干扰素预防尖锐湿疣激光治疗后复发临床与观察
发表时间：2009-10-12 浏览次数：583次
干扰素预防尖锐湿疣激光治疗后复发临床与观察作者：刘桂荣，张桂超，刘亚范 【摘要】 目的 采用临床观察和原位分子杂交技术，观察干扰素α1b局部注射对尖锐湿疣激光治疗后复发的预防作用。方法 试验组用二氧化碳（CO2）激光联合干扰素α1b局部注射治疗尖锐湿疣，对照组单独用CO2激光治疗。结果 利用原位杂交法检测两组患者治疗前后人乳头瘤病毒-DNA（HPV-DNA），试验组HPV-DNA阳性率为19.35%，复发率为16.13%，对照组则分别为56.67%和53.33%，两组阳性率和复发率相比差异均具有非常显著性（P＜0.001）。结论 干扰素α1b局部注射，可显著降低激光技术后尖锐湿疣复发率及HPV-DNA检出率。 【关键词】 尖锐湿疣；人乳头瘤病毒，原位杂交；干扰素；CO2激光 尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒引起的性传播疾病（STD），发病率占我国STD的第三位［1］。尖锐湿疣传染性强，复发率高，HPV与宫颈癌的发生密切相关，是目前STD研究重点之一。用干扰素治疗尖锐湿疣，临床报道较多。为探讨干扰素局部注射对尖锐湿疣复发的预防作用，笔者运用原位杂交技术进行了对比观察，现报告如下。1 资料与方法 1.1 一般资料 所有病例均来自我院性病专科门诊，凡伴有严重系统性疾病，其他病毒性疾病，6个月内用过免疫抑制剂者除外。尖锐湿疣患者61例，女46例，男15例。 年龄20~48岁，病程10~17天；初发48例，复发13例。所有患者均有婚外性交或配偶感染史。皮疹多为菜花状、丘疹状或扁平状赘生物，分布男性冠状沟、包皮和女性大小阴唇、阴道前庭等处。 1.2 主要试剂 HPV复位分子杂交试剂盒（In situ，DAKo公司出品，批号K602）。试剂盒含有下列试剂：生物素标记的广谱HPV-DNA探针，该探针可检测HN6、11、16、18、30、31、33、35、45、51及52共11个亚型的HPV-DNA；试剂盒提供HPV多型别检测阳性及阴性对照探针；亲合素-碱性磷酸酶；底物4-氯-3-吲哚酚磷酸盐和四甲基偶氮唑盐混合液（BCIP/NBT）。 1.3 方法 分组将61例患者随机分成两组：试验组31例，对照组30例。在局麻下用剪刀剪除典型的皮损及治疗后醋酸白上皮，醋酸白试验非阳性者，取其阴性上皮。标本用中性福尔马林固定，常规制片2份，1份做HE染色，另1份做原位杂交技术检测。两组治疗结束后均随访3个月，观察结果。 1.3.1 治疗方法 试验组先用CO2激光去除可见疣体，然后局部注射干扰素α1b（北京三元基因工程有限公司生产）；对照组单用CO2激光治疗。具体方法：常规消毒患处，1%利多卡因局部浸润麻醉。根据疣体大小调整CO2激光输出功率，液化或碳化清除疣体。治疗后外搽百多邦软膏直至创面愈合。试验组于CO2激光治疗后在创面基底部注射干扰素α1b 30×105u，隔日1次共7次。 1.3.2 原位杂交方法 按试剂盒说明书程序进行，具体方法：石蜡切片4~6μm，脱蜡水化；0.01%蛋白酶（苏州酶制品厂）消化，37℃ 10~15min；将探针深液滴加于切片上，95℃~100℃加热变性5min；置37℃湿盒内杂交60min；置预热48℃的洗脱液中30min；滴加碱性磷酸酶标记的链霉素，室温20min BCIP/MBT显色，核固红复染，树胶封片，光镜观察。试剂盒提供的HPV阳性及阴性对照探针均按以上步骤同步进行。 1.4 疗效及杂交结果判断 治愈：为患者经治疗后皮损完全消退，且随访3个月无新皮疹出现。复发（未愈）：为经CO2激光完全去除疣体后，随访时再次出现新的皮疹。原位杂交阳性反应为表皮浅层细胞核内出现蓝紫色至紫黑色颗粒。2 结果 2.1 临床疗效 所有病例皮损均一次性清除，创面无感染，平均9天愈合，无瘢痕形成。两组治疗效果见表1。 表1 两组治疗尖锐湿疣疗效比较 （略） 注：χ2=9.35，P＜0.001 2.2 试验结果 所有阳性对照探针均呈阳性，阴性对照探针均呈阴性。在治疗前61例尖锐湿疣标本中，均可见空泡细胞、棘层肥厚、角化不全等，治疗后对照组原位杂交阳性率56.67%，试验组阳性率19.35%。两组治疗前后原位杂交阳性率比较见表2。 表2 治疗前后两组原位杂交阳性率比较 （略） 注：χ2=9.04，P＜0.0013 讨论 国内治疗尖锐湿疣的方法主要用激光、冷冻、电灼、微波、涂药、手术切除，应用抗病毒药物，均难以解决复发问题。干扰素具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用，国内外临床给药方法及干扰素种类不同，干扰素的最佳剂量和疗程仍需进一步研究。 笔者应用原位杂交技术其敏感性均达90%以上［2］，检测61例治疗前尖锐湿疣标本，HPV-DNA阳性率为96.72%，同时对治疗后所有患者醋酸白上皮进行了检测，原位杂交阳颗粒主要见于棘细胞上皮层和角化不全的角质层细胞核内。试验组和对照组临床复发率分别为16.13%和53.33%，两组治疗后原位杂交阴性者均未复发。试验组阳性率低，临床复发率也低，这说明HPV检出率高低决定临床复发率的高低，也决定尖锐湿疣是否复发。 首先用CO2激光消除尖锐湿疣患者疣体及其周围亚临床感染病灶，能够一次性清除皮损，比国外单独用干扰素治疗尖锐湿疣更有效，缩短疗程，患者的依从性较好。与单独用CO2激光治疗相比，局部注射干扰素α1b可以抑制细胞内HPV的繁殖，同时增强了患者全身及局部的免疫功能，从而达到清除HPV，降低尖锐湿疣复发率的目的。【参考文献】 1 龚向东，叶顺章，张君炎，等.1991~2001年我国性病流行病学分析.中华皮肤科杂志，2002，35（3）：178-182. 2 黄莺，王康敏，何长武，等.人乳头瘤病毒6.11的原位检测.中国皮肤性病学杂志，2002，16（4）：246-248.
