及其临床意义。方法 采用酶联免疫吸附法检测34例DEACMP患者治疗前、后血中IL2、4、6的水平，并与30名健康人和30例急性CO中毒（ACMP）患者进行比较。结果 （1）DEACMP组治疗后血中IL2、4、6的含量显著高于治疗前（均P<0.01），但仍显著低于ACMP组和健康对照组（均P<0.01）；（2）ACMP组血IL2、4、6的含量明显高于健康对照组（均P<0.01）。结论 DEACMP的发生与神经免疫病理损伤有关，血中IL2、4、6的水平可以反映DEACMP患者机体的免疫状态。    【关键词】  一氧化碳中毒；迟发性脑病；白介素　　Changes of serum interleukin levels and its clinic significance in patients with delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning ZHANG Ping，GU Renjun，ZHANG Fan.Department of Neurology ，the Second Affiliated Hospital of Xinxiang Medical College，Xinxiang 453002，China    Abstract：Objective  Explore the changes of serum interleukin(IL)  levels and its clinic significance in patients with delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning (DEACMP).Methods  The levels of IL2, IL4 and IL6 in serum of 34 patients with DEACMP were measured by ELESA before and after treatment. As control,  the levels of IL2, IL4 and IL6 in 30 healthy persons and 30 patients  with acute carbon monoxide poisoning(ACMP) were measured at same time.Results  ⑴The levels of IL2，IL4 and IL6 in serum of DEACMP patients before treatment were significantly lower than those after treatment（allP<0.01), and those of controls（allP<0.01).⑵The levels of IL2，IL4 and IL6 in serum of the ACMP patients were significantly higher than those of normal controls（allP<0.01）.Conclusions  The occurrence of DEACMP may be related with immunopathological damage. The levels of IL2，IL4 and IL6 in the blood may give information about the state of immunological function of the patients with DEACMP.    Key words：carbon monoxide poisoning；delayed encephalopathy；interleukin　　一氧化碳（CO）中毒后迟发性脑病（DEACMP）是指急性CO中毒（ACMP）患者经抢救恢复，经数日乃至数周表现正常或基本正常的间歇期（假愈期）后，再次出现以急性痴呆为主的一组神经精神症状［1］。白介素（IL）是具有广泛免疫调节作用的细胞因子。本研究通过对DEACMP患者治疗前、后血中IL2、4、6水平的检测，探讨其在DEACMP中的意义。1  对象与方法　　1.1  对象  （1）DEACMP组：34例，系新乡医学院第二附属医院、新乡市第一人民医院、新乡医学院第三附属医院2002年11月～2003年12月入院治疗的DEACMP患者，符合赵向智等［1］诊断标准，男18例，女16例；年龄 40～70岁，平均（53.3±8.3）岁；病程12～75 d，平均约27.0 d;本组患者假愈期8～45 d，平均20.1 d。（2）ACMP组：30例，系同期入院治疗的ACMP患者，男19例，女11例；年龄 40～70岁，平均（56.7±5.0）岁；病程1～14 d，平均约3.5 d。（3）健康对照组：30名，系本院同期体检者，男16例，女14例；年龄40～70岁，平均（52.8±5.4）岁。3组的性别、年龄相匹配，均排除各种脑部疾患、药物滥用史及有严重心、肺、肝、肾疾病。　　1.2  方法　　1.2.1  标本采集与处理  DEACMP组于治疗前及治疗3个月后共2次、ACMP组入院治疗前、健康对照组体检时采集空腹静脉血5 ml，置于电热恒温水箱中热浴1 h后,在自动平衡离心机离心，取血清2～3 ml，立即置于-70℃低温冰箱中保存备用。　　1.2.2  血清IL2、4、6水平检测  采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ABCELISA）法。用抗人IL单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IL与单抗体结合，加入生物素化的抗人IL抗体，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入酶底物OPD，出现黄色，颜色变深，在492 nm处测OD值，IL水平与OD值成正比，通过绘制标准曲线求出标本中的IL浓度。仪器采用全自动洗板机、RT 2600 C Multiskan MS全自动酶标仪和IL2、4、6试剂盒（北京环亚泰克生物医学技术有限公司进口分装）。　　1.2.3  统计学方法  数据以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS 11.0软件，组间比较t检验和F分析。2  结果    DEACMP组治疗后血清IL2、4、6水平较治疗前显著增高（均P<0.01），但仍然显著低于健康对照组和ACMP组（均P<0.01）；ACMP组显著高于健康对照组（均P<0.01）。见表1。　　表1  各组血清IL2、4、6水平的比较（略）　　注：与治疗前比较*P<0.01；与健康对照组比较△P<0.01；与ACMP组比较▲P<0.013  讨论　　DEACMP多发生在患有高血压、脑动脉硬化、糖尿病等疾病的中老年患者ACMP的恢复期［2］，发病机制不明,可能与免疫功能紊乱有关。DEACMP的神经精神症状出现在ACMP临床恢复后约2～3周，主要临床表现：（1）痴呆综合征；（2）类巴金森综合征。少数患者出现中枢神经损害症状如偏瘫、病理反射阳性或大小便失禁，以及大脑皮质局灶性功能损害如失语、失明或癫疒间发作。　　IL是主要由单个核细胞（包括淋巴细胞和单核巨噬细胞）产生的一组免疫活性因子，作用于淋巴细胞、巨噬细胞和其他细胞，共同参与机体免疫反应、应激反应和炎症的调节［3］。本研究发现，ACMP患者血IL2、4、6水平明显高于健康对照组；DEACMP患者治疗后血IL2、4、6的含量较治疗前显著升高，但仍显著低于健康对照组。这是因为ACMP时，CO对血红蛋白（Hb）的亲和力是氧的200～300倍，极易与Hb含铁基团结合，这不仅妨碍Hb携带氧，而且抑制氧的解离，造成全身组织严重缺氧。脑组织严重缺氧引起神经细胞膜通透性改变，大量钙离子内流，抑制线粒体的呼吸及能量代谢，导致神经细胞变性坏死，血脑屏障破坏，机体在缺氧应激产生的细胞因子渗入脑实质，激活髓鞘中抗原性很强的蛋白质，其作为一种特异性抗原被神经小胶质细胞（即巨噬细胞）提呈给辅助性T细胞（Th），使其分泌大量的细胞因子。IL2是Th1分泌的炎性细胞因子，IL6是Th2分泌的炎性细胞因子。IL2和IL6与髓鞘中抗原物质的自身免疫反应，导致脑白质轴突受免疫攻击，髓鞘剥脱，并出现一系列神经精神症状。IL4也是Th2分泌的抗炎性细胞因子，它与IL2、6作用相反，当IL2、6明显增加时，IL4可能也会相应增加以拮抗IL2、6的炎性作用。ACMP时机体免疫功能亢进，脑组织的病理改变为大脑白质广泛性脱髓鞘和两侧苍白球对称性软化灶,病变处可见围管性淋巴细胞浸润；恢复期时病理改变为白质脱髓鞘［4，5］。因此，当DEACMP发病时，脑白质髓鞘脱失已经形成，且ACMP急性期自身免疫反应消耗了大量的细胞因子，此时患者血IL2、4、6含量明显降低，患者免疫功能低下;经治疗，IL2、4、6含量有逐渐恢复的趋势，但仍低于正常。提示ACMP及DEACMP的发生与自身免疫反应有关。    本研究发现，在DEACMP疾病过程中，机体的免疫反应呈现一个由活跃到抑制、再恢复的过程；假愈期后DEACMP的发生机制与神经免疫损伤有关。【参考文献】　［1］王凌玲,石静萍,刘文.CO中毒后迟发性脑病的临床与磁共振表现［Ｊ］.临床神经病学杂志,2004,17:44.　［2］Choi IS. Carbon monoxide poisoning: systemic manifestations and complications ［J］. J Korean Med Sci，2001，16：253.　［3］杨渊,方思羽,张苏明.白细胞介素与脑缺血［Ｊ］.临床神经病学杂志,2000,13:189.　［4］陈志强，杨文君，蔡磊.急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的临床表现和CT及MRI研究［J］.中华劳动卫生职业病杂志，2005，23：438.　［5］Muller NG，Gruber O. Highresolution magetic resonance imaging reveals symmetric bitemporal cortical necrosis after carbon monoxide intoxication［J］.J Neuroimaging,2001,11：322.