老年肾病综合征患者腺苷脱氨酶的检测分析
发表时间：2012-05-16 浏览次数：675次
作者：刘同强,李娟娟,冯曦,戴春 作者单位：南京医科大学附属常州第二人民医院肾内科，江苏 常州
【关键词】 肾病综合征,腺苷脱氨酶,糖皮质激素,淋巴细胞
原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)的老年患者以微小病变型和膜性肾病多见,细胞免疫是其发展过程中具有必不可少的作用。有研究发现在肾病综合征(NS)活动时T细胞数量减少，亚群失调，功能失调和某些细胞因子增高，而在缓解期恢复正常〔1～3〕。腺苷脱氨酶(ADA)广泛存在于人体各种组织和细胞中，其中又以淋巴细胞中活性最高，是淋巴细胞的增殖和分化所必需的，因为在活动期NS老年患者存在着淋巴细胞功能失调〔4〕，被认为是细胞免疫的指标。本研究通过检测不同激素反应的NS老年患者和患病的不同时期血清ADA(SADA)及淋巴细胞内ADA(LADA)的活性变化，评估活动期NS及其亚群及缓解期的细胞免疫状态，并观察ADA活性与临床治疗效果的关系。
1 对象与方法
1.1 研究对象 43例NS老年患者均为本院肾内科2005年9月～2006年9月住院和门诊病人，年龄60～73岁(平均65.8±8.9)岁，其中男24例，女19例;15例健康老年人作为对照组，年龄56～74(平均65.0±9.1)岁，其中男8人，女7人。临床诊断为PNS，依据患者尿蛋白大于3.5 g/d;血浆白蛋白低于30 g/L;水肿;血脂增高。前两项为诊断所必需，并排除继发因素所致，肾功能正常;排除接受免疫抑制治疗，检测时无感染。糖皮质激素(GC)治疗方案依据内科学教材〔5〕。在发病初期经激素足量治疗4 w，采集活动期患者外周血，并随访观察活动期患者对GC的治疗反应，分为三个亚组：①激素敏感组(SS)：泼尼松足量治疗8～12 w内NS缓解。②激素依赖组(SD)：泼尼松足量治疗，减量到一定程度即复发。③激素抵抗组(SR)：泼尼松足量治疗无效。另取门诊随访的缓解期PNS病人17例，血白蛋白、肌酐、尿素氮均正常，分为短期缓解和长期缓解两亚组(分别指经激素治疗后，连续检测尿蛋白阴性，停药1个月和半年的病人)。均在清晨07:30空腹采集静脉血5 ml，肝素抗凝。
1.2 检测方法 血清ADA活性应用速率法测定，通过ADA偶联PNP、XOD和过氧化氢酶(POD)反应,生成紫红色的有机醌,通过动态测量有色醌550 nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性，试剂盒购自上海森雄公司，严格按说明书操作。测定仪器为全自动生化分析仪。外周血淋巴细胞内ADA活性测定：抗凝静脉血分离淋巴细胞后，取1×106淋巴细胞，经反复冻融10次，使细胞破坏，离心吸取上清液，测定ADA活性，同血清ADA活性测定。
1.3 统计学方法 实验数据以x±s表示，应用SPSS12.5统计软件。两组间比较采用t检验。
2 结 果
与对照组相比，活动期的NS老年患者SADA和LADA活性明显增高(均P<0.01)，在活动期PNS的亚组也是如此。不同的亚组相比，SR组活性最高，其次SD组，再次SS组。短期缓解组SADA的活性明显下降，基本降至对照组水平(P>0.05)，LADA活性在NS缓解期下降，但未降至对照组水平，与对照组相比，仍有统计学意义(P<0.05)。在长期缓解组SADA和LADA水平明显下降，达到对照组水平(均P>0.05)。见表1。表1 各组老年NS患者SADA和LADA活性比较 与对照组比较:1)P<0.05;2)P<0.01;与SS组比较：3)P<0.01;与SD组比较：4)P<0.01
3 讨 论
ADA广泛存在于全身各组织中,功能为催化腺苷脱氨生成肌苷,淋巴细胞内ADA的含量是红细胞的10倍,而T细胞的含量又高于B细胞。ADA是T淋巴细胞分化成熟不可缺少的成分，ADA活性可作为细胞免疫的新的指标〔6〕。当ADA缺乏时脱氧腺苷分解受阻,脱氧三磷酸腺苷(dATP)在淋巴细胞聚积,尤其未成熟的T淋巴细胞受dATP的毒性作用,抑制核苷酸还原酶，干扰DNA修复,促进DNA链断裂,导致细胞生长发育障碍。此外,腺苷和dATP通过多种方式影响机体免疫功能,如直接抑制应答反应等。
在T细胞不同的分化阶段ADA活性不同，未成熟和分化阶段显著增高。本研究中在PNS老年患者的SADA和LADA活性明显增高，但不同的亚组相比，SR组活性最高，SS组活性最低,提示其活性与激素治疗反应有关。LADA在NS病人增高，说明T细胞处于分化状态和不成熟阶段，反映机体存在细胞免疫缺陷，是NS发病机制之一,与本实验结果一致。血清ADA明显增高可能是淋巴细胞的溶解引起的ADA活性增强和释放增多。激素抵抗NS老年患者的SADA和LADA活性均最高，提示严重的异常细胞免疫状态，因此通常需要环磷酰胺，环孢素，甲泼尼松龙等治疗，经上述药物治疗后对ADA活性的变化还有待研究。在NS患者不同的病程阶段，SADA和LADA活性在活动期最高，短期缓解期次之，长期缓解期最低，提示其活性与病程有关。在短期缓解组病人SADA和LADA均恢复，但LADA未恢复到对照组水平。余庭龙等〔7〕也有同样的发现，这可能是复发的一个原因。长期缓解组的老年患者SADA和LADA活性均正常。实验结果表明SADA和LADA与临床治疗效果和病程有关，因此，临床检测有助于观察治疗反应，指导临床用药。
【参考文献】
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7 余庭龙，黄颂敏，许国章，等.原发性肾病综合征患者外周血淋巴细胞亚群、白介素2及其高亲和力受体表达的研究〔J〕.华西医科大学学报，2001;32(1):835.
