液基细胞学在恶性胸腔积液检查中的价值
发表时间：2014-01-20 浏览次数：507次
液基薄层细胞制片检查系统处理技术是于1996年获得美国食品与药物管理局( FDA) 认证并开始应用,可以提高癌前病变的检出率。1999 年被引入国内，也称TCT ( ThinPrep Cytology Test) 检测,广泛应用于妇科宫颈脱落细胞学诊断及普查工作。本文对天津市海河医院2012年1月至2012年12月间100例恶性胸腔积液的患者进行常规细胞涂片及液基细胞学检查，并进行分析，现报告如下。
1材料与方法
1.1标本来源：收集天津市海河医院2012年1月~2012年12月间100例恶性胸腔积液标本，其中男44例，女56例，年龄32~89岁，平均58.2岁。所有标本均进行常规细胞学涂片和液基细胞学检查。
1.2方法
1.2.1常规涂片制作方法：将新鲜标本静置30 min，取标本底部15 ml注入离心管中，以2 000 r/min离心10 min，弃去上清液，取沉渣0.2 ml均匀涂在载玻片上，自然晾干，95%乙醇固定，HE染色，中性树胶封片。
1.2.2液基薄层细胞制作方法：采用美国BD公司薄层液基细胞制片设备，液基细胞学沉降式制片染色。取新鲜标本15 ml放入50 ml离心管中，同时加入等量保存液，再将标本混匀,加入梯度密度试剂,分离标本中血液黏液干扰成分,富集提取细胞及诊断成分。将分离提取后的标本放入程控离心机中充分离心2次，后将标本放入涡流震荡器,使得细胞重新悬浮，过滤杂质，并置于全自动液基薄层制片染色机上，制片后中性树胶封片。
1.2.3读片及诊断标准：所有标本均经两名高年资病理细胞学诊断医师重复审核确诊，部分液基细胞学病例借助免疫细胞化学明确诊断。诊断标准采用细胞学三级分类法：①阴性：良性涂片，未发现癌细胞。②可疑：发现可疑癌细胞，但证据不足，无法确定。③阳性：找到肯定癌细胞。
2结果
2.1常规细胞学涂片与液基细胞学检查结果：100例标本中，常规细胞学涂片中阴性8例，可疑18例，阳性74例。液基细胞学涂片中阴性2例，可疑15例，阳性83例。利用免疫细胞化学方法对15例液基细胞学可疑病例进行免疫组化染色，13例被确诊为恶性肿瘤，另2例为反应性间皮细胞增生。
2.2所检肿瘤类型：见表1。
表1常规细胞学与液基细胞学所检肿瘤类型对比[例(%)]
类型常规细胞学液基细胞学腺癌62(83.8)83(86.4)鳞癌2(2.7)3(3.1)小细胞癌1(1.4)1(1.0)恶性间皮瘤2(2.7)4(4.2)淋巴瘤0(0)2(2.1)不能确定类型7(9.4)3(3.1)总计74(100)96(100)
3讨论
胸腔积液脱落细胞学检查是一项方便简单的检查方法，其痛苦少，费用低，有利于肿瘤的早期筛查。但传统的常规制片中，由于直接涂片，往往细胞成分较少，人工涂片易造成涂片不均，薄厚不一，部分细胞重叠，影响观察;标本中的血液、粘液、炎性细胞及坏死物等较多时，可使涂片背景模糊，掩盖肿瘤细胞，影响正确诊断;传统制片为先涂片后固定，易造成细胞退变，增加病理医师诊断强度与难度。液基细胞学制片技术可克服上述不足，提高诊断质量。王萍等对86例胸水分别采用液基薄层细胞学技术和传统方法涂片进行细胞学检查，液基细胞涂片法阳性检出率为52.3%(45/86)、质量满意度为84.8% (73/86)，传统涂片法阳性检出率为32.5%(28/86)、质量满意度为27.9% (24/86)[1]。胸腹水液基细胞涂片阳性检出率比传统涂片提高了19.8%，质量满意度提高了56.9%。两种涂片方法比较：液基细胞涂片的阳性检出率及涂片满意度明显优于传统涂片。本文中常规细胞学诊断阳性率为74%，液基细胞学诊断阳性率96%，两者比较具有显著性差异(P<0.01)。
与传统涂片相比，在液基细胞学涂片中细胞形态是有所不同的，需要有经验的病理细胞学医师仔细检查甄别：①肿瘤细胞经过细胞保存液、消化液处理以及离心后均会发生不同程度的固缩，相比传统涂片，其细胞体积变小，由以腺癌及小细胞癌明显;②细胞结构存在一定的破坏，部分肿瘤失去器官样结构，细胞排列松散，在肿瘤分型及判断来源上，造成困难;③背景发生一定变化，传统涂片中的癌性背景，如出血、坏死等很少见[2]。在恶性胸腔积液中，90%以上为转移性。本文中对100例恶性胸腔积液肿瘤分型比较，两种方法所检出均以腺癌多见，常规细胞学83.8%(62/74)，液基细胞学86.4%(83/96)，两者相比无显著差异(P>0.05)。提示液基细胞学可提高肿瘤的检出率，但仅从细胞形态上，难以提高准确分型及判断肿瘤来源，故临床应常规涂片与液基细胞相结合，以弥补相互不足。
近些年，随着病理技术的不断发展，液基细胞学又扩展了许多新技术的应用。如免疫细胞化学、荧光原为杂交、DNA倍体分析及基因检查等[3-4]。其可对常规诊断以很好的补充，同时对于肿瘤的分型、原发灶的来源及治疗与预后，均有重要指导作用。液基细胞学由于制片过程中良好的固定细胞，清除杂质，且不破坏细胞原有的特质。故经液基细胞制片的脱落细胞标本，可直接涂片进行免疫细胞化学染色，避免再次取材缩短诊断时间，且方法简单，特异性较高，有利于临床开展。本文中对15例可疑液基细胞学标本进行免疫细胞化学检查，其中确诊阳性13例，提高了诊断质量。
4参考文献
[1]王萍,李二虎，郭玉娜，等.液基细胞技术在非妇科肿瘤细胞诊断中的应用意义[J].河北医药，2011,33(23)：3621.
[2]肖颖，念其钱.痰液基细胞学技术应用体会[J].福建医药杂志，2010，32(2)：91.
[3]许立莉，李淼，杜明伟，等.痰液肺癌细胞Ras基因和P63基因的表达与分子生物学意义[J].中国组织化学与细胞化学杂志，2011，20(6)：616.
[4]Kim S，Owens CL.Analysis of ThinPrep cytology in establishingthe diagnosis of small cell carcinoma of lung[J].Cancer Cytopathology，2009，117(1):51.
[收稿日期：2013-02-04编校：王丽娜]
