产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的检测和耐药性分析
发表时间：2014-07-24 浏览次数：1186次
大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌是医院感染常见的致病菌,由于第三、四代头孢菌素的滥用,其对抗菌药物的耐药性越来越严重,已成为全球医药界关注的焦点四。近年研究发现,大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌由于细菌染色体或质粒体产生超广谱β-内酰胺酶(EsBLs),从而对新一代EsBLs类药物耐药团。为了解我院产EsBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的检出率和耐药情况,本研究对2010年3月至2O12年3月我院临床分离出的331株大肠埃希菌和256株肺炎克雷伯杆菌进行检测和耐药性分析,现报道如下。
资料与方法
1.临床资料:共分离出大肠埃希菌331株和肺炎克雷伯杆菌256株,其中痰液214株,血液171株,尿液126株,其他76株,均经法国生物-梅里埃公司APIzOE系统和常规生化检方法检出,以大肠埃希菌ATCCzs叼2、肺炎克雷伯杆菌ATCC700603为质控菌株。
2.产EsBLs检测:采用纸片协同法,分别测量头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸两组纸片的抑菌环直径,加克拉维酸的抑菌环直径增加≥5mm,可视为产EsBLs株。
3.药敏试验:采用纸片法,选取2~3个菌落溶于0.9%氯化钠,配成0.5麦氏单位菌液浓度,将菌液均匀涂于M-H培养基表面,贴上药敏纸片,将培养基置于35℃培养过夜,记录抑菌环直径,按美国临床实验室标准(NC断药敏试验结果。哌拉西林、头孢唑林、头孢孟多、头孢西丁、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮、氨曲南、阿米卡星、环丙沙星、氧氟沙星和亚胺培南药敏纸片均购自Oxoid公司.
结果
1.产EsBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出情况:331株大肠埃希菌检出产EsB“I12株,检出率为3~s。8%,2“株肺炎克雷伯菌检出产EsBk99株,检出率为39.9%,检出率逐年上升。见表1。和肺炎克雷伯杆菌对第一代头孢菌素头孢唑林、第二代头孢菌素类抗生素头孢孟多、第三代头孢菌素头孢噻肟,青霉素类抗生素哌拉西林耐药率在90.0%以上,其中两者均对头孢噻肟耐药最为严重;对头孢曲松、头孢哌酮耐药在BO。0%以上;对碳青霉烯类抗生素亚胺培南敏感性最高。见表2。
讨论
近年随着大量广谱抗菌药物的广泛应用,细菌耐药性问题日益突出,其耐药机制较为复杂,如耐药酶的产生、细菌膜通透性的改变及胞质内药物的泵出机制等,而质粒介导的EsBh是主要耐药机制之一,给临床治疗带来极大困难,其也是造成医院感染和院外耐药菌株传播的主要原因网。某些革兰阴性菌,尤其是大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌,它们通过获得的EsBh裂解青霉素和头孢菌素类抗菌药物的基本结构——β内酰胺环,使其丧失抗菌活性,导致临床治疗失败凹。ES0h是丝氨酸蛋白酶的衍生物,大多等β-内酰胺酶结构中1~4个氨基酸突变而来。由于EsBLb的编码基因位于质粒中,可由质粒进行扩散和传播。范爰民和田秀红囹对大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌耐药机制进行了相关研究,在其分离出的株大肠埃希菌中,14株产头孢菌素酶(AmpC酶),256株产EsBh,3株膜孔蛋白基因缺失;57株肺炎克雷伯杆菌中,13株产AmpC,19株产EsB⒒,5株膜孔蛋白基因缺失,产AmpC酶和ESBh为其主要的耐药机制。陈实娥和邱小燕阍对重症监护病房大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌产EsB情况进行检测,发现佗株大肠埃希菌产EsBh菌株检出率为19.0%;19株肺炎克雷伯杆菌产EsBLs菌株检出率为36.8%。马丽萍网对临床分离出的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行产ESBLs检测,201株大肠埃希菌和174株肺炎克雷伯杆菌产EsBh菌株检出率分别为36.3%和40.8%。本研究结果显示,331株大肠埃希菌和256株肺炎克雷伯杆菌产ESBLs菌株检出率分别为33.8%和37.9%。徐秀英因对产EsBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌进行耐药性分析,发现产EsBLs的菌株对大部分抗菌药物耐药,对亚胺培南100%敏感。本研究中大肠埃希菌未发现对亚胺培南耐药现象,而肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南也表现较高的敏感性,耐药率仅为5.2%,这可能由部分肺炎克雷伯杆菌产生了新的突变基因所致阴。产EsBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌对头孢噻肟的耐药率最高,可能与我国是头孢噻肟酶的高发区有关。对喹诺酮类抗菌药物的耐药率相对较低,分别为33.9%、43.3%和40.2%、39.2%,可能与2008年卫生部颁布的《关于抗菌药物临床应用管理有关问题的通知》中严格界定了喹诺酮类药物的应用有关。产EsBLs的菌株对第一代头孢菌素头孢唑林、第二代头孢菌素头孢孟多、第三代头孢菌素头孢噻肟及青霉素类抗生素哌拉西林耐药率较为严重,与我院抗菌药物的滥用有关。
综上所述,我院产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌医院感染情况呈逐年上升趋势,耐药较为严重,临床应合理用药,控制耐菌株的出现及传播。
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