红豆杉茎叶镇痛作用的实验研究

　　作者：童丽姣 江月仙 郭伟娣 竹剑平 作者单位：311300 浙江省临安市中医院　310016 浙江省医学科学院　310020 武警浙江总队机关门诊部　310007 浙江省中医药研究院

　　【摘要】 目的 观察红豆杉茎叶的镇痛作用。 方法 采用热板刺激和扭体反应实验，随机分成5组，每组小鼠10只，设立红豆杉茎叶低、中、高三个剂量组(分别相当于临床剂量0、5、10倍)，并建立阿斯匹林阳性对照组和生理盐水对照组，连续口服给药3d，分别测定小鼠痛阈值及痛阈提高百分率、扭体反应潜伏期(min)、30 min内扭体反应次数，并计算镇痛百分率(%)。 结果 红豆杉茎叶各剂量均可抑制热板刺激诱发疼痛，减少冰乙酸致痛小鼠的扭体次数，与生理盐水组比较(P<0.05，P<0.01)，并且镇痛效应与剂量呈正相关，中、高剂量组的镇痛百分率(%)甚至高于阳性对照药物阿斯匹林组。 结论 红豆杉茎叶具有良好的镇痛作用。

　　【关键词】 红豆杉茎叶 镇痛 实验

　　【Abstract】 Objective To study the analgesic effect of Yew . Method The hot plate and writhing response test were conducted on 5 groups of mice with 10 in each .Among the 5 groups ,there were low ,middle ,high dose of yew group (which was 0、5、10 times in accordance to clinical dose respectively ), aspirin control group and normal sodium control group , continuously oral drug administration for 3 days, mice's pain threshold and pain threshold improvement 、writhing response test latency(min)、writhing response times within 30 min and analgesia percentage were calculated. Results All doses of yew inhabited pain induced by hot plate irritation and reduced writhing times induced by glacial acetic acid were recluced significantly compared with normal sodium control group(p<0.05，p<0.01), the pain's inhibitory effects were positively correlated with dose . The analgesia percentage in middle and high dose was even higher than that in aspirin control group . Conclusions Yew has a good analgesia effect.

　　【Key Words】 Yew Analgesia Test

　　红豆杉是世界上公认的濒临灭绝的天然珍稀药用植物，从其树皮中提取的紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)，1992年获美国FDA批准用于晚期卵巢癌、肺癌、子宫癌的治疗后，成为“抗癌药明星”。其实，我国中医古籍中早有红豆杉药用记载，如《本草纲目》、《本草推陈》称其功能温肾通经，利尿消肿，祛湿止痛[1]。与国外不同的是，中医是用其茎叶，并采用口服，目前已列入浙江省地方中药材炮制规范中，在临床上得到广泛运用。为了证实其临床效果，作者开展了有关红豆杉茎叶镇痛作用的实验研究，现报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 (1)药物：受试药红豆杉茎叶，由宁波泰康红豆杉生物科技有限公司提供，临床剂量为8g/(例·d)，相当于0.13g/(kg Bw·d)(人体重量以60kg计)，受试样品煎煮后配制成试验所需的浓度。阳性对照药阿斯匹林，由徐州××制药厂生产，含量：40mg/片;临床成人日用量为0.026g/kg，配制成5倍的浓缩液冰箱保存备用，临用时用蒸馏水稀释成应用液。(2)动物：昆明种系小鼠120只，体重(20±2)g，由浙江省医学科学院动物实验中心提供。

　　1.2 主要仪器 SC-5A超级恒温水浴箱(宁波产)。

　　1.3 方法 (1)热板刺激实验：昆明种系♀小鼠(防雄性小鼠遇热时睾丸下垂，阴囊触及热板而引起痛觉过敏)70只，预先测定小鼠在(55±0.5)℃时痛阈值(以舔后足为痛指标)，筛选出放入热板上不跳跃、不逃避者，痛阈值在5～30s的小鼠50只，按痛阈高低分层随机分为红豆杉茎叶低剂量组[0.133g/(kg Bw·d)，相当于临床剂量的0倍]、红豆杉茎叶中剂量组[0.667 g/(kg Bw·d)，相当于临床剂量的5倍]、红豆杉茎叶高剂量组[1.33 g/(kg Bw·d)，相当于临床剂量的10倍]、阿斯匹林阳性对照组和生理盐水对照组，每组10只，连续口服给药3d，在末次给药前、口服给药后30、60、90 min时分别测定小鼠痛阈值并计算痛阈提高百分率(用药后的小鼠放入热板上60s仍无反应，即将小鼠取出，以免时间太长把脚烫伤，其痛阈值按60s计算)。

　　痛阈提高百分率=给药组平均痛阈值-对照组平均痛阈值对照组平均痛阈值×100%。(2)扭体反应实验：昆明种系小鼠50只，♀♂各半，随机分为红豆杉茎叶低剂量组、红豆杉中剂量组、红豆杉茎叶高剂量组、阿斯匹林阳性对照组和生理盐水对照组，每组10只，连续口服给药3d，在末次给药后30min腹腔注射0.6%冰乙酸溶液0.2ml/只，立即记录各组各鼠扭体反应潜伏期(min)及30min内扭体反应次数，并计算镇痛百分率(%)。

　　镇痛百分率=对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数对照组平均扭体次数×100%。

　　1.4 统计学处理 实验结果用SPSS 13.0软件，计量资料用单因素方差(One-wayANOVA)分析，两两比较用q检验。

　　2 结果

　　红豆杉茎叶抗冰乙酸致小鼠疼痛反应的作用见表1;红豆杉茎叶对热板刺激致小鼠疼痛反应作用的影响见表2。

　　表1 红豆杉茎叶对抗冰乙酸致小鼠疼痛反应的作用(略)

　　注：各给药组均与对照组比较*P<0.05，**P<0.01

　　表2 红豆杉茎叶对热板刺激致小鼠疼痛反应作用的影响(略)

　　注：各给药组均与对照组比较*p<0.05，**p<0.01

　　3 讨论

　　红豆杉是一种稀有并濒于灭绝的树种植物，又是当今优于顺铂、阿霉毒等抗癌药紫杉醇的原料植物[2]，红豆杉是我国特产药用植物，民间用其茎叶治疗肾炎水肿、风湿疼痛、跌打损伤、疮疡疥癣等[3]，从上述镇痛实验结果表明：红豆杉茎叶可抑制热板刺激诱发的疼痛(通过中枢神经提高机体痛阈而达到止痛作用)，能够显著减少冰乙酸致痛小鼠的扭体次数，与生理盐水组比较(P<0.05，P<0.01)，并且镇痛效应与剂量呈正相关，中、高剂量组的镇痛百分率(%)甚至高于阳性对照药物阿斯匹林组;因此，说明红豆杉茎叶能对抗和清除体内致痛物质(如组织胺、应激肽等物质)，对抗化学性物质刺激诱发的疼痛作用，从而抑制冰乙酸刺激引起的小鼠扭体次数，提高小鼠痛阈而达到止痛作用。这就为红豆杉茎叶在临床推广使用提供了依据。

　　【参考文献】

　　1 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.北京：科技出版社，1978.436～448.

　　2 韩锐. 红豆杉及紫杉醇的研究进展.国外医学肿瘤分册，1993，20(4)：209～210.

　　3 韩金玉，王传贵，那平，等.红豆杉细胞培养生产紫杉醇研究进展.中草药,1996,27(7):433～437.