穴位注射对复发性尖锐湿疣患者免疫功能的影响

　　作者：袁少英,伦新,覃湛,陈慰填,刘东生,张兆　　作者单位：广东省中医院珠海医院，广东珠海

　　【摘要】【目的】观察穴位注射卡介菌多糖核酸对复发性尖锐湿疣(CA)患者免疫功能的调节作用。【方法】将70例复发性CA患者随机分为2组，全部病例均运用激光治疗消除疣体后，治疗组用卡介菌多糖核酸穴位注射(取穴：①曲池、三阴交;②阳陵泉、太冲。两组穴位交替使用);对照组用卡介菌多糖核酸作肌肉注射，每周2次，连用12周。于治疗前及治疗3个月后检测患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值、自然杀伤(NK)细胞活性。另设正常对照组30例作比较。【结果】治疗前治疗组与对照组的CD3+、CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值及NK细胞活性比较，差异均无显著性意义(P>005)，但与正常对照组比较，除CD3+百分率无明显改变(P>005)外，两组患者的CD4+百分率、CD4+/CD8+比值、NK细胞活性均降低，CD8+百分率升高，差异均有显著性意义(P<001)。经3个月治疗后，两组患者的CD4+百分率、CD4+/CD8+比值、NK细胞活性均升高，而CD8+百分率均降低，差异有显著性意义(与治疗前比较，P<001);但治疗组上述指标的改善更加明显(与对照组比较，P<001)，并基本达到正常对照组水平(P>005)。【结论】穴位注射卡介菌多糖核酸疗法能调节复发性CA患者的免疫功能，提高患者的免疫力。

　　【关键词】 复发性尖锐湿疣/穴位疗法;卡介菌多糖核酸/治疗应用;穴，曲池;穴，三阴交

　　尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)是由人类乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)引起的一种性传播性疾病(STD)，应用物理、药物及手术等方法消除CA局部病变后，其复发率仍很高，如何防止CA的复发，是一个亟待解决的问题。笔者以卡介菌多糖核酸穴位注射治疗复发性CA患者，并观察其对外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞活性的影响，现报道如下。

　　1资料与方法

　　11病例选择标准

　　111诊断标准根据卫生部疾病控制司2000年8月颁布的《最新部颁性病诊疗规范和性病治疗推荐方案•尖锐湿疣诊疗规范(试行)》标准制定。(1)接触史：有非婚性接触史、配偶感染史或间接感染史。(2)临床表现：①男性及女性在生殖器、会阴或肛门周围，偶见口腔、乳房等处出现多个粉红色、灰白色或灰褐色丘疹或乳头状、鸡冠状或菜花状高起的赘生物。少数呈乳头瘤样增殖的巨大型尖锐湿疣，即BuschkeLoewenstein巨大型尖锐湿疣。②症状：自觉有痒感、异物感、压迫感或疼痛，常因皮损脆性增加而出血。女性可有白带增多。③女性患尖锐湿疣应与假性湿疣(绒毛状小阴唇)相区别，男性应与珍珠样阴茎丘疹相区别。男性及女性还要与扁平湿疣、鲍温样丘疹病、生殖器汗管瘤等相鉴别。④用体积分数为5%醋酸液涂抹皮损处，3～5min后变白。(3)实验室检查：①皮损活检有HPV感染的特征性凹空细胞的组织病理学变化特点。②必要时在皮损活检中用抗原或核酸检测显示有HPV。常见的是HPV6和HPV11型，少见为HPV16和HPV18型。

　　112纳入标准具备(1)、(2)及(3)中的任何一项指标可确诊，在接受本研究方法期间停用其他疗法。

　　113排除标准(1)年龄在16岁以下或60岁以上者，妊娠及哺乳期妇女;(2)精神病患者，肝肾功能不全者，免疫功能有缺陷者;(3)治疗前曾用过免疫调节剂者;(4)不符合诊断标准、未能严格执行治疗方案、无法判断疗效或资料不全等影响疗效或安全性判断者。

　　114剔除标准①疗程未结束而出现过敏反应或严重不良反应者，根据医生判断应停止者，即中止该病例临床试验，但已超过1/2疗程者应统计疗效。②试验期间有不洁性交史者。

　　12分组及可比性分析观察病例共70例，均为2004年12月至2006年12月本院男科、妇科、皮肤科收治的患者，按随机数字表法随机分为治疗组和对照组。治疗组35例中，男28例，女7例;平均年龄为(357±88) 岁;平均病程为(323±164)个月。在男性患者中，皮损分布于单一部位者(各分布于包皮、冠状沟、龟头、尿道口、肛周等)16例，皮损位于多个部位者12例;在女性患者中，皮损分布于单一部位者(各分布于小阴唇、阴道口、阴蒂、阴阜等)4例，皮损位于多个部位者3例。对照组35例中，男26例，女9例;平均年龄为(348±79)岁;平均病程为(386±126)个月。在男性患者中，皮损分布于单一部位者15例，皮损位于多个部位者11例;在女性患者中，皮损分布于单一部位者6例，皮损位于多个部位者3例。经统计学分析，两组患者的性别、年龄、病程和疣体分布比较，差异均无显著性意义(P>005)，具有可比性。同时，选择30例健康体检者设为正常对照组，其中男20例，女10例;年龄20～60岁，平均351岁。3组的性别、年龄比较，差异也均无显著性意义(P>005)，具有可比性。

　　13试验药品、仪器与试剂卡介菌多糖核酸由长沙九芝堂药业集团生产，规格：05mg/支。外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞检测采用美国BD公司FACSCalibur型流式细胞仪，由本院中心实验室专业人员严格按照说明书进行检测。

　　14治疗方法两组病例均先用激光治疗皮损，局部用体积分数为1‰新洁尔灭常规消毒，再以体积分数为1%利多卡因局部浸润麻醉，将激光头对准疣体，垂直于病损部位扫描，使其气化;巨大疣体则使用切割法。伤口以1/4000呋喃西林溶液湿敷，防止感染。经上述治疗消除疣体后，治疗组使用卡介菌多糖核酸穴位注射。取穴：(1)曲池、三阴交;(2)阳陵泉、太冲;任选一侧穴位，两组穴位交替使用。操作：穴位常规消毒，用5号针头5mL注射器抽取卡介菌多糖核酸注射液2mL，针头对准穴位捻转提插，得气后每穴注入药物1mg。每周2次，连用12周。对照组取卡介菌多糖核酸肌肉注射，每次1mg，每周2次，连用12周。

　　15疗效标准依据国家中医药管理局1994年颁布的《中医病证诊断疗效标准》。痊愈：皮损消失，疣体脱落，半年以上无复发;显效：疣体缩小≥50%，无新生疣体;有效：疣体缩小<50%,无新生疣体;无效：疣体无缩小，甚至增大，有新生疣体。

　　15观察指标所有患者于治疗前及治疗3个月以后检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)和NK细胞水平。

　　(2)复发情况：复发标准判断以激光去除疣体后，随访期间在原处或邻近部位出现新疣体为复发，无出现新疣体为无复发。于3个月内、3个月后至6个月内、6个月以后分别随访，观察并记录其复发情况。

　　16统计学分析数据库的录入及统计分析均在SPSS　120软件包上实现。

　　2结果

　　治疗组与对照组分别脱落1例和3例。治疗前治疗组与对照组的外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值、NK细胞活性比较，差异均无显著性意义(P>005)，但与正常对照组比较，除CD3+的百分率无明显改变(P>005)外，两组的CD4+百分率、CD4+/CD8+比值和NK细胞活性均降低，CD8+百分率均升高，差异均有显著性意义(P<001)。经3个月治疗后，治疗组和对照组的CD4+百分率、CD4+/CD8+比值、NK细胞活性均升高，而CD8+百分率均降低，与治疗前比较，差异有显著性意义(P<001);但治疗组上述指标的改善更加明显，与对照组比较，差异均有显著性意义(P<001)，并基本达到正常对照组水平(P>005)。复发性CA患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞活性变化比较

　　3讨论

　　现代免疫学认为，在正常机体内各T淋巴细胞亚群相互作用并维持一定的平衡，以确保免疫功能的正常，CD4+/CD8+比值是衡量细胞免疫功能的一个很重要的指标。因为CD4+/CD8+下降导致外周血T淋巴细胞对抗原刺激的增生能力降低，则细胞免疫状态失调[2-3]。人体内NK细胞具有识别正常和异常组织细胞的能力，在体内具有重要的免疫监视功能。NK细胞活性下降可导致体内清除瘤细胞和清除病毒感染的能力下降。本研究显示，通过检测正常人和CA患者外周血T淋巴细胞亚群，发现复发性CA患者外周血CD4+淋巴细胞百分率和CD4+/CD8+比值降低，而CD8+淋巴细胞百分率升高，NK细胞活性下降，表明T淋巴细胞亚群、NK细胞活性的改变与CA的病程、复发有密切关系。提示CA的发病与细胞免疫密切相关，CA患者存在细胞免疫异常，且复发性CA患者尤其明显。NK细胞活性下降越明显，则尖锐湿疣损害越多[4]。中医学认为本病主要由于机体正气不足，肝肾亏损，气血失和，卫外不足，秽浊毒邪凝结于肌肤，循经内注，聚久化热酿毒，致气滞血瘀下注阴器而发。而湿毒内结，瘀阻脉络，秽浊缠绵为其主要病机特点。由于湿毒为阴邪，其性粘滞，缠绵难去，容易耗伤正气，正虚邪恋以致容易复发，故难以根治。运用穴位注射卡介菌多糖核酸治疗CA，取穴曲池、三阴交、阳陵泉、太冲，其中阳陵泉为足少阳经合穴，太冲为足厥阴经输穴，二经互为表里，针之能清热解毒、行气化湿，三阴交为足太阴、足厥阴、足少阴三阴经交会穴，而足三阴经循行均经会阴部，曲池为手阳明经合穴，阳明为多气多血之经，针之能滋阴养血、行气活血。卡介菌多糖核酸是一种双向免疫调节剂，能提高NK细胞的活性，促进T淋巴细胞的细胞毒作用，具有调节细胞免疫和体液免疫功能。将药物作穴位注射，可使药物发挥其相应特有的治疗作用，药物对经穴的刺激又可产生类针感样作用，还有穴注药物的循经作用，均可起到良好的协同作用。符合中医治疗CA扶正固本、清热解毒、祛湿导浊、活血散结、化瘀消肿的治疗原则。本观察结果表明，使用卡介菌多糖核酸注射治疗后，患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值与NK细胞活性均有明显的良性调节作用，且穴位注射疗法较传统的肌注疗法效果更加明显。综上所述，复发性CA与机体的免疫功能低下有密切关系，卡介菌多糖核酸穴位注射能提高复发性CA患者细胞免疫功能，对复发性CA有良好的治疗作用，为治疗复发性CA提供了一种新手段，值得进一步研究和临床推广应用。

　　【参考文献】

　　[1]袁少英.穴位注射治疗尖锐湿疣50例远期疗效观察[J].新中医，2003，35(2)，48.

　　[2]杨健.尖锐湿疣的复发与细胞免疫功能[J].中华皮肤科杂志，1999，32(3)：174.

　　[3]刘贞富.尖锐湿疣诊断与治疗[M].武汉：湖北科学技术出版社，2000：63-66.

　　[4]霍永生.尖锐湿疣患者免疫功能的研究及免疫治疗进展[J].临床医药实践杂志，2005，14(2)：83.