恩氟烷对小鼠学习记忆能力的影响基金项目：徐州医学院科研课题（07KJ43）

　　作者：王丹 戴体俊 作者单位：徐州医学院麻醉学院麻醉药理学教研室，江苏徐州221002

　　【摘要】 观察恩氟烷对小鼠学习记忆能力的影响。方法 按分层随机区组设计将小鼠分为4组(n =10)：生理盐水组(NS组)、恩氟烷(0.1 ml·kg-1、0.2 ml·kg-1、0.4 ml·kg-1)组(En0.1、En0.2、En0.4组)。用跳台实验和避暗实验分别测定用药后1、2、3、5天的错误次数和潜伏期。结果 用药后第1天，与NS组相比， En0.2、En0.4组跳台、避暗错误次数增多(P<0.05，P<0.01)，潜伏期明显缩短(P均<0.01)。En0.1组跳台、避暗错误次数和潜伏期与NS组相比均无明显差异。用药后第2、3、5天，在跳台实验和避暗实验中，各组错误次数和潜伏期的差异均无显著性。结论 恩氟烷能短时损害小鼠的学习记忆能力，不会造成持久的学习记忆能力障碍。

　　【关键词】 恩氟烷 小鼠 记忆 跳台实验 避暗实验

　　The effect of enflurane on memory in mice

　　WANG Dan, DAI Tijun

　　(Department of Anesthetic Pharmacology, Xuzhou Medical College, Xuzhou, Jiangsu 221002, China )

　　Abstract: Objective To investigate the effect of enflurane on memory in mice. Methods The mice were randomly divided into 4 groups (n=10 each): normal saline group (NS group)and enflurane 0.1 ml·kg-1, 0.2 ml·kg-1 and 0.4 ml·kg-1 groups (En0.1, En0.2 and En0.4 groups). The number of error and the length of latency were recorded one day, two days, three days and five days after the drug administration in the step-down and step-through tasks. Results As compared with the NS group, on the first day, the number of error was increased and the latency was decreased in the step-down and step-through tasks (P<0.05 or P<0.01)in the En0.2 and En0.4 groups, in a dose-dependent manner. However, on the second day, third day and fifth day, no significant differences in number of error or latency among groups were detected in the step-down and step-through tasks. Conclusion Enflurane can temporarily impair the memory in mice, causing no persistent memory defect.

　　Key words: enflurane; mice; memory; step-down task; step-through task

　　全麻状态意味着患者意识缺失，但患者有可能出现术中知晓(awareness)和术后回忆等情况。全麻术中知晓是指全身麻醉手术期间患者对周围环境或声音存在着一定程度的感知与记忆，属于全身麻醉并发症[1]。若手术中不当的谈话或疼痛刺激等存留于记忆中，则可能对其以后的精神行为或术后疼痛带来负面影响[2]，避免术中知晓是目前全球麻醉学界关注且尚未解决的问题。恩氟烷是常用吸入麻醉药，由于其诱导和苏醒迅速，而在临床广泛使用。国内外研究恩氟烷对小鼠学习记忆的影响鲜有报道。因此我们研究其对记忆的影响对于解决术中知晓的难题具有重要意义。

　　1 材料和方法

　　1.1 实验动物 昆明种小鼠，体重20～25 g，雌雄各半，由徐州医学院实验动物中心提供。实验前2天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水，每日9：00～12：00进行实验。

　　1.2 实验药品 恩氟烷为雅培制药有限公司生产，批号：20050099。

　　1.3 主要仪器 YLS-3T型跳台仪和ZH-500型小鼠避暗仪(安徽淮北正华生物仪器设备有限公司)。

　　1.4 动物分组及处理 按分层随机区组设计将小鼠分组，使各组小鼠雌雄比例、平均体重基本相同。在跳台实验和避暗实验中均将小鼠分为4组(n=10)：生理盐水(10 ml·kg-1)组(NS组)、恩氟烷(0.1 ml·kg-1、0.2 ml·kg-1、0.4 ml·kg-1)组(En0.1、En0.2、En0.4组)。训练前10 min，各组按照上述剂量腹腔注射生理盐水或恩氟烷。

　　1.5 跳台实验[3] 先将小鼠放入反应箱内适应3 min，然后底部铜栅通以0.05 mA电流，小鼠受到电击即会跳上平台躲避电击，如此训练5 min。用药后第1、2、3、5天将小鼠再次放在平台上，记录第1次跳下平台的时间(潜伏期)和3 min内跳下平台的次数(错误次数)，如果3 min内小鼠未跳下平台，错误次数记为0次，潜伏期记为180 s。

　　1.6 避暗实验[3] 实验装置分为明暗两室，两室之间有一直径为3 cm的圆洞，暗室底部铜栅通电。训练时先将小鼠放入反应箱中适应3 min，然后暗室底部铜栅通以40 V、50 Hz交流电，将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室即受电击。训练时潜伏期大于180 s者弃去不用。用药后第1、2、3、5天将小鼠再次放入明室，记录第1次进入暗室的时间(潜伏期)和5 min内进入暗室的次数(错误次数)。如果5 min内小鼠未进入暗室，错误次数记为0次，潜伏期记为300 s。

　　1.7 统计学处理 错误次数及潜伏期均用±s表示，用SPSS 11.5统计软件进行数据处理，采用单因素方差分析LSD检验。检验水准：α=0.05。

　　2 结 果

　　见表1、2。表1 恩氟烷对小鼠记忆的影响(跳台实验，n=10，±s)表2 恩氟烷对小鼠记忆的影响(避暗实验，n=10，±s)

　　组别用药后第1天错误次数潜伏期(s)用药后第2天错误次数潜伏期(s)用药后第3天错误次数潜伏期(s)用药后第5天错误次数潜伏期(s)NS组0.2±0.4295±120300±00300±00300±0En0.1组0.2±0.4292±190300±00300±00300±0En0.2组0.9±0.6*179±95**0.1±0.3296±140300±00300±0En0.4组1.3±0.7**47±67**0.2±0.4278±570.1±0.3291±280.1±0.3300±1 与NS组比较：*P<0.05，**P<0.01

　　与NS组相比，用药后第1天， En0.2、En0.4组跳台错误次数增多(P<0.05，P<0.01)，潜伏期缩短(P均<0.01);避暗错误次数增多(P<0.05，P<0.01)，潜伏期缩短(P均<0.01)。En0.1组跳台、避暗错误次数和潜伏期均无明显差异。用药后第2、3、5天，在跳台实验和避暗实验中，错误次数和潜伏期的差异均无统计学意义。3 讨 论

　　吸入麻醉药通常是经气道吸入给药，这将使动物身上连接一些管道，以致很多实验难以进行。根据吸入麻醉药的体内过程及我们的实验证实，吸入麻醉药经腹腔注射给药后同样能够达到麻醉作用[4-5]。在本实验中为了避免动物出现明显的中枢抑制而影响实验结果，选择了亚麻醉剂量腹腔注射。

　　人和动物的内部心理过程是无法直接观察到的，只能根据可观察到的刺激反应来推测脑内发生的过程。因此，对脑内记忆过程的研究只能从人类或动物学习或执行某项任务后间隔一定时间，测量它们的操作成绩或反应时间，其中跳台实验和避暗实验是常用的研究动物记忆的实验方法[3]。

　　在本实验中，与NS组相比，用药后第1天，En0.1组跳台、避暗错误次数和潜伏期均无明显差异，说明恩氟烷未对小鼠记忆造成损害。En0.2、En0.4组跳台、避暗错误次数增多，潜伏期明显缩短;避暗错误次数增多，潜伏期缩短。说明恩氟烷对小鼠的记忆造成损害，这可以有效避免术中知晓的问题。而用药后第2、3、5天，在跳台实验和避暗实验中，错误次数和潜伏期各组均无显著差异。说明恩氟烷对于小鼠的记忆损害是暂时性的，不会造成持久的记忆障碍，这可能是药物经过4～5个半衰期，已基本消除之故。至于恩氟烷损害小鼠记忆的机制，尚需进一步的研究。

　　【参考文献】

　　[1] 李宛诺，罗曙光.全麻病人的术中知晓问题[J].现代医药卫生，2004，20(16)：1657-1658.

　　[2] King H， Ashley S， Brathwaite D， et al. Adequacy of general anesthesia for cesarean section[J]. Anesth Analg，1993，77(1)：84-88.

　　[3] 刘少林，张均田.学习、记忆实验法[M]∥徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学.第3版.北京：人民卫生出版社，2002：826-834.

　　[4] 戴体俊，叶 妙，傅 英.注射挥发性麻醉药对动物的效应[J].临床麻醉学杂志，1997，13(5):262-263.

　　[5] 颜 梅，戴体俊.吸入麻醉药镇痛、催眠作用与GABAA受体的关系[J].中国药理学通报,2004，20(5):521-523.