静脉注射后环丙沙星在人眼房水内的药物水平
发表时间：2009-06-30 浏览次数：762次
作者：周蓓， 林晓峰， 吴伟， 叶茂果， 李青， 孙庆玲
作者单位：广州市天河区中心医院眼科，广东 广州５１０６５５
【摘要】 【目的】 研究人类血－眼屏障正常情况下环丙沙星在眼房水内的药物水平。【方法】 ２００６年８月至２００７年２月在我院住院手术的老年性白内障病人４５例（４５眼），按２∶１随机分为实验组及对照组，实验组手术前１ ｈ静脉注射环丙沙星（２００ ｍｇ），两组术中取房水，用双缩脲法测定房水蛋白含量，反向高效液相色谱法测定房水环丙沙星浓度。【结果】 白内障病人房水蛋白含量是（０．０６７ ± ０．０３７）ｇ／Ｌ，环丙沙星浓度是（０．１７２ ± ０．０６０）μｇ／ｍＬ。【结论】 老年性白内障病人血-房水屏障基本正常；血-眼屏障正常情况下，静脉注射环丙沙星房水中药物浓度不能达到大部分眼内致病菌９０％菌株最小抑菌浓度，提示静脉注射环丙沙星不能单独作为白内障病人手术前预防性用药。
【关键词】 环丙沙星； 血-眼屏障； 眼内渗透性； 房水药物浓度
Ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ Ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ Ｌｅｖｅｌｓ ａｆｔｅｒ Ｉｎｆｕｓｉｏｎ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｅｙｅｓ ∥
ＺＨＯＵ Ｂｅｉ， ＬＩＮ Ｘｉａｏ-ｆｅｎｇ， ＷＵ Ｗｅｉ， ＹＥ Ｍａｏ-Ｇｕｏ， ＬＩ Ｑｉｎｇ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ， Ｔｉａｎｈｅ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６５５，Ｃｈｉｎａ； Ｚｈｏｎｇｓｈａｎ Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ Ｃｅｎｔｅｒ， ＳＵＮ Ｙａｔ-ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１００６０， Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｌｙ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｅｙｅｓ ｗｈｅｎ ｂｌｏｏｄ-ａｑｕｅｏｕｓ ｂａｒｒｉｅｒｓ ａｒｅ ｎｏｒｍａｌ．【Ｍｅｔｈｏｄｓ】Ｔｈｉｒｔｙ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ ｃａｔａｒａｃｔ ｓｕｒｇｅｒｙ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ （２００ ｍｇ） ｐｒｉｏｒ ｔｏ ｏｃｕｌａｒ ｓｕｒｇｅｒｙ ａｎｄ ａｎｏｔｈｅｒ １５ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｓ ａ ｃｏｎｔｒｏｌ． Ａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒ ｗａｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ａｔ ｓｕｒｇｅｒｙ ｉｎ ａｌｌ ｅｙｅｓ， ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｂｉｕｒｅｔ ｃｏｎｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ． Ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒ ｗｅｒｅ ａｓｓａｙｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ-ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ （ＲＰ-ＨＰＣＬ） ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ．【Ｒｅｓｕｌｔ】Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃａｔａｒａｃｔ ｗａｓ（０．０６７ ± ０．０３７）ｇ／Ｌ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｏｆ ａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ（０．１７２ ± ０．０６０）μｇ／ｍＬ．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】Ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ-ａｑｕｅｏｕｓ ｂａｒｒｉｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃａｔａｒａｃｔ ａｒｅ ｂａｓｉａｌｌｙ ｎｏｒｍａｌ． Ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ａｑｕｅｏｕｓ ｈｕｍｏｒ ａｆｔｅｒ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｂｅｌｏｗ ｔｈｅ ｍｉｎｉｍｕｍ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ （ＭＩＣ９０） ｆｏｒ ｍｏｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｍｏｎ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｅｎｄｏｐｈｔｈａｌｍｉｔｉｓ ｉｎ ｂａｓｉａｌｌｙ ｎｏｒｍａｌ ｂｌｏｏｄ-ａｑｕｅｏｕｓ ｂａｒｒｉｅｒｓ，ｓｏ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｌｙ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ａｌｏｎｅ ｍａｙ ｎｏｔ ｂｅ ａｄｅｑｕａｔｅ ｆｏｒ ｐｅｒｉｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ； ｂｌｏｏｄ-ｏｃｕｌａｒ ｂａｒｒｉｅｒ； ｏｃｕｌａｒ ｐｅｎｅｔｒａｃｅ； ａｑｕｅｏｕｓ ｄｒｕｇ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
临床上有少数需行白内障等各种内眼手术病人因各种原因常须术前预防性应用抗生素以预防眼内感染，但由于血-眼屏障的存在，全身用抗菌药预防和治疗细菌性眼内炎一直是困扰眼科临床难题。近年来，有人认为环丙沙星是为数很少通过口服用药能进入人眼内并达到眼内炎致病菌９０％菌株最低抑菌浓度（ＭＩＣ９０）的广谱抗菌药［１］，被推荐为预防和治疗细菌性眼内炎用药［２］。那么，在人血-眼屏障相对完整情况下，静脉注射环丙沙星眼房水内药物渗透性如何？目前极少见这方面报道。
１ 材料与方法
１．１ 一般资料
２００６年８月至２００７年２月在我院住院手术的老年性白内障病人４５例（４５眼），其中男２１例（２１眼），女２４例（２４眼），年龄５２ ～ ８５岁，平均７２岁。按２ ∶ １随机数字表随机分为实验组（３０眼）及对照组（１５眼）。入选标准：连续住院手术老年性白内障患者。排除标准：患有糖尿病、眼底病、眼外伤及眼部炎症等影响血-眼屏障的疾病史。
１．２ 研究方法
１．２．１ 取 材 病人行白内障超声乳化术前静脉滴注环丙沙星注射液１００ ｍＬ（含２００ ｍｇ药物，四川科伦药业股份有限公司生产，病人知情同意），３０ ｍｉｎ注射完毕后送手术室行白内障超声乳化手术，术时取房水０．１ ～ ０．２ ｍＬ（控制在给药后５０ ～ ６０ ｍｉｎ内取标本），即置－２０℃待检，一周内检测。
１．２．２ 房水蛋白含量检测 使用德国ＢａｙｅｒＡＤＶＩ Ａ１２００全自动生化仪，运用双缩脲法测定房水总蛋白含量。检测时，采用双盲法。
１．２．３ 房水环丙沙星浓度测定 环丙沙星标准品由中国药品生物制品鉴定所提供（２００ ｍｇ／支）。采用美国安捷伦（Ａｇｉｌｅｎｔ）高效液项液相色谱仪。检测时采用双盲法。用反向高效液相法（按中华人民共和国药典２００５年第二部方法）测定房水中环丙沙星浓度。①色谱柱： Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ反相柱（４０ ｍｍ × ２５０ ｍｍ，５ ?滋ｍ）；流动相 ： 以０．０５ ｍｏｌ／Ｌ枸橼酸溶液-乙腈（８２：１８）用三乙胺调节ｐＨ至３．５；流速： １ ｍＬ／ｍｉｎ； 检测波长： 紫外检测波长２７７ ｎｍ；柱温：３０ ℃ ；进样量：１０ μＬ；纸速 ０．１ ｃｍ／ｍｉｎ。②标准品溶液的配制：精确取环丙沙星标准品１１．６ ｍｇ置１０ ｍＬ量瓶中，用７％磷酸溶液０．２ ｍＬ溶解后，加流动相稀释至刻度、摇匀，再取０．５ ｍＬ于２５ ｍＬ量瓶中，加流动相稀释至刻度、摇匀，即得对照品溶液。③标准曲线制备：取０．１、 ０．２、 ０．３、 ０．４、 ０．５、 ０．６、０．７ ｍＬ分别置 １０ ｍＬ量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取１０ μＬ注入液相色谱仪，记录色谱图，以环丙沙星质量浓度?籽（μｇ·ｍＬ－１）对环丙沙星的峰面积Ａ进行回归，得回归方程为：?籽 ＝ ０．０１３ ８５３ Ａ ＋ ０．０６２ ６８２， ｒ＝０．９９９ ８８３，结果表明： 环丙沙星在０．０３９ ３９ ～ ２．３６３ ６ μｇ／ｍＬ范围内线性关系良好。④样品处理：取房水１００ μＬ加６％高氯酸甲醇溶液１００ μＬ混匀，离心２０ ｍｉｎ（１１ ０００ ｒ／ｍｉｎ，ｒ ＝ ９ ｃｍ），取上清液１０ μＬ置高效液相色谱仪测定，得样本环丙沙星的峰面积，与环丙沙星标准曲线对比换算，计算房水中药物浓度 （μｇ／ｍＬ）。
１．３ 统计学方法
应用ＳＰＳＳ １２．０ ｆｏｒ Ｗｉｎｄｏｗｓ 统计软件进行数据的录入和分析。主要的统计分析方法为计量资料的描述性分析。用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ秩和检验进行两组间比较，Ｐ﹤０．０５为差异有统计学意义。
２ 结果
２．１ 环丙沙星的色谱行为
在上述色谱条件下柱效以环丙沙星对照品计，理论塔板数ｎ ＝ ３７８１．４， 环丙沙星保留时间为５．５５７ ｍｉｎ，无其他峰干扰。对照品、房水色谱图见图１。
２．２ 白内障病人房水总蛋白含量
实验组白内障病人３０只眼房水总蛋白含量是０．０１ ～ ０．１５（０．０６７ ± ０．０３７）ｇ／Ｌ，对照组白内障病人１５只眼房水总蛋白含量是０．０１ ～ ０．２１（０．０７４ ± ０．０４９）ｇ／Ｌ，两组比较无显著性差异（Ｚ ＝ ０．２４２，Ｐ﹥０．０５），均在正常值范围内。
２．３ 房水中环丙沙星浓度
实验组３０例白内障病人静脉注射环丙沙星，１ ｈ后房水中环丙沙星浓度是（０．１７ ± ０．０６）μｇ／ｍＬ，对照组未检出环丙沙星（Ｐ﹤０．００１）。
３ 讨论
３．１ 白内障病人血-房水屏障
眼的血-房水屏障由睫状体上皮细胞之间的紧密连接及基底膜和虹膜血管的内皮细胞及其连接构成，正常情况下睫状体血管内的大分子物质如蛋白质等不易渗透于房水中，正常人眼房水蛋白含量仅为０．０５ ～ ０．２ ｇ／Ｌ，为血浆蛋白的１／３００ ～ １／４００，因此，房水蛋白含量是评价血-房水屏障功能的一项重要指标［３］。本组白内障病人房水总蛋白含量是（０．０６７ ± ０．０３７）ｇ／Ｌ，在正常范围，表明白内障病人血-房水屏障基本接近正常。
３．２ 静脉注射环丙沙星房水中浓度
玻璃体切割及或玻璃体腔内注射抗生素预防及治疗细菌性眼内炎疗效肯定，但方法复杂而对眼球创伤大，寻找一种静脉用药能较好渗透到眼内并达到有效抗菌浓度的广谱抗菌药来预防和治疗细菌性眼内炎十分重要［４］。环丙沙星为第三代喹诺酮类药物，口服生物利用度较低（３０％ ～ ６０％），静脉滴注可弥补此缺点，其在血浆中半衰期３．３ ～ ５．８ ｈ，在房水中更稳定，静脉注射后０．５ ｈ后达高峰，３ ｈ内房水中的药物浓度保持较稳定水平，半衰期为３．５ ｈ［５］，其对革兰氏阳、阴性球菌、杆菌均有强大作用，是细菌性眼内炎致病菌最敏感的抗菌药之一［６］，许多学者试图将其作为细菌性眼内炎预防及治疗用药。Ｃｅｌｅｂｉ ［１］给白内障病人术前口服两次（间隔１２ ｈ）环丙沙星，房水中环丙沙星水平达０．６３ μｇ／ｍＬ，能达到大部分眼内致病菌９０％菌株最小抑菌浓度（ＭＩＣ９０），认为可作为预防及治疗细菌性眼内炎用药。而Ｍｏｒｌｅｔ［５］同样给白内障或青光眼病人术前口服两次环丙沙星，部分病人房水中环丙沙星水平达０．５ μｇ／ｍＬ，仍有２０％病人房水中环丙沙星水平在０．５ μｇ／ｍＬ以下。尽管这组病人在裂隙灯下未发现前房闪辉现象而认为无血-眼屏障障碍，但许多资料表明，青光眼病人血-房水屏障存在明显障碍［７］，在血-房水屏障障碍情况下，环丙沙星在房水中渗透性是明显增加的［８］。我们给一组白内障病人术前１ ｈ恒速滴注环丙沙星静脉，在药物平稳达稳态时，房水中环丙沙星水平仅达０．１７ μｇ／ｍＬ，我们的实验提示在人血-房水屏障正常情况下静脉用药环丙沙星房水中渗透性较低，不能达到大部分眼内致病菌ＭＩＣ９０。从理论上说，由于生物利用度的存在，环丙沙星静脉用药应较口服用药在房水中的浓度更高，我们推测，口服用药在人血-房水屏障正常情况下亦较难使房水中环丙沙星水平达ＭＩＣ９０。至于多次给药是否能使药物在房水中蓄积而达到大部分眼内致病菌ＭＩＣ９０有待进一步临床证实。
总之，我们的研究提示，白内障病人血-房水屏障基本接近正常，在人血-房水屏障正常情况下，环丙沙星静脉用药房水中药物浓度很难达到眼内致病菌ＭＩＣ９０，因此，环丙沙星不能单独作为白内障性细菌性眼内炎术前预防性用药，但因为血-房水屏障发生障碍时，环丙沙星在房水中渗透性是明显增加［６］，可作为白内障手术后以及眼穿通伤后细菌性眼内炎预防及治疗性用药。
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