真菌特异性IgE与支气管哮喘严重程度

重症哮喘或难治性哮喘是临床经常面临的问题,暴露于特殊的致敏原以及对这些致敏原过敏在其发病机制中起着重要的作用卩l。哮喘患者死亡、住院率、呼吸道症状和呼出气峰流速(peak expiratoryow,PEF)明显受户外空气中高水平的真菌孢子含量有关⒓~剑。真菌中如链格孢属`青霉属、曲霉菌属以及分枝孢子菌属是哮喘患者重要的致敏原,对这些真菌致敏原致敏与哮喘的急性加重以及严重程度相关β~111。在危及生命的哮喘患者中,对链格孢属皮肤敏感试验阳性的患者非常常见。鉴于真菌致敏原与哮喘的密切相关,我们收集了2010~2011年我院门诊及住院的哮喘患者,检测了这些哮喘患者对不同真菌致敏原及非真菌致敏原的特异性IgE(speoc lgE,sIgE)水平,探讨真菌致敏与哮喘严重程度的关系,对于预防和治疗重症哮喘有着重要的意义。

1资料与方法

1.1病例收集。收集2010~2011年门诊以及住院期间诊断为支气管哮喘的患者,均符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组2008年制定的支气管哮喘防治指南中的诊断标准I1剑,并根据患者的临床表现、治疗前的肺功能、维持哮喘控制所需要的治疗将患者进行严重程度分级,分为轻度(第1、2级)、中度(第3级)和重度(第4级)阴。所有患者除外慢性阻塞性肺疾病;除外合并任何活动性、其他急或慢性肺部疾病以及其他严重免疫性疾病、恶性肿瘤、冠心病、高血压病等患者;妊娠及哺乳期妇女除外。所有患者进行年龄、性别、病史、肺功能、总IgE(totaIlgE,tIgE)以及sIgE等的横向比较。

1.2 slgE检测。酶联免疫捕获法(德国FooKE公司)。取酶标包被板,加入5倍稀释待测样本。37℃水浴锅温育。洗板。加酶标工作液。37℃水浴锅温育。洗板。加入显色剂A液,再加入显色剂B液,平板混匀器混匀,37℃避光显色。加终止液,用450nm波长测量各孔的吸光值(oD值)。计算出标准曲线的直线回归方程,在回归方程上计算出对应的样品浓度。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

1.3统计学方法。用SPss170统计软件进行统计学处理,计量资料以7±s表示,多组均数之间的比较采用单因素方差分析,分类资料的比较采用卡方检验,P(005为差异有统计学意义。

2 结果

共收集了门诊以及住院的哮喘患者100例。3组哮喘患者的临床特征,轻度及中度哮喘患者明显较重度患者年轻(P=0015,P=00001)。在性别、哮喘发病年龄(40岁、吸烟、有变应性鼻炎病史、家族史阳性等特征中各组之间没有明显差异。临床检查中tIgE、嗜酸细胞百分数\FEV1以及FEV1/FVC3组之间没有明显差异(表1)。

真菌致敏原中对青霉菌、曲霉菌以及自色念珠菌致敏的患者比例在重度哮喘组明显高于中度及轻度组,中度哮喘组明显高于轻度组(P<005)。对链铬孢子菌致敏的患者比例3组之间没有差异。3组中没有发现对草分支孢子菌致敏的哮喘患者。对5种真菌中任何一种真菌致敏的人数比例在重度哮喘组明显多于中度及轻度组,中度哮喘组明显多于轻度组(P(0001),将近有一半的重度哮喘患者存在对某一种真菌致敏;而同时对多种真菌致敏的患者比侈J3组之间没有明显差别。

对7种非真菌致敏原致敏的患者比例,3组之间没有明显差异。对7种非真菌致敏原中任何1禾中致敏的患者比例在3组之间没有明显差异,同时对多种非真菌致敏原致敏的患者比例在3组之间也没有明显差别。真菌同时合并非真菌致敏原致敏的患者比例重度哮喘组明显多于中度及轻度组,中度哮喘患者组明显多于轻度组(P(0o01,表2)。

真菌中曲霉菌、青霉菌和自色念珠菌的slgE水平在重度哮喘患者中明显高于中度及轻度患者,中度哮喘患者明显高于轻度患者(P(001或P(005)。而链铬孢子菌sIgE水平在3组患者之间没有明显差别。3组患者草分支孢

3讨论

本研究结果显示真菌致敏在重症哮喘患者中更常见,在本地区真菌致敏原中曲霉菌、青霉菌以及自色念珠菌与哮喘患者的病情严重程度明显相关,本研究结果与目前关于真菌与哮喘严重程度之间关系的研究结果一致。在欧洲30个中心一项有关社区呼吸道健康的调查显示,随着对链铬孢子菌或草分支孢子菌致敏频率的增加,哮喘的严重程度也随着增加。同样的研究发现,在一组曾经因哮喘急性加重而收入重症监护室的患者中对1禾中或多种致敏原如链铬孢子菌、草分支孢子菌、附球菌属\长蠕孢霉等致敏的患者占54%,而另外一组从未入重症监护室的哮喘患者中真菌致敏仅为30%。另外一项研究发现对链铬孢子菌致敏是发展成为重症哮喘的重要的危险因素。

与文献报导不同的是,常见的链铬孢子菌致敏在我们的研究结果中与哮喘的严重程度没有关系,在三组哮喘患者中没有发现对草分支孢子菌致敏的患者。由于地理环境、气候和植被的不同,致敏性真菌地区分布可能有较大的差异。文献报导对北京大气真菌进行采样和鉴定,在各种真菌分布上青霉和拟青霉属是优势菌落,这也与环境中真菌的分布相一致,即这两种菌在土壤中也属优势菌。其次分别为曲霉菌、酵母菌、链铬孢子菌等。

可以看到链铬孢子菌并不是北京地区空气中的优势菌,另外此文献数据显示在北京地区没有检测到草分支孢子菌的分布。因此,可能的解释是由于链铬孢子菌并不是本地区的优势菌,空气中的链铬孢子菌孢子的含量不高,对其致敏的哮喘患者并不多;另外,本地区可能由于空气中草分支孢子菌含量非常低检测不到,对草分支孢子菌致敏的可能性就非常小。有关非真菌致敏原致敏与哮喘患者病情严重程度的研究结果并不一致,有的研究表明部分非真菌致敏原,如狗毛与哮喘的严重程度相关,而有的研究显示没有关系。本研究检测7种常见的非真菌致敏原sIgE,结果显示对非真菌致敏原致敏患者的比例(8%~42%)明显高于对真菌致敏原致敏患者的比例(4%~25%),并且对非真菌致敏原的sIgE水平明显高于真菌致敏原水平。

说明非真菌致敏原致敏性较真菌致敏原要强,而且非真菌致敏原致敏在所有哮喘患者中比较常见,但与哮喘患者的病情严重程度没有关系。真菌与非真菌致敏原的不同在于真菌的致敏原成分复杂分为几类,包括蛋白酶、糖苷酶、蛋自产物组分等。因此,暴露于真菌孢子相当于同时暴露于所有的真菌致敏原而不是单——种致敏原,如非真菌致敏原花粉蛋自或动物皮毛。另外,真菌在环境中非常常见,人的呼吸道经常暴露于空气中的真菌孢子。空气中最常见的气传真菌包括草分支孢子菌、链铬孢子菌以及曲霉菌。还有真菌变应原能不停的发芽,感染宿主的皮肤或定植于宿主呼吸道。因此,真菌可能通过刺激宿主的防御系统对病原菌产生非变应原毒素和酶,这些物质在激发致敏中起着辅助作用,从而对个体产生更大的影响。

真菌如自色念珠菌、毛癣菌是常见的皮肤或胃肠道定植菌。虽然白色念珠菌不是气传真菌,但是有文献报导约10%轻度稳定哮喘患者和将近33%左右的重度哮喘患者对自色念珠菌致敏网。发癣菌属主要是引起表皮和指甲的感染多见,也不是气传真菌,有研究也发现机体吸收真菌抗原后产生IgE抗体,引起气道致敏从而导致哮喘发生li zl。因此,非气传真菌也可以引起机体致敏导致哮喘发生。本研究也显示在哮喘患者中一部分中度及重度患者对自色念珠菌致敏,而且与哮喘患者的严重程度明显相关。抗真菌治疗在重症哮喘中的作用尚存在争议,研究也不多。在一项回顾性研究中发现,对曲霉菌致敏的重症哮喘患者,使用伊曲康唑治疗数月,其住院率、糖皮质激素的疗程明显降低,但是tlgE和slgE水平没有变化。

在另—顼研究中,使用氟康唑100mg,1次/d治疗5个月,患者为对毛癣菌致敏的重症哮喘患者,发现可以降低患者对吸入毛癣菌的支气管高反应性,降低激素的需要量以及增加PEF值ligl。此外研究者使用伊曲康唑治疗真菌致敏的重症哮喘患者,发现可以适度的提高患者生活质量,鼻炎评分,PEF值和降低tIgE水平⒓q。这些研究说明抗真菌治疗可能对存在真菌致敏的重症哮喘患者中能起到部分作用,但仍需要大规模的临床试验支持。总之,本研究通过检测哮喘患者对不同真菌的slgE水平发现,对真菌致敏与哮喘患者病情严重程度密切相关,而非真菌致敏原与哮喘患者病情严重程度没有关系。此研究发现真菌可能在哮喘患者的病情严重程度中起着重要的作用,为今后重症哮喘的治疗与预防有着重要意义。

参考文献

[1]中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案)[J].中华结核和呼吸杂志.2003(03)

[2]翟俊辉,崔红,陈梅玲,徐秀芝,孙振海,胡庆轩,孙润桥.北京和南京两地大气真菌的分析与鉴定[J].中国公共卫生.2000(11)