抗凋亡在白癜风治疗中的意义

　　作者：邓红宇(研究生),熊霞　　作者单位：四川，泸州医学院附属医院皮肤科

　　【关键词】 白癜风 ; 细胞凋亡

　　白癜风是一种常见的皮肤色素脱失性疾病，大量资料表明，白癜风患者表皮皮损处存在黑色素细胞缺失。组织病理学证据表明， 白癜风皮损处黑素细胞消失或减少[1]，白癜风患者黑素细胞破坏机制目前还不明确，但组织病理学以及一些实验室证据表明，不能除外凋亡在白癜风的黑素细胞破坏过程中发挥了重要作用[2]。组织病理学观察发现，白癜风患者皮损处黑素细胞消失或减少，而其周的基底细胞没有被破坏，这与凋亡精细调控的特点相符。大量的临床及实验研究发现黑色素细胞凋亡在白癜风的发病中扮演着相当重要的角色。Wang等[3]用Smyth鸡研究凋亡机制在黑素细胞破坏中的作用,用荧光素末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测原位细胞的凋亡。发现白癜风Smyth鸡的TUNEL+ 细胞数明显高于对照组。细胞凋亡程度也跟随黑素脱失的严重性而变化，活动期的色素脱失最高，提示凋亡和黑素细胞的黑素脱失有关。除TUNEL染色外，用细胞毒性T细胞(CD8+)或主要组织相容性复合物-Ⅱ(MHC-Ⅱ)类分子双染来探讨CD8+的浸润淋巴细胞和凋亡细胞数的关系。研究发现与正常色素的对照相比，CD8+ 和MHCⅡ 类细胞数在Smyth鸡发生可见色素脱失斑前2～4周是增高的，且直接和TUNEL+细胞数有关，不管是发病前，发病时还是色素减退的过程中。而且CD8+ 浸润的淋巴细胞就在TUNEL+细胞的附近。这些发现提示白癜风Smyth鸡的细胞凋亡是黑素细胞死亡的病理机制，是由CD8+细胞毒性T细胞诱导的。因此如何防止黑色素细胞的过度凋亡及促进黑色素细胞的再生在白癜风的治疗中有着重要的意义。

　　1 黑色素细胞凋亡机制

　　1.1 免疫因素

　　自身免疫被认为是白癜风目前最主要的发病机制。国内学者对白癜风患者外周血T淋巴细胞亚群进行了检测，结果T淋巴细胞亚群CD4、CD4/CD8明显降低，CD8明显升高，说明患者的细胞免疫功能受到抑制。陈金穆[4]等研究发现。活动期寻常型白癜风患者血清有67%检出抗黑素细胞IgG抗体，稳定期寻常型白癜风患者IgG抗黑素细胞抗体阳性率为30%：周萍英[5]等 研究发现。寻常型进展期与稳定期白癜风患者血清B2巨球蛋白(B2-M)水平均显著性升高，且寻常型患者血清IgG，IgA，IgM显著升高，提示寻常型白癜风患者存在体液免疫功能异常。而白癜风患者黑素细胞比其他细胞对免疫损害更为易感。细胞毒性作用在白癜风黑素细胞的破坏过程起重要作用。白癜风患者黑素细胞的细胞毒作用的免疫机制是一个复杂的过程，包括通过成对的粘附分子作用与效应淋巴细胞结合，靶抗原与其他细胞表面标志共同活化白细胞表面受体及触发细胞毒作用等从而介导黑色素细胞的凋亡。

　　黑色素自身破坏学说认为酚类物质的聚集及产生过多都对黑色素细胞有选择性的细胞毒作用，能损失黑色素细胞。神经化学因子学说推测周围神经化学物质可能对黑色素细胞有损害，如去甲肾上腺素和肾上腺素等神经化学因子在体外能使两栖类和鱼类的黑色素细胞变白;而损伤的黑色素细胞释放细胞抗原又能诱发免疫反应[6]。儿茶酚胺类作为中介可能参与这一病理过程。白癜风患者血清中的a2巨球蛋白(a2-m)水平升高可能与白癜风的发病机制有关[7]。酚类物质的聚集及神经化学物质的异常都会不同程度的导致黑色素细胞受损而诱发黑色素细胞的凋亡，导致黑色素细胞的缺乏。

　　1.2 黑素细胞自身抗体

　　利用免疫荧光补体固定试验可观察到白癜风患者的血清中存在着能与皮肤切片中的黑素细胞结合的IgG 自身抗体。活动期患者抗体水平明显上升[8 ]，Cui等[9] 用高度敏感的铕释放试验比较了白癜风患者和健康对照血清对黑素细胞的补体介导的细胞溶解作用，发现前者平均黑素细胞的溶解率为24% ，而后者仅为6% ，提示白癜风患者血清中的抗黑素细胞抗体能选择性地杀死黑素细胞，而且活动性患者更为常见。并且黑色素自身抗体的存在诱发机体一系列的抗原—抗体反应从而导致黑色素细胞的溶解及主动凋亡。

　　1.3 氧化应激

　　Schalireuter等[10]在进展期白癜风患者表皮检测到过氧化氢(hydrogen peroxide，H2O2)的持续蓄积，H2O2是活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)的成员之一，表皮细胞在其自身需氧代谢过程中及外界紫外线照射等环境影响下均可产生氧自由基(0R)。表皮细胞中SOD在保护机体免受氧自由基损害中发挥着重要作用。白癜风患者血清中超氧化物歧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶、黄嘌呤氧化酶活性，、丙二醛水平的变化，可估计自山基对机体的毒性影响以及机体清除自由基的能力。自由基O2和0H很容易和细胞大分子反应破坏细胞内环境的稳定，对细胞结构和膜产生破坏作用。Schallrcuter等[11]发现白癜风患者皮损处角朊细胞、黑色素细胞表面自由基清除剂硫氢还原蛋白酶的活性降低， 自由基易侵入黑色素细胞并将其损伤，导致黑色素细胞的凋亡。

　　1.4 微量元素

　　研究发现白癜风患者自由基防御系统部分酶活性降低，由于Cu、Zn、Se等微量元素的缺乏，使抗氧化水平的降低，导致核因子(NFKB)活化。DNA的氧化并活化聚ADP核糖转录酶(PADPRT)，使细胞内NAD/NADPH迅速耗尽、瓦解ATP，另外活性氧导致细胞膜脂质过氧化，消耗多不饱和脂肪酸和胆固醇，改变细胞内的钙离予平衡，并有可能活化死亡基因(ted-3)，导致细胞凋亡[12-13]。这就取决于氧自由基及其浓度的高低。

　　2 目前的抗凋亡治疗

　　2.1 免疫调节减少细胞凋亡

　　胸腺肽是一种免疫增强剂能提高机体的免疫功能。有学者报告，该组分能使淋巴组织产生白细胞介素2(IL-2)等多种活性物质，增加膜白介素2受体(mlL-2R)表达，与干扰素a、B(IFN-a、B)协同激活自然杀伤细胞(NK)活性。对人外周血T细胞增强有刺激作用，促进其分化.成熟为具有免疫功能的T细胞，使免疫功能紊乱状态改差[14],曾招才[15]等发现胸腺肽治疗后，白癜风患者的CD3、CD4明显提高.CD8则降低婀，说明患者的细胞功能逐渐恢复正常.UVB可促使某些细胞因子或炎症介质释放，进而刺激黑素细胞增殖迁移，同时可能改变机体的免疫功能。G Stinco等[16]发现在UV光谱中，窄谱(311nm)中波紫外线与普通UVB相比穿透力较强，大部分被表皮吸收，能更有效的促使黑素细胞体积增大，树状突延长，细胞内酪氨酸酶活性增强，使黑素合成增加达到治疗目的。研究显示，使用UV801KL治疗仪照射联合肌注胸腺肽较单独窄谱UVB照射治疗白癜风有效率要高，可能是窄谱UVB的治疗和肌注胸腺肽改变了机体的免疫功能，刺激黑素细胞增殖迁移，二者相辅相成，共同提高临床疗效，并且不良反应少。对白癜风的治疗具有良好的效果。

　　2.2 抗氧自由基导致的细胞凋亡

　　体外研究主要是对处于氧化应激中的黑素细胞具有保护作用的抗氧化剂的筛选及其机制的研究。多酚类化合物广泛存在于植物、水果、蔬菜中，黄酮类化合物是其中最大的一组。绿茶提取物尤其富含黄酮，主要包括儿条精及其衍生物、黄酮醇、咖啡因、酚酸等活性成分。绿茶提取物、槲皮素以及属于抗生素同时具有抗氧化功效的米诺环素能减少H2O诱导的黑素细胞死亡。而维生素C、叶酸、硒效果不明显[17～18]。含硫的抗氧化剂N一乙酰半胱氨酸及谷胱甘肽对多巴胺诱导的黑素细胞凋亡有保护作用[19]。

　　A Jalel[20]等研究发现白癜风患者血清中Cu、Zn、Se缺乏，使抗氧化水平的降低，导致核因子(NFKB)活化。DNA的氧化并活化聚ADP核糖转录酶(PADPRT)，使细胞内NAD/NADPH迅速耗尽、瓦解ATP，另外活性氧导致细胞膜脂质过氧化，消耗多不饱和脂肪酸和胆固醇，改变细胞内的钙离子平衡，并有可能活化死亡基因(ted-3)，导致细胞凋亡。因此补充白癜风患者血清中的微量元素能够增强白癜风患者黑色素细胞的抗氧化能力，从而减少黑色素细胞凋亡。

　　3 抗黑色素细胞凋亡在白癜风治疗中的意义

　　白癜风的发病机制目前尚不是十分的明确，但不论是自身免疫、氧自由基损伤还是黑色素细胞自身抗体的产生最终都会通过多种途径导致黑色素细胞的凋亡，大量的黑色素细胞凋亡得不到及时的修复将会导致黑色素供应减少从而引发临床症状。因此如何防止黑色素细胞的过度凋亡促进黑色素细胞的再生在白癜风的临床治疗中有着极其重要的意义。如何有效的防止黑色素细胞的过度凋亡必将成为白癜风治疗的新的策略及新方向。

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