影响乳腺癌雌激素受体表达的临床病理因素分析

作者:郝静,王秀梅,衣翠华,于学  1山东大学齐鲁医院  肿瘤防治研究中心  （山东  济南  250012）

2山东省肿瘤医院  放疗科  （山东  济南  250117）     【关键词】  乳腺肿瘤?受体,雌激素?Ki67?基因,C

    【摘要】目的：探讨影响乳腺癌雌激素受体（ER）表达的临床病理因素。方法：利用免疫组织化学方法检测76例乳腺癌组织中ER和Ki67、CerbB2及HIF1α的表达，并与临床病理资料进行相关性分析。结果：ER、Ki67、CerbB2及HIF1α在乳腺癌组织中的阳性率分别为67.1%、39.5%、31.6%和54.0%。ER表达与Ki67、CerbB2及HIF1α呈负相关（P＜0.05），与癌组织高分化成正相关（P＜0.05），而与年龄、腋窝淋巴结转移、肿瘤大小及组织学类型无显著相关。结论：乳腺癌组织中Ki67、CerbB2及HIF1α等的高表达可能参与了降低ER表达及原发性内分泌治疗抵抗的发生。

    【关键词】乳腺肿瘤?受体，雌激素?Ki67?基因，CerbB2?乏氧诱导因子1α

    Analysis of clinicopathological factors which influence the expression of estrogen receptor in breast carcinoma

    HAO Jing1,WANG Xiumei1,YI Cuihua1,YU Xuejun1,ZHANG Xin1,HU Dongyan1,LI Ming1,YU Jinming2

    1Cancer Center,Qilu Hospital of Shandong University(Jinan 250012,China)

    2Department of Radiotherapy Shandong Tumor Hospital (Jinan 250117,China)

    【ABSTRACT】Objective:To investigate the clinicopathological parameters which influence the expression of estrogen receptor(ER)in breast carcinomas.Methods:The expression of ER together with progesterone receptor(PR),Ki67,CerbB2 and hypoxia inducible factor1α (HIF1α)were assessed by immunohistochemistry in 76 cases of breast carcinoma,and their correlation with the other clinicopathological factors were also analyzed.Results:ER,Ki67,CerbB2 and HIF1α staining were observed in 67.1%,39.5%,31.6% and 54.0% respectively.ER status was inversely correlated with expression of Ki67,CerbB2 and HIF1α.Besides,ER status had a positive correlation with high differentiation (P＜0.05).However,it was not related to any other clinicopathological characteristic,such as age,axillary lymph node metastasis,tumor size and histology.Conclusion:High expression of Ki67,CerbB2 and HIF1αmay play important roles in downregulation of ER and therefore the development of primary endocrine therapy resistance.

    【KEY WORDS】Breast neoplasms?Receptors,estrogen?Ki67?Genes,CerbB2?Hypoxia inducible factor1    乳腺癌为雌激素依赖性肿瘤，抗雌激素治疗疗效主要决定于雌激素受体（estrogen receptor,ER）的表达情况。大约一半ER阳性的晚期乳腺癌患者可迅速对三苯氧胺等抗雌激素药物产生耐药，其原因除ER表达缺失外，ER与其它生长因子途径存在着交互作用，导致乳腺癌细胞可不依赖于ER表达情况生长增殖，成为构成获得性耐药的重要原因［1］。本研究通过对76例乳腺癌组织同时进行ER、细胞增殖核抗原（Ki67）、CerbB2及乏氧诱导因子1α（HIF1α）免疫组化检测，探讨影响乳腺癌ER表达的临床病理因素和抗雌激素治疗抵抗的可能原因。

    1  材料与方法

    1.1  临床资料  乳腺癌76例，手术切除并经病理学确诊，术前均未接受放化疗。浸润性导管癌60例，导管内癌6例，浸润性小叶癌10例。年龄29~82岁，平均（51.8±10.2）岁。0期6例，Ⅰ期20例，Ⅱ期42例，Ⅲ期8例。

    1.2  方法

    1.2.1  试剂与仪器  鼠抗人的抗体，包括ER、孕激素受体（PR）、CerbB2、Ki67，以及PV9000一步法免疫组化试剂盒等均购自北京中杉生物技术有限公司。兔抗人的HIF1α抗体购自武汉博士德生物工程有限公司。

    1.2.2  免疫组织化学染色  常规石蜡包埋组织切片4μm，微波修复抗原，一抗作用浓度为1∶100,37℃孵育1h。具体实验步骤按照PV9000一步法免疫组化试剂盒说明进行。

    1.2.3  结果判断  阳性结果呈棕黄色或棕褐色颗粒。根据阳性细胞数百分比（选择1000细胞计数）进行结果判断。根据有无ER表达分为阳性或阴性。PR判断同ER。 Ki67按照阳性细胞数所占比例分为阴性（≤5%）和阳性（＞5%）。 CerbB2按照阳性细胞数所占比例分为阴性（≤10%）和阳性（＞10%）。 HIF1α［2］按照阳性细胞数所占比例分为阴性（≤10%）和阳性（＞10%）。

    1.2.4  统计学处理  采用SPSS11.5统计软件进行分析，χ2检验用于ER表达和临床病理特征的相关性分析。

    2  结  果

    2.1  ER、Ki67、CerbB2及HIF1α在乳腺癌组织中表达  见图1。ER、Ki67表达位于细胞核内，CerbB2表达位于细胞膜上，HIF1α表达位于细胞浆和细胞核。ER、Ki67、CerbB2及HIF1α的阳性率分别为67.1%(51/76)、39.5%(30/76)、31.6%(24/76)和54.0%(41/76)。

    2.2  ER表达与Ki67、CerbB2及HIF1α的关系  见表1。表1  乳腺癌患者ER表达与Ki67、CerbB2及HIF1α的关系

    2.3  ER表达与乳腺癌临床病理特征的关系  见表2。表2  乳腺癌患者ER表达与临床病理特征的关系

    3  讨  论

    本研究结果表明，乳腺癌组织ER表达与Ki67、CerbB2及HIF1α显著负相关，与分化程度成正相关，提示ER表达受细胞增殖分化状态，其他生长因子受体途径如表皮生长因子受体及肿瘤微环境如乏氧的影响。

    Ki67为增殖细胞中表达的核抗原，在分裂期表达增加，M期达高峰，目前已成为评价细胞增殖活性最可靠的指标。研究表明［34］，正常乳腺组织中Ki67与ERα显著负相关，提示ERα阳性的细胞不进入分裂周期或增殖的细胞不表达ERα。在原发性乳腺癌组织中，Ki67与ERα这种负相关仍然存在，与本研究结果相同。尽管在复发的乳腺癌组织中，这种相关性减弱，Ki67表达仍少见于ERα阳性细胞，相反与ERβ表达正相关。因此，联合ERβ拮抗剂有可能对Ki67高表达的乳腺癌有效。

 与细胞增殖状态相一致，ER表达常见于低Ki67、高分化的乳腺癌细胞，而ER阴性的细胞往往Ki67高表达、分化程度差［3］，因此ER表达通常被当作细胞分化程度高的标志。

    CerbB2为原癌基因，参与细胞生长、分化调节，被公认与乳腺癌发生发展密切相关。其高表达常提示乳腺癌恶性程度高，化疗疗效差，预后不良［5］。研究表明，CerbB2高表达同样为晚期乳腺癌内分泌治疗抵抗的独立预后因素［6］，CerbB2阳性表达者疗效为38%，而无表达者疗效为56%。本研究结果显示乳腺癌组织中CerbB2表达与ER同样呈负相关，同Gutierrez结论相同［7］，提示在原发肿瘤中生长因子受体途径与ER存在着交互抑制作用。相反，随着肿瘤进展，并出出三苯氧胺耐药，ER阳性细胞中CerbB2表达增加，即CerbB2与ER负相关消失，而且与p38高表达密切相关，细胞可不依赖于ER生长增殖。阻断CerbB2途径可逆转三苯氧胺耐药［8］。

    乏氧为肿瘤微环境最重要的特征，而乏氧诱导因子1α（hypoxiainducible factor1α，HIF1α）为乏氧过程中最关键的转录因子，其表达与乳腺癌患者术后生存期短密切相关［9］。近年研究表明，乏氧不仅可导致乳腺癌细胞ER表达减少，而且降低其对抗雌激素药物的敏感性和雌激素的促生长作用［10］该下调作用被认为是HIF1α与ER通过蛋白蛋白相互作用而产生的［11］。联合乏氧特异性细胞毒物与抗雌激素药物有可能延迟或避免内分泌治疗抵抗的发生。

    综上所述，乳腺癌细胞ER表达的调控存在着非常复杂的机制，与细胞增殖分化机制、生长因子受体途径及微环境均有着交互作用，并可能参与了内分泌治疗耐药的发生。

    参  考  文  献

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