胱抑素C和血小板活化因子在早期糖尿病肾病诊治中的应用价值

　　作者：马春燕　　作者单位：开封 河南省开封市第一人民医院检验科

　　【摘要】 目的 探讨胱抑素C(Cys C)和血小板活化因子(PAF)在早期糖尿病肾病(DN)诊治中的应用价值。方法 测定30例糖尿病正常尿蛋白患者和28例糖尿病微量尿蛋白患者及15例正常对照组血清PAF及血清Cys C的水平。结果 Cys C及PAF水平：糖尿病微量尿蛋白患者组[(1.79±0.92)mg/L,(92.38±30.25)μg/L]与糖尿病正常尿蛋白患者组[(1.42±0.41)mg/L,(67.57±19.46)μg/L]均较正常对照组[(0.74±0.21)mg/L，(50.71±15.43)μg/L]明显增高，差异有统计学意义(P<0.01)，糖尿病微量尿蛋白组较糖尿病正常尿蛋白组高，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 血清Cys C和PAF在早期DN患者中显著升高，提示两者在早期DN进程中起着重要作用，其测定可能有助于糖尿病及其并发症的早期诊断和病情监测。

　　【关键词】 糖尿病肾病; 胱抑素C; 血小板活化因子

　　The clinical significance of treating the early diabetic nephropathy with cystatin C and platelet activating factor MA Chunyan.Department of Clinical Laboratory,the First Hospital of Kaifeng,Kaifeng 475000,China

　　【Abstract】 Objective To study the clinical value of treating the early diabetic nephropathy(DN) with cystatin C(Cys C)and platelet activating factor (PAF).Methods The expression of Cys C and PAF were detected in 30 diabetic patients with normal albuminuria,28 diabetic patients with microalbuminuria and 15 healthy subjects.Results Cys C and PAF levels in diabetic patients with normal albuminuria[(1.42±0.41)mg/L,(67.57±19.46)μg/L] and diabetic patients with microalbuminuria[(1.79±0.92)mg/L,(92.38±30.25)μg/L]were remarkably higher than those in normal control group[(0.74±0.21)mg/L,(50.71±15.43)μg/L](P<0.01).The difference had statistical significance.Cys C and PAF levels in patients with microalbuminuria were remarkably higher than those in patients with normal albuminuria.The difference had statistical significance(P<0.01).Conclusion The remarkable increase of Cys C and PAF in patients with DN indicates that Cys C and PAF play a very important role in the early course of diabetic nephropathy.The measurement of Cys C and PAF may contribute to the early diagnosis and monitoring of diabetes and its complications.

　　【Key words】 Diabetic nephropathy;Cys C;PAF

　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)以肾小球系膜细胞增生、基底膜增厚或肾小球硬化为基本病理特征，是糖尿病的严重并发症和死亡原因。DN早期缺乏明显的临床表现，待尿常规蛋白检出异常时往往已进入晚期，失去治疗机会。因此，早期诊断对DN的预防和治疗具有重要意义[1]。笔者2006年8月～2008年12月对早期DN患者测定胱抑素C(Cys C)和血小板活化因子(PAF)，发现对其有一定的诊断价值。

　　1 资料与方法

　　1.1 对象 所有研究对象来源于医院门诊、住院患者及体检人员。按WHO 1999诊断标准，选择2型糖尿病患者58例，按24 h尿蛋白排泄率(UAER)值再分为微量尿蛋白组(连续查3次尿，其中2次UAER达30～300 mg/d)及正常尿蛋白组(UAER<30 mg/d)。微量尿蛋白组28例，男16例，女12例，年龄(52.8±3.2)岁，病史3～15年。正常尿蛋白组30例，男18例，女12例，年龄(52.4±3.4)岁，病史6月～10年。正常对照组15例为体检人员，男9例，女6例，年龄(50.7±3.3)岁。

　　1.2 观察指标及方法 抽取清晨空腹静脉血分离血清，PAF检测：参考文献方法[2]，抽提、纯化血清PAF，以标准PAF(Sigma公司)诱导兔血小板聚集率作标准曲线，测样本诱导兔血小板的聚集率，通过标准曲线求样本PAF值。血清Cys C浓度测定：使用罗氏P800全自动生化分析仪，采用乳胶颗粒增强免疫比浊法(PENIA)测定，试剂盒购自北京九强公司。

　　1.3 统计学方法 数据经SPSS 10.0统计软件包进行处理，计量资料用±s表示，结果比较用t检验。

　　2 结果

　　3组的检验结果，见表1。表1 3组的检验结果比较与正常对照组比较,*P<0.01,与正常尿蛋白组比较,#P<0.01

　　3 讨论

　　Cys C是一种含122个氨基酸、相对分子质量为1.33×103的蛋白质，它是半胱氨酸蛋白质超家族的成员之一，是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，也被称作半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、胱抑素C、γ2痕迹蛋白或后γ球蛋白[3]。Cys C存在于各种体液中，其中以脑脊液中含量最高，尿液中最低。它是“看家”基因在所有有核细胞上表达的产物，且产生速率恒定。由于其分子结构小且呈碱性，故血中Cys C几乎完全由肾小球滤过，但肾小管并不吸收完整的Cys C分子。肾小球滤过率(GFR)是衡量肾小球功能最重要的参数，是反映肾脏疾病患者肾脏功能的指标。但目前在技术上还无法在活体内直接测定GFR，因此，在临床实践和研究中只能根据肾脏对某一物质的清除率间接测定GFR。多年来，内生肌酐清除率被临床广泛应用于分析GFR，但不同程度地受到一些肾内和肾外因素的干扰。而血浆或血清中的Cys C就完全取决于肾小球的滤过率，即Cys C清除率与尿Cys C浓度无关，所以它已接近于“理想的”内源性标志物。在肾脏疾病的诊断治疗中需要一种快速简单且能准确反映GFR变化的指标，由于Cys C特定的生物学特性，目前已成为公认的较好的反映肾小球滤过率变化的指标，本文的结果也充分证实了这一点。黄群等[4]对102例2型糖尿病患者的Cys C水平研究，提示其2型糖尿病正常尿蛋白组、微量蛋白组和大量蛋白组的Cys C水平组间比较均有显著性差异。因此Cys C有可能成为反映糖尿病早期肾损害的敏感而可靠指标。

　　糖尿病患者由于长期高血糖，使非酶糖酰化速率增加，导致组织缺氧，血液粘滞度增高;同时内皮细胞释放内皮素和一氧化氮等血管活性物质，使肾小球毛细血管张力变化，引起肾血流动力学改变。使肾小球处于高滤过状态，造成微量白蛋白从尿中漏出增多，但对血清Cys C这种小分子碱性物质的滤过并不增加，反而由于各种炎症、代谢异常和免疫损伤致基底膜增生，造成滤过面积减少，导致肾小球滤过率下降，使血清Cys C升高。因此，血清Cys C与尿微量蛋白测定对糖尿病早期肾损伤具有重要的临床意义。

　　Cys C检测方法经历了几十年的不断探索，1997年报道了颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA)，使血清Cys C测定的时间缩短至5 min左右，且可在自动生化仪上进行。

　　PAF主要由血小板、内皮细胞、中性粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞产生，是一种具有多种生物学作用的脂类化合物。具有强烈的促血小板聚集和释放作用，能刺激内皮细胞和平滑肌细胞，增加血管壁的通透性。内皮细胞表达PAF受体，PAF可以损伤内皮细胞的屏障作用，导致内皮细胞功能紊乱。在实验动物，PAF诱导的肾小球通透性的增加导致了显著蛋白尿的形成，而PAF受体拮抗剂可以逆转或防止血浆蛋白的外渗。

　　CavaloPerin等[5]研究证实，体内PAF的升高，可以通过内皮细胞、白细胞和血小板的作用，能够增加血管和肾小球的通透性。其作用机制一方面是PAF的增加，诱发肾小管内皮细胞的细胞骨架改变，从而导致细胞内裂隙的形成，改变了肾小球滤过膜的分子大小依赖的通透性，导致微血管的病变[6];另一方面，由于PAF诱导血小板释放阳离子，进而改变了肾小球滤过膜的电荷依赖的通透性。因此，糖尿病患者血浆PAF增高，是其出现微量蛋白尿的重要原因之一，加速DN的发生和发展。

　　DN是糖尿病常见而严重的并发症，其早期诊断和治疗极为重要，患者尿出现微量白蛋白期是干预治疗的关键期。本资料表明，糖尿病Cys C、PAF与尿UAER的测定值与健康对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)，提示如患者已发现患有糖尿病，就应及时定期检查血Cys C、PAF与尿UAER，有条件应联合检测，以提高糖尿病早期肾损伤诊断的可靠性与准确性。

　　【参考文献】

　　1 Russell TA.Diabetic nephropathy in patients with type 1 diabetes mellitus.Nephrol Nuns J，2006，33(1)：1528.

　　2 许文荣，顾可梁，曹红翠，等.血浆溶血血小板活化因子测定及在儿童哮喘中的应用.临床检验杂志，1997，15(5)：265267.

　　3 俸家富，罗军，李少林.胱抑素C肾小球滤过率肌酐替代标记物.国外医学临床生物化学与检验学分册，2005，26(3)：168172.

　　4 黄群，杨香玖，姚弘，等.血清胱抑素C在2型糖尿病不同肾损害期的变化及其临床意义.临床内科学杂志，2006，23(7)：467477.

　　5 CavalloPerin P,Lupia E,Gruden G,et al.Increased blood levels of plateletactivating factor in insulindependent diabetic patients with microalbuminuria.Nephrol Dial Transplant，2000,15(7):994999.

　　6 方咏红，张继平，周少雄，等.2型糖尿病患者血清血管性血友病因子、血小板活化因子水平与糖尿病肾病的关系.第一军医大学学报，2005，25(6)：729731.