AFU联合AFP在原发性肝癌诊断及术后治疗中的临床价值

　　原发性肝癌(primaryhepaticcancer，PHC)是我国常见的恶性肿瘤之一。目前血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)检测是实验室辅助诊断PHC的重要肿瘤标志物之一，尽管其具有高度的特异性，但仍有40%左右的PHC患者不分泌AFP或分泌较低的浓度，影响了临床的早期诊断[1]。此外，由于血清AFP的衰减通常需要一个过程，接受介入手术治疗后的部分肝癌患者尽管病灶已经清除，但AFP降至正常水平仍需一段时间，难以及时反映肝癌患者术后治疗的效果[2]。近年来α-L岩藻糖苷酶(alpha-L-fucosidase，AFU)在PHC患者血清中高水平检出而受到广泛关注。AFU是一种溶酶体酸性水解酶，主要分布于肝和肾。目前大量研究表明[3-4]，在PHC患者体内AFU存在过表达的现象，其表达与AFP表达无相关性。AFU尤其对AFP呈现阴性或低水平的PHC患者更具辅助诊断价值，这弥补了AFP在PHC诊断中的不足，提高了诊断的敏感性。本研究旨在评价AFU单独或联合AFP检测对PHC的辅助诊断价值，并进一步探讨AFU在肝癌术后治疗监测中的作用。

1　资料与方法

1.1　一般资料　2013年1～5月收集本院肝胆外科、感染科及介入科PHC患者93例(其中术前40例，术后53例)，肝硬化患者血清15例，病毒性肝炎患者血清15例。所有PHC患者均经B超、CT筛查，病理组织切片证实并结合相应实验室指标检查确诊。收集15例健康体检人群作为对照组，所有入选对照组体检者各项指标正常，尤其排除肝功能异常者。

1.2　试剂与仪器　金斯尔AFU测定试剂盒、质控品及校准品由北京九强公司提供，ArchitectAFP测定试剂盒、质控品及校准品由美国雅培公司提供;奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪，Architecti2000全自动免疫分析仪。

1.3　方法

1.3.1　标本采集与处理　所有研究对象均清晨空腹抽取静脉血3mL，离心分离血清，于-20℃保存待测。

1.3.2　检测方法　AFU采用奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪以速率法检测，AFP采用Architecti2000全自动免疫分析仪以化学发光微粒子免疫法检测。所有检测均按试剂说明书进行标准操作。

1.4　统计学处理　采用SPSS17.0软件进行统计学分析。正态分布数据以x±s表示，非正态分布数据以中位数(犘50)、25百分位数(P25)、75百分位数(P75)表示。各组AFU和AFP水平组间比较采用Mann-WhitneyU非参数检验，用受试者工作特征曲线(ROC)评价AFU单独或联合AFP检测对PHC的辅助诊断价值。以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.1　各组AFU检测结果的比较　PHC组分别与肝硬化组、对照组比较，差异均有统计学意义(U=177.5，P<0.01);PHC组AFU水平高于病毒性肝炎组，差异有统计学意义(U=35.5，P<0.01)。与对照组相比，肝硬化组AFU水平稍偏高，但二者差异无统计学意义(U=89.0，P=0.35);对照组AFU水平明显低于肝癌组和病毒性肝炎组(P<0.05)。见表1。

2.2　PHC组患者术前、术后AFU及AFP检测结果比较　PHC组患者术后AFU、AFP水平均高于对照组(U=167.5，P<0.05)，但已明显低于术前水平(U=144.5，P<0.01)。见表2～3。

2.3　AFP、AFU单独检测，以及AFP联合AFU检测的阳性率比较　以AFP>13.4μg/L为阳性，AFU>40U/L为阳性，预先设定检出结果中只要有一项超过其参考值则判定为阳性。在PHC患者中单独使用AFP、AFU的阳性检出率分别为75%，62.5%，AFP联合AFU的阳性检出率为90%，其中以联合检测的阳性检出率最高(P<0.01)。

2.4　评价AFU、AFP对PHC诊断价值　AFU、AFP单独检测，以及AFU联合AFP的ROC下面积分别为0.727、0.798、0.858，其中以AFU最小，AFU联合AFP最大。

3　讨　　论PHC是目前最常见的恶性肿瘤之一，由于缺乏有效的早期诊断指标，一旦临床确诊往往进入了晚期，错过了最佳治疗时期。尽管临床上现有的PHC标志物众多，但每一种标志物在单独使用时既有其独特的优势，也有其局限性，很少有一种单一的标志物对PHC诊断达到既特异又灵敏的效果[5]。目前血清AFP是实验室辅助诊断PHC的重要肿瘤标志物之一，其对PHC诊断具有高度的特异性，但并非所有的肝癌细胞都分泌大量AFP。国内有研究发现，有10.0%～30.0%的PHC患者血清中AFP呈低水平表达，尤其是小细胞肝癌AFP阳性率仅35.7%[6]。AFU是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子的溶酶体酸性水解酶。近年来，国内外不断有研究证实AFU是对PHC检测的又一敏感指标[710]。本研究旨在评价AFU单独或联合AFP检测对PHC的诊断价值，并进一步探讨AFU在PHC术后治疗监测中的作用。本研究中ROC计算结果显示：AFU、AFP及AFU联合AFP检测的ROC曲线下面积分别为0.727、0.798、0.858，在单一指标中AFP对PHC的诊断价值要稍高于AFU，而AFU联合AFP检测的敏感性和特异性均高于单独使用AFU或AFP，这与其他相关报道一致[11]。作者的研究进一步显示，尽管AFU对PHC诊断具有较好的灵敏度，但AFU仍不适于单独用于诊断PHC，在本研究中发现病毒性肝炎组患者AFU水平明显升高，尽管明显低于PHC组，但其对PHC的诊断产生较大的干扰，这提示AFU水平的增高或降低似乎与肝脏受损伤的程度有关，而与肝脏恶性病变无太大关系，这种现象在早期研究中也有个别相关报道[12]。此外，在PHC中单独使用AFP、AFU的阳性检出率分别为75%，62.5%，AFP联合AFU的阳性检出率为90%，其中以联合检测的阳性检出率最高。因此，在PHC诊断中建议AFU联合AFP检测可大大提高其诊断率。本研究表明，PHC患者术后AFU、AFP水平仍均高于对照组，但已明显低于术前水平。相对AFU而言，PHC患者术后AFP显著下降，但仍远高于对照组(健康人群参考范围AFP<13.4μg/L)，而术后AFU水平已接近正常水平。由此可见，AFU能更灵敏地反映出PHC患者术后治疗恢复情况，可作为肝癌治疗术后监测的有效指标。此外，在本研究中仍有一个待后续解决的问题。本研究中AFU检测试剂是由北京九强公司提供的金斯尔AFU测定试剂盒，其提供的诊断PHC参考值为AFU>40U/L，而本实验由ROC计算出的临界值为25U/L，低于厂家提供的参考值。这种现象可能与实验室的仪器、检测环境以及本地区患者疾病情况不同有关，故不能单纯以厂家提供的参考值作为诊断PHC的依据，还需要各实验室在本实验室条件下通过对大量病例的统计分析，计算出本实验室的参考值，有待扩大样本量继续研究。

参考文献

[1]FawzyMontaserM，AminSakrM，OmarKhalifaM.Alpha-L-fu-cosidaseasatumourmarkerofhepatocellularcarcinoma[J].ArabJGastroenterol，2012，13(1)：9-13.

[2]邵浙新，徐骁，郑树森，等.肝细胞癌患者肝移植术后甲胎蛋白的变化与肿瘤复发[J].中华普通外科杂志，2006，21(5)：351-353.

[3]MalaguarneraG，GiordanoM，PaladinaI，etal.Serummarkersofhepatocellularcarcinoma[J].DigDisSci，2010，55(10)：2744-2755.

[4]ZhouL，LiuJ，LuoF.Serumtumormarkersfordetectionofhepatocellularcarcinoma[J].WorldJGastroenterol，2006，12(8)：1175-1181.

[5]孙华宝，徐龙.原发性肝癌实验室诊断及最新研究进展[J].实验与检验医学，2007，25(6)：607-609.

[6]张月铭，阮长胜，牛龙喜，等.联合检测血清AFU及AFP对原发性肝癌的诊断价值[J].临床医药实践，2004，13(9)：664-665.

[7]洪开听，夏邦世，陈凤凤.血清α-L岩藻糖苷酶对早期原发性肝癌的诊断价值[J].临床医学，2005，25(8)：56.

[8]易四维，曹永坚，罗强.用Roc曲线评价血清α-L岩藻糖苷酶在原发性肝癌中的诊断价值[J].热带医学杂志，2009，9(10)：1161-1163.

[9]熊利华，陈春琴，张春峰，等.血清A-L岩藻糖苷酶与甲胎蛋白和糖类抗原19-9在原发性肝癌诊断中的作用[J].临床和实验医学杂志，2010，9(4)：263-264.

[10]BertinoG，ArdiriA，MalaguarneraM，etal.Hepatocellualarcarcinomaserummarkers[J].SeminOncol，2012，39(4)：410-433.

[11]杜贤，覃坚.血清AFP、AFU和LDH联合检测对原发性肝癌的诊断价值[J].影像与检验，2011，9(22)，765-766.

[12]刘萃红.应用ROC曲线评价5项生化指标对肝炎的诊断价值[J].郑州大学学报：医学版，2008，43(6)：1236-1239.

(收稿日期：2013-10-18)