不同分期乳腺癌患者血清氧化应激参数分析

据世界卫生组织(WHO)最近报道，乳腺癌是女性最常见的癌症之一，占女性癌症的16%且其发病率以每年2%的速度增长。2013年全球癌症统计数据显示，乳腺癌的新发病率和死亡率分别占女性肿瘤的29% 和14%[1]。由此可见，乳腺癌严重威胁女性的生命健康和生存质量。但约三分之二的乳腺癌早期患者及时治疗其生存期可达20年以上。因此，早期发现是乳腺癌患者预后和生存的基础[2]。近年来，氧化应激致乳腺癌的发生发展已引起国内外学者的广泛关注，但在研究报道中，多以单个或数个氧化物/抗氧化物为主，对总体氧化应激状态的研究较少，这不利于充分阐明乳腺癌的发病机制与血中总体氧化应激参数间的关系。因此，本文对乳腺癌患者、乳腺良性肿瘤患者和健康者血清中总氧化态(TOS)、总抗氧化态(TAS)和氧化应激指数(OSI)的水平进行比较，并分析不同临床分期的乳腺癌患者中三者的血清水平，从而探讨血中氧化应激状态与乳腺癌之间的关系。

1　资料与方法

1.1　一般资料　选择来自同一地区的女性乳腺癌患者91 例(A 组)、乳腺良性肿瘤患者51例(B组)和健康体检者35例(C组)作为研究对象，兼顾各组年龄相当。所有病例均根据临床体征、影像学检查和病理组织标本活检确诊。并根据TNM 分期系统将该组乳腺癌患者分为4期[3]：Ⅰ期19例，Ⅱ期32例， Ⅲ期28例，Ⅳ期12 例。所有研究对象的基本信息见表1(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。

1.2　样本采集　受试者空腹8～12h后，采集静脉血约5mL于BD Vacutainer真空采血管(普通管，不含防腐剂，美国BD公司)内，1h后至2h内以3000r/min离心15min分离血清，48h内进行检测，未测定前，-30 ℃低温保存。所有样本均在患者诊断48h后，进行手术和/或抗癌治疗前采集。

1.3　检测方法　血清TOS 检测用二甲酚橙法[4]，TAS 按照参考文献[5]的方法进行检测，在7600020全自动生化分析仪(日立，日本)上完成。OSI是TOS 与TAS 的比值，通过下述公式计算得出[6]：OSI=TOS(μmolH2O2 Eq./L)/TAS(mmolTroloxEq./L)×100。

1.4　统计学处理　所有数据均采用狓±狊和范围(最小值～最大值)来表示。氧化应激参数组间的差异性比较采用方差分析，组间多重比较采用狇检验，其在乳腺癌中的应用价值采用ROC分析，p<0.05为差异有统计学意义。应用SPSS19.0软件进行统计分析。

2　结　　果

C 组和患者血清氧化应激指标TOS、TAS 和OSI水平见表2(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。表2 显示C 组与A、B 组TOS、TAS 和OSI比较差异有统计学意义(p<0.05)。与C 组比较，A、B组的TOS和OSI水平均较高，TAS水平较低。各组间经狇检验进行两两比较发现：除A、B组的TOS 水平比较差异无统计学意义(q= -2.002，p=0.136)外，其余各组间各指标比较差异有统计学意义(p<0.05)。　　乳腺癌组根据临床分期分为4期，各期患者的氧化应激指标血清水平见表3(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。由表3可见，从Ⅰ ～ Ⅳ 期，其TOS 和OSI水平逐渐递增，TAS水平逐渐递减。各期间经狇检验进行两两比较发现：TOS水平Ⅲ期、Ⅳ期显著高于Ⅰ期且Ⅳ期显著高于Ⅱ;TAS水平Ⅳ期显著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期;OSI值Ⅳ期显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期且Ⅲ期显著高于Ⅰ期。　　血清氧化应激指标检测结果经ROC 曲线分析，结果见表4和图1(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)，尤登指数,经两两比较发现，AUCOSI显著高于AUCTAS(z=2.344，p=0.019)，而AUCOSI 与AUCTOS 及AUCTOS与AUCTAS比较，差异无统计学意义(p>0.05)。

3　讨　　论

所有需氧生物体内均可产生自由基(FR)和反应性氧类(ROS)。正常状况下，FR 和ROS在机体内参与各种正常的生理功能代谢，但过多时则攻击生物大分子，引起机体组织细胞氧化损伤。生物体为对抗FR 和ROS，有由二者代谢形式和机体抗氧化物质构成的过氧化抗氧化防御系统。生理状态下，该系统处于动态平衡，但很多因素可以破坏这种平衡[7]，使氧化反应增强，抗氧化反应减弱，导致氧化应激(OxS)发生。已证实[8]胞内氧化损伤主要由FR 和ROS 引起，其通过与膜脂质中的未饱和键反应，使蛋白质变性、核酸受损等，从而抑制正常细胞内很多组分的生理功能，最终触发癌相关因子启动，诱导癌发生[9]。研究表明，氧化应激在乳腺癌的发生、发展和转移中均起着重要作用[10]。为此，通过分析健康受试者、良性乳腺疾病患者和不同乳腺癌分期患者血清中总氧化/抗氧化状况，以了解乳腺癌患者的体内氧化应激状况。本文研究发现，乳腺良性肿瘤患者和乳腺癌患者中TOS和OSI水平显著高于健康体检者，而TAS水平则显著低于健康体检者。与乳腺良性肿瘤患者比较，乳腺癌患者血清中TAS显著降低，OSI显著增高，TOS 升高不显著。由此推论，乳腺疾病患者体内过氧化/抗氧化系统失衡，可能是其发病机制之一;乳腺癌患者该系统失衡更加显著，说明氧化应激与乳腺癌的发生关系密切。从临床分期来观察，乳腺癌Ⅰ 期到Ⅳ 期，TOS和OSI水平逐渐递增，TAS水平逐渐递减，表明氧化应激与癌症进程密切相关，充分反映患者体内抗氧化能力越低，其病情越严重或病程越长。因此，临床上可以根据血清TAS、TOS和OSI水平，大致推断患者的病情和病程，为该疾病的诊断和治疗提供可靠的实验依据。ROC 曲线分析显示TOS、TAS和OSI获得最佳诊断正确率(犢犐值最大)的临界点分别为17.08μmolH2O2equiv/L、1.61mmolTroloxequiv/L和1.06，此时三者AUC 分别为0.775、0.724和0.791，统计学检验显示AUCOSI显著高于AUCTAS。该结果表明在评价乳腺癌患者氧化应激状态时，OSI和TOS均优于TAS。但YI显示(见表4)，用此氧化应激参数诊断乳腺疾病没有足够的正确度(最大0.512)，因此，它们只可能是疾病发生、发展和疗效评估指标，而不是诊断的特异性指标。值得一提的是以往国内外报道[1113]在研究乳腺癌患者体内的氧化应激状态时，均只观察了某一个或某几个氧化/抗氧化物质的血清水平，这不足以反映乳腺癌患者体内的氧化应激状态。因为机体内过氧化抗氧化防御系统十分复杂，从其组成成分分析，不仅有已知的，可能还有尚未认识的氧化/抗氧化物质;而从其含量分析，或多或少均可能引起氧化抗氧化系统失衡，但不同的氧化/抗氧化物质在一起，其生理功能可能并非是简单的叠加，而是协同作用，放大其生物学效应[5，8]。因此，如果想要评价人体内氧化应激状态，最好能同时选择TAS、TOS和OSI这3个指标进行测定。

参考文献

[1] SiegelR，Naishadham D，JemalA.Cancerstatistics，2013[J].CACancerJClin，2013，63(1)：1130.

[2] 郑莹，吴春晓，张敏璐.乳腺癌在中国的流行状况和疾病特征[J].中国癌症杂志，2013，23(8)：561569.

[3] HammerC，FanningA，CroweJ.Overviewofbreastcancerstagingandsurgicaltreatmentoptions[J].CleveClinJMed，2008，75(Suppl1)：S10S16.

[4] ErelO.Anewautomatedcolorimetricmethodformeasuringtotaloxidantstatus[J].ClinBiochem，2005，38(12)：11031111.

[5] FengJF，LuL，ZengP，etal.Serumtotaloxidant/antioxidantstatusandtraceelementlevelsinbreastcancerpatients[J].IntJClinOncol，2012，17(6)：575583.

[6] AycicekA，ErelO.Totaloxidant/antioxidantstatusinjaundicednewbornsbeforeandafterphototherapy[J].JPediatr (RioJ)，2007，83(4)：319322.

[7] MillCP，ChesterJA，RieseDJ.EGFR Maycouplemoderatealcoholconsumptiontoincreasedbreastcancerrisk[J].Breastcancer(London)，2009，1(1)：3138.

[8] 俸家富，赵平武，王东.血液中总抗氧化态与疾病的关系[J].国际检验医学杂志，2009，30(6)：571573.

[9] ZarembaT，OlińskiR.OxidativeDNAdamageanalysisandclinicalsignificance[J].PostepyBiochem，2010，56(2)：124138.

[10]PanB，Ren H，LvX，etal.HypochloriteinducedoxidativestresselevatesthecapabilityofHDLinpromotingbreastcancermetastasis[J].JTranslMed，2012，10(1)：65.

[11]MuralikrishnanG，AmanullahS，BashaMI，etal.EffectofvitaminConlipidperoxidationandantioxidantstatusintamoxifentreatedbreastcancerpatients[J].Chemotherapy，2010，56(4)：298302.

[12]Sova H，JukkolaVuorinen A，Puistola U，etal.8Hydroxydeoxyguanosine：a new potentialIndependent prognosticfactorinbreastcancer[J].BrJCancer，2010，102(6)：10181023.

[13]LeeSA，LeeKM，LeeSJ，etal.Antioxidantvitaminsintake，ataxiatelangiectasiamutated(ATM)geneticpolymorphisms，andbreastcancerrisk[J].NutrCancer，2010，62(8)：10871094.

(收稿日期：20131008)