小剂量咪达唑仑与氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响

作者：朱琳佳作者单位：徐州医学院麻醉学院2004级4班，江苏徐州221004 【摘要】  目的 观察小剂量的咪达唑仑与氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响。方法 将经跳台实验和避暗实验剔除后的80只小鼠均分为2大组（n=40）。每大组小鼠再按照随机分层区组设计分为4组（n=10）：生理盐水组（NS组）、咪达唑仑组（M组）、氯胺酮组（K组）、咪达唑仑+氯胺酮组（MK组）。给药后以跳台实验和避暗实验训练小鼠，24 h后用以上2法测定各组小鼠的潜伏期和错误次数。结果 M组或K组的潜伏期及错误次数与NS组无差异（P>0.05），MK组与NS组相比其潜伏期明显缩短（P<0.01），而错误次数显著增加（P<0.01）；MK组的潜伏期较M组或K组缩短（P<0.05），错误次数显著增加（P<0.01)。结论 小剂量的咪达唑仑或氯胺酮1次单用不损伤小鼠学习记忆能力，但2药小剂量合用明显损伤小鼠学习记忆能力。 【关键词】  咪达唑仑 氯胺酮 跳台实验 避暗实验 学习记忆    现代麻醉学已经取得了长足的进步，尤其在镇痛和肌松方面，但使用麻醉药后“术中知晓”问题却困扰着医疗界。国外术中知晓的发生率约为0.07%～8%［1-2］，国内约2%，心脏手术高达6%［3］。问卷调查表明，几乎所有的麻醉医生都承认他们实施过麻醉的患者中发生过全麻知晓，其发生率比我们所承认的要高出很多。在足够的麻醉深度下，听觉认知过程可能仍然存在，不良印象或伤害性评论可被患者记住，如表现为显性记忆，患者可能诉讼引起医疗纠纷；如表现为隐性记忆，可能导致心理创伤。所以消除在手术中产生的痛苦记忆是现代麻醉学的重要课题。本研究通过观察小剂量的咪达唑仑或氯胺酮1次单用和2药合用能否产生遗忘作用，从而为减轻或消除“术中知晓”提供用药依据。    1  材料和方法    1.1  实验动物和分组  昆明种小鼠80只，体重18～22 g，由徐州医学院实验动物中心提供。均分为2大组（n=40）。每大组按随机分层区组设计分成4组（n=10）：生理盐水组（NS组）、咪达唑仑组（M组）、氯胺酮组（K组）、咪达唑仑+氯胺酮组（MK组）。使各组雌雄比例和平均体重基本一致。    1.2  实验药品和仪器  咪达唑仑注射液（徐州恩华药业集团有限公司，规格：5 ml:5 mg，批号：20070209）；盐酸氯胺酮注射液（江苏恒瑞医药有限公司，规格：2 ml:0.1 g，批号：KH041107）。2药均用生理盐水稀释成所需浓度。YLS-3T型跳台仪、ZH-500型小鼠避暗仪均为安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司研制。    1.3  实验方法    1.3.1  给药方法和剂量  NS组腹腔注射生理盐水（10 ml/kg），5 min后皮下注射等容积的生理盐水；M组腹腔注射咪达唑仑（0.15 mg/kg），5 min后皮下注射生理盐水（10 ml/kg）；K组腹腔注射生理盐水（10 ml/kg），5 min后皮下注射氯胺酮（0.5 mg/kg）；MK组腹腔注射咪达唑仑（0.15 mg/kg），5 min后皮下注射氯胺酮（0.5 mg/kg）。各组第2次给药后5 min分别用跳台仪和避暗仪进行学习记忆训练。    1.3.2  跳台实验  将小鼠放在跳台仪各室的绝缘台适应环境5 min，10 s不从高处跳下，即将跳下习性不明显的小鼠剔除。各组小鼠依次给完药后5 min重新放在绝缘台上，此时绝缘台下的电栅通以0.25 mA的电流。各小鼠从绝缘台跳下受1次电击取出。24 h后进行跳台实验，记录各组小鼠第1次跳下平台的时间（潜伏期）和3 min内的跳下次数（错误次数）。测试时若小鼠停留在平台上超过3 min，潜伏期计为180 s，错误次数计为0次［4］。    1.3.3  避暗实验  将小鼠背对洞口放在避暗仪各室的明室后适应环境5 min，10 s不进入暗室，即将驱暗习性不明显的小鼠剔除。各组小鼠依次给完药后5 min重新放入明室，此时暗室底部铜栅通以32 V交流电，各小鼠进入暗室受到1次电击取出。24 h后进行避暗实验，记录各组小鼠第1次进入暗室的时间（潜伏期）和3 min内的进入暗室的次数（错误次数）。测试时若小鼠停留在明室超过3 min，潜伏期计为180 s，错误次数计为0次［4］。

 1.4  统计学处理  错误次数及潜伏期均用±s表示，用SPSS 13.0软件进行数据处理，计量资料用t检验，检验水准：α=0.05。    2  结  果    2.1  跳台实验结果  M组和K组的潜伏期和错误次数与NS组相比无统计学差异（P>0.05）。MK组较其它各组潜伏期明显缩短（P<0.01），错误次数显著增加（P<0.01），见表1。表1  跳台法咪达唑仑与氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响    2.2  避暗实验结果  M组或K组的潜伏期和错误次数与NS组相比无统计学差异（P>0.05）。MK组较NS组潜伏期明显缩短（P<0.01），错误次数显著增加（P<0.01）。MK组较M组或K组的潜伏期缩短（P<0.05），错误次数显著增加（P<0.01），见表2。表2  避暗法咪达唑仑与氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响    3  讨  论    遗忘也称记忆的空白、回忆的消失，是指局限于某一事件或某一时间内经历的遗忘。遗忘可分为顺行性遗忘与逆行性遗忘、进行性遗忘、心因性遗忘、近事遗忘与远事遗忘。咪达唑仑是苯二氮艹卓类的代表药物之一，其受体位于神经元突触膜上，在脑的颞叶、枕叶和边缘系统含量较高［5］，该受体激动后产生抗焦虑、镇静、催眠、抗惊厥、肌松和顺行性遗忘作用。迷达唑仑本身无镇痛作用，但可增强其他麻醉药的镇痛作用，其特点为起效迅速，作用短暂。氯胺酮是具有镇痛作用的静脉麻醉药，为非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗药，可产生明显的顺行性遗忘作用。咪达唑仑常作为麻醉前用药与氯胺酮合用，原因是氯胺酮虽然具有良好的麻醉镇痛功效，但它容易出现精神运动性反应，咪达唑仑可部分抑制这一反应，同时可减少麻醉药的用量。    这两种药单用达到一定剂量均可损伤学习记忆的功能［6-7］。本次实验发现，1次单用小剂量的咪达唑仑或氯胺酮对小鼠学习记忆损伤不明显，2药小剂量合用可使小鼠学习记忆明显减退，说明2药有协同作用。本结果提示，在临床麻醉中可小剂量合用氯胺酮与咪达唑仑增强患者的遗忘以减少或消除术中知晓和术后回忆，而不是单纯增加1种药物的剂量。麻醉要求达到催眠无回忆和阻断伤害性刺激反应，如果仅盲目地加深麻醉程度以达到避免和预防术中知晓，其结果可能会给患者带来严重的不良反应。本实验通过小剂量联合使用麻醉药减少或消除术中知晓的方法，旨在对临床合理用药提供些许帮助。

【参考文献】  ［1］ Wennervirta J, Ranta SO, Hynynen M. Awareness and recall in outpatient anesthesia ［J］. Anesth Analg,2002,95(1):72-77.

［2］ Davidson AJ, Huang GH, Czarnecki C, et al. Awareness during anesthesia in children: a prospective cohort study ［J］. Anesth Analg,2005,100(3):653-661.

［3］ 王 云,岳 云,吴安石,等.现代全身麻醉下术中知晓发生率的调查及分析［J］.中华麻醉学杂志,2004,24(8):637-638.

［4］ 张均田.学习、记忆实验法［M］//徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学.第3版.北京：人民卫生出版社，2002：826-827.

［5］ 玄庆阳,马海燕.人工遗忘术在麻醉中的应用［J］.黑龙江医学,2002,26(9):668-669.

［6］ 袁力勇,戴体俊,王霞民,等.咪达唑仑不同剂量和时机给药的遗忘程度［J］.医学研究杂志,2007,36(7):12-15.

［7］ 王 丹,戴体俊.氯胺酮对小鼠避暗潜伏期及错误次数的影响及其机制［J］.徐州医学院学报,2006,26(3):189-191.