肿瘤坏死因子β水平与多发性硬化临床表现的相关性
发表时间：2009-11-20 浏览次数：776次
肿瘤坏死因子β水平与多发性硬化临床表现的相关性作者：宋秀娟 作者单位：050000石家庄，河北医科大学第二医院神经内科 【摘要】 目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF）β水平与多发性硬化（MS）临床表现的相关性。方法 应用双抗体夹心酶联免疫法测定58例MS患者（MS组）血清TNFβ水平；并与患者不同亚型、病期、神经功能缺损程度的扩展病残状态评分（EDSS）、病程、发病次数、发病年龄等临床情况进行相关性分析。 结果 （1）MS组急性期TNFβ水平较缓解期和正常对照组显著升高（Ｐ<0.05～0.01）；MS缓解期与正常对照组间差异无统计学意义。（2）MS西方型急性期TNFβ水平较缓解期显著升高（Ｐ<0.01）； MS亚洲型急性期与缓解期差异无统计学意义。（3）两亚型急性期、缓解期TNFβ水平与其EDSS、病程、发病次数及发病年龄均无相关性。 结论 （1）TNFβ水平与MS急性期存在相关，MS西方型急性期、缓解期变化更显著。（2）TNFβ水平与EDSS、病程、发病次数及发病年龄可能不相关。 【关键词】 肿瘤坏死因子β 多发性硬化 Association between the level of tumor necrosis factor β and the clinical features of multiple sclerosis SONG Xiu-juan，GUO Li，HOU Hui-qing，et al.Department of Neurology, the Second Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050000,China Abstract：Objective To investigate the relationship between the level of tumor necrosis factor （TNF）β and the clinical features of multiple sclerosis（MS）. Methods The TNFβ level of 58 MS patients （MS group） was determined by means of sandwich enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The correlative analysis between level of TNFβ and the Expanded Disability Status Scale （EDSS）, the clinical data （including the duration of disease,the number of relapses and the age of onset） were take in MS patients. Results （1）TNFβ level was significantly increased in MS acute stage compared with those in MS remission stage and healthy controls （P ＜0.05～0.01）,but there was no significant different between MS remission stage and healthy controls. （2）The TNFβ level of acute stage was significantly higher than that of remission stage in MS Western-type（P＜0.05）, but not in MS Asian-type.（3）There was no significant positive correlation of TNFβ level of MS acute or remission stage in both sub-types to EDSS,the duration of disease, the number of relapses and the age of onset. Conclusions （1）There is significant association between the level of TNFβand MS acute stage，especially in MS Western-type. （2）There is no positive correlation of TNFβlevels to EDSS, the duration of disease, the number of relapses and the age of onset. Key words：tumor necrosis factor beta； multiple sclerosis 多发性硬化（MS）是一种以中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特征的自身免疫性疾病；肿瘤坏死因子（TNF）β是一种前炎性细胞因子，参与免疫应答，在多种自身免疫性疾病中起重要作用。本研究采用双抗体夹心酶联免疫（ELISA）方法检测MS患者血清TNFβ水平，探讨其与不同亚型、病期、神经功能缺损程度扩展病残状态评分（EDSS）、病程、发病次数、发病年龄的相关性。1 对象与方法 1.1 对象 （1）MS组：系2003～2006年我院住院以及随访的MS患者58例，均符合1983年Poser等［1］ 的临床确诊及实验室支持确诊的MS诊断标准；依据Kira等［2］方法分为：MS西方型组：男9例，女13例；年龄15～71岁，平均32.1岁；发病年龄11～63岁，平均30.2岁；病程6 d～9年，平均26.1个月；发病次数1～8次，平均2.4次。亚洲型组：男12例，女24例；年龄17～63岁，平均38.8岁；发病年龄17～63岁，平均36.7岁；病程18 d ～15年，平均32.6个月；发病次数1～6次，平均2.3次。根据病程及病情，MS患者又分为急性期组37例，其中西方型12例，亚洲型25例；缓解期组21例，其中西方型10例和亚洲型11例。（2）正常对照组：为健康献血员、患者邻居或与患者无血缘关系的家庭成员79人，男27人，女52人；年龄14～69岁，平均35.9岁。近期均无感染史，经问诊和体检排除神经系统疾病和其他自身免疫性疾病；年龄和性别均与病例组匹配。 1.2 方法 1.2.1 TNFβ水平测定 采集各组晨空腹静脉血3 ml，以2000 r/min离心5 min，取上层血清置-70℃冷藏待用。采血时间急性期组为初次发病或复发后3～20 d，缓解期组为病情缓解2.2～11.5个月。应用ELISA方法，试剂盒由Rapid Bio Lab.Calabasas, California,USA公司提供，操作严格按照说明书进行。试验中标准品和样本检测时均作双复孔以确保结果更准确，最后在450 nm处测吸光值（OD）。根据标准品OD值在半对数纸上作出标准曲线，以样品OD减去空白OD的值在曲线图上查出相应TNFβ水平。 1.2.2 EDSS 各组在采血的同日进行EDSS［3］评分。分别对锥体系统、小脑、脑干、感觉、直肠膀胱、视觉、大脑等8项功能进行评分，综合得出EDSS总分。 1.2.3 统计学方法 应用SAS 6.12统计软件，数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较用t检验；相关性分析采用相关和逐步多元回归检验。2 结 果 2.1 各组TNFβ水平及EDSS的比较 见表1、2。TNFβ水平MS急性期较缓解期及正常对照组显著升高（Ｐ<0.05～0.01），缓解期与正常对照组差异无统计学意义;MS西方型急性期显著高于缓解期（Ｐ<0.01）；MS亚洲型急性期与缓解期差异无统计学意义。EDSS在不同分期及亚型间差异无统计学意义。表1 各组TNFβ水平及EDSS的比较（略）注：与正常对照组比较*Ｐ<0.01；与缓解期组比较△Ｐ<0.05表2 MS两亚型TNFβ水平及EDSS的比较（略）注：与西方型缓解期组比较*Ｐ<0.01 2.2 TNFβ水平与EDSS等临床资料相关性 见表3。表3 MS患者血清TNFβ水平与临床资料相关性分析（略）3 讨 论 MS是一种以碱性髓鞘蛋白（MBP）为靶抗原的、特异性T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病；细胞免疫和体液免疫共同参与、以脑脊髓白质炎性脱髓鞘为主要病理特征。有证据［4，5］表明MS发病是机体免疫功能处于失衡状态，外周血及脑脊液中T淋巴细胞增多，CD4+/ CD8+比值增大。由于易感宿主感染病毒或受其他刺激因子作用后，机体免疫系统发生识别错误， T细胞被激活并生成抗病毒抗体与神经髓鞘多肽片断发生交叉反应，导致脱髓鞘改变。流行病学调查［6］发现MS发病具有多基因遗传倾向，主要易感基因包括人类白细胞抗原（HLA）基因、T细胞受体（TCR）基因等［7］。其中TCR识别HLA、CD4+ T细胞识别自身抗原是产生级联炎症的关键，炎症因子如TNFα、TNFβ、白介素（IL）-1、IL-6等参与炎症反应。TNFβ主要由淋巴细胞产生，具有复杂的生物学活性，参与炎症反应、免疫系统的发育及调节等［8］。 本研究结果显示， MS急性期血清TNFβ水平比缓解期及正常对照组明显升高，缓解期与正常对照组差异无统计学意义，西方型急性期和缓解期TNFβ水平差异的变化更显著；表明TNFβ水平与MS急性期存在相关。亚洲型患者急性期与缓解期差异无统计学意义。提示TNFβ在MS发病中的可能机制为：⑴TNFβ激活T细胞增殖分化产生抗髓鞘和轴索的抗体；⑵活化巨噬细胞诱导其表面主要组织相容性（抗原）复合物（MHC）-Ⅱ类分子的表达，起到抗原递呈作用；⑶激活其他细胞因子和化学分子发挥细胞毒作用直接对髓鞘和轴索造成损伤；⑷还可以改变内皮细胞的功能，导致内皮细胞的损伤，增加血管通透性，从而破坏血-神经屏障（BNB），使TNFβ由周围血液循环进入神经系统中，发挥毒性作用。总之TNFβ可能通过激活免疫系统，促进炎症的发生发展，进而导致中枢神经髓鞘脱失、轴索变性。但TNFβ在MS发病中起主要作用还是协同作用有待于进一步的研究。许多研究也证明TNFβ在其他自身免疫性疾病和炎症性疾病中介导的免疫反应加重机体的损伤。临床研究［9］证实，在吉兰-巴雷综合征患者急性期周围循环中TNFβ水平显著升高，随病情好转而逐渐下降。至今为止，国内外对TNFβ的研究集中在胸腺瘤和重症肌无力，以及术后并发症［10］等领域。应该指出，TNFβ对MS病情的发生、发展是与其他多种细胞因子以及环境因素相互作用的结果。 本研究结果还显示MS患者血清TNFβ水平与其EDSS、病程、发病次数及发病年龄均无相关性。表明TNFβ水平可能不是决定MS病情演变的惟一因素；也可能与分亚型、分病期后样本量较少有关。【参考文献】 ［1］Poser CM, Paty DW, Scheinberg L, et al. 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