胰腺癌患者血清中糖类抗原199和基质金属蛋白酶-2的表达及意义

　　作者：谭劲赟,孟蔚韦华　　作者单位：兰州市第二人民医院普外一科，甘肃 兰州

　　【摘要】目的：分别检测胰腺癌患者和正常对照组血清中糖类抗原199(CA199)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平，并分析其与胰腺癌临床特征的相关性，以期为临床工作提供理论支持。方法：选取我院收治的90例经术后病理确诊为胰腺癌的患者作为观察组，90例健康成人血清作为正常对照组，应用酶联免疫吸附试验检测血清中CA199和MMP-2的含量。结果：观察组患者血清中CA199和MMP-2表达量显着高于对照组，CA199和MMP-2的表达量与分化程度、神经浸润及转移密切相关。经相关分析，胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表达呈正相关。结论：CA199和MMP-2在胰腺癌患者血清中高表达，二者可能在胰腺癌发生发展中起重要作用;早期联合检测CA199和MMP-2可能对判断患者的预后及指导临床治疗有重要价值。

　　【关键词】 胰腺癌;糖类抗原199;基质金属蛋白酶-2;诊断

　　[ABSTRACT] Objective： To study the expressions of serum CA199 and MMP-2 in patients with pancreatic carcinoma， and to explore their relationship with clinical characteristics of the disease. Methods： The expressions of serum CA199 and MMP-2 in 90 patients with pancreatic carcinoma and 90 healthy counterparts were detected and compared with enzyme-linked immunosorbent assay. Results： The expressions of CA199 and MMP-2 were obviously higher in the patients with pancreatic carcinoma than that in healthy control group. The expressions level of CA199 and MMP-2 were obviously correlated with differentiation degree， perineural invasion and metastasis status. For patients group， expression of CA199 was positively correlated with MMP-2. Conclusions： High expression levels of CA199 and MMP-2 may indicate their important roles in the occurrence of pancreatic carcinoma. Combined detection of CA199 and MMP-2 can help to predict prognosis and choose treatment for patients with pancreatic carcinoma.

　　[KEY WORDS] Pancreatic carcinoma; CA199; MMP-2; Diagnosis

　　胰腺癌是危害人类健康的重要疾病，血清中各种细胞因子对预后及治疗的指导作用逐渐引起人们的关注[1]。糖类抗原199(CA199)是由单克隆抗体所识别的一种黏液性糖蛋白，基质金属蛋白酶-2(MMP-2)是基质金属蛋白酶家族的重要成员，参与消化道肿瘤的进展[2]，CA199和MMP-2在肿瘤中均高表达，关于二者在不同临床特征的关系及相关性，目前尚未见报道。本实验关注胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的检测情况，探讨其表达的关系及意义。

　　1　资料和方法

　　1.1　临床资料

　　收集2009年1月～2010年12月在我院诊断治疗、并经术后病理确诊为胰腺癌患者，共90例，其中男性51例，女性39例，年龄36～78岁，平均59.2岁。纳入标准均符合WHO消化系统肿瘤病理学和遗传学诊断标准，并经两位病理主治医师共同阅片后确诊。排除标准：(1)合并其它系统恶性肿瘤的患者;(2)伴有风湿免疫性疾病的患者。选取同期健康体检成人血清90例作为对照组。二组在性别构成、年龄、体重等相关因素的比较中，差别无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

　　1.2　CA199和MMP-2的检测

　　观察组患者手术前1～2天的次日清晨空腹抽取静脉血10 mL，经枸椽酸钠抗凝后，以3 000 rpm离心10 min，留取血浆，于-20 ℃冰箱中冻存备用;对照组采血及保存方法同上，并均在取血后一个月内集中检测。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中MMP-2的表达。应用电化学发光原理检测CA199的表达。操作由同一检验师操作，避免人为误差。

　　1.3　统计学处理

　　实验数据应用SAS 6.12统计软件进行统计分析，两组间比较采用t检验，并计算其相关性，以P<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结果

　　2.1　CA199和MMP-2在观察组与对照组中的表达

　　观察组患者血清中CA199和MMP-2的表达量明显高于对照组，t分别为19.23、20.13，P均<0.01。见表1。表1　CA199和MMP-2在观察组与对照组中的表达

　　2.2　观察组不同临床特征患者血清中CA199和MMP-2的表达

　　观察组患者血清中CA199表达量与分化程度、神经浸润及转移密切相关(t分别为13.25、8.05、7.64，P均<0.01)，MMP-2表达量与分化程度、神经浸润及转移有关(t分别为7.64、8.75、11.20，P均<0.05)。见表2。表2　观察组不同临床特征患者血清中CA199和MMP-2的表达

　　2.3　胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2表达的关系

　　对胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表达进行相关分析，结果显示胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表达呈正相关(r=0.38，P=0.032 2)。

　　3　讨论

　　胰腺癌是消化道最常见的恶性肿瘤，近年我国胰腺癌发病率明显上升，居消化道肿瘤死亡原因的第二位[3]。胰腺癌的预后很差，综合治疗后的5年生存率仅为1%～5%，原因之一就在于胰腺癌的早期症状缺乏特异性。随着医学影像学的不断进步，结合血清肿瘤标记物测定，胰腺癌的早期诊断水平也有了显着的提高。肿瘤标志物是指肿瘤细胞分泌或脱落到体液或组织中的物质，或是宿主对体内新生物反应产生并进入到体液或组织中的物质[4]。CA199是一种与消化道肿瘤等相关的肿瘤标志物，其发展与胰腺癌的发展阶段密切相关。有研究认为CA199水平越高，其中位生存期越短，而CA199低者，预后较好。因此早期检测可能对肿瘤的预后有一定价值[5]。基质金属蛋白酶是一组结构上具有极大同源性、能够降解细胞外基质蛋白的内肽酶的总和，因含有金属离子(锌、钙)而得名。MMPs 以酶原形式分泌[6]，几乎能降解细胞外基质的所有成分的酶，在肿瘤侵袭转移中具有重要意义，人们关注最多是的MMP-2。MMP-2也称明胶酶A，在体内可由多种细胞分泌、如结缔组织细胞、内皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、胸腺细胞、粒细胞、角质细胞、成纤维细胞等，并具有明胶酶的活性，以酶原的形式分泌，激活后主要降解IV型胶原、纤维粘连蛋白、弹性蛋白等细胞外基质成分，其在组织与血液中均高表达[7,8]。

　　本实验通过对90例胰腺癌患者的血清进行CA199和MMP-2的检测，结果显示胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表达明显高于正常对照组，提示CA199和MMP-2在胰腺癌的发生中起一定作用。结果显示CA199和MMP-2均与胰腺癌的分化程度、神经浸润及转移密切相关，提示CA199和MMP-2参与了胰腺癌的进展。由于分化程度与转移均与患者的预后相关，也提示早期检测二者的表达可能对判断预后有一定价值，本实验均为术前的血液标本，标本留取简单，方便，检测后对临床诊断和指导治疗均有一定帮助，因此，临床中可以应用。本研究对结果进行相关分析，显示二者具有正相关性，提示二者可能具有共同作用，但是其机理和作用途径还需要更多基础实验证实，也需要我们在后续研究中扩大样本后进一步明确。肿瘤发展过程中细胞外基质的破坏需要间质细胞或肿瘤细胞产生的不同蛋白酶的协同作用，在肿瘤的侵袭与转移过程中，细胞外基质的基底膜降解是最基本的一步，主要是MMP-2发挥作用[9]。由于肿瘤组织中有新生的丰富血管，因此，CA199和MMP-2在肿瘤中分泌后，可进入血液循环中，使外周血中较容易检测到CA199和MMP-2的表达。

　　总之，胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2表达量增加，二种蛋白可能参与胰腺癌的发生发展，联合检测CA199和MMP-2的表达可能对判断病情及预后有重要意义。

　　【参考文献】

　　1　张卓， 石静滨， 郑永胜. CA199、CA50联检对胰腺癌的诊断价值[J].放射免疫学杂志， 2001， 14(1)： 11-12.

　　2　罗力， 庞久玲， 许志萍， 等. MMP-2在胃癌中的表达及意义[J].山东医药， 2008， 48(16)： 39-40.

　　3　庄会峰， 刘名霞， 候素君， 等. 胰腺癌患者检测TSGF、CA199、CA242、AMS及LPS的临床意义[J].医学检验与临床， 2006， 17(4)： 31-31.

　　4　苏明， 赵欣. 肿瘤标记物CA199、CEA和CA125在胰腺癌诊断中的价值[J].军医进修学院学报， 2008， 29(3)： 204-205.

　　5　崔秀玉， 李秀平， 于谨铭， 等. 血清CA199、CA242、CEA联合检测对胰腺癌的临床意义[J].医学检验与临床， 2010， 21(5)： 14-16.

　　6　刘爱东， 庞久玲， 刘士生. 胃癌中基质金属蛋白酶-9和CD105表达关系的研究[J].中国老年学杂志， 2009， 29(4)： 886-887.

　　7　马清涌， 董博. MMP-2， TIMP-2在胰腺癌组织的表达及临床意义[J].第四军医大学学报， 2004， 25(1)： 72-74.

　　8　吴丛山， 刘徐桂. CA199、CA125、CEA联检对胰腺癌诊断价值的评价[J].放射免疫学杂志， 2005， 18(6)： 505-507.

　　9　李杰， 童春帆， 李强. 胰腺癌组织MMP-2表达及其意义的探讨[J].中华肿瘤防治杂志， 2010， 17(21)： 1761-1763.