熊果酸抗肿瘤作用研究进展

　　王春雷，芦柏震，侯桂兰　(浙江省肿瘤医院，浙江 杭州 　310022)

　　关键词:熊果酸，抗肿瘤，药理作用，综述

　　熊果酸 ( ursolic acid)，又名乌索酸，属三萜类化合物，具有很多种药理学活性，其最突出的作用为抗肿瘤，其防癌抗癌作用已引起药物学专家的重视。

　　1　 预防、 抑制肿瘤形成

　　肿瘤的形成是多因素、 多步骤、 多基因突变的过程，已知许多化学致癌物能诱发和促进肿瘤形成，而熊果酸对肿瘤形成各阶段都有预防和抑制作用。① 熊果酸能抗 DNA突变、 抑制癌变的启动，试验研究发现熊果酸能对抗致癌物如苯并芘、黄曲霉素诱发的基因突变。②熊果酸还具有抗诱变和抗促癌作用。Guevara等研究显示熊果酸能使诱变剂所致的多染色质的微核红细胞数减少 76 %。Huang等发现熊果酸能明显抑制 TPA对二甲基苯并蒽 (DMBA) 诱发的小鼠皮肤癌的促癌作用， 其机制是 TPA能诱导表皮鸟氨酸脱羧酶(ODC) 活性增强，熊果酸能抑制上述环节，从而引起多胺枯竭，生长受抑制使细胞积聚在 G1期，并出现分化。③熊果酸还具有抗氧化作用。活性氧自由基与肿瘤的发生发展密切相关，Balanehru和 Nagarajan研究表明熊果酸有较强的抗氧化作用和捕获 O2 -自由基的能力，在肝微粒体和 P450单胺氧化酶系中对脂质过氧化均有较强的抑制作用。另有实验表明熊果酸能抑制花生四烯酸代谢过程中 52 脂氧合酶、 环氧合酶活性，阻止前列腺素与白三烯生成，这可能是熊果酸抑制炎症反应、 抑制脂质过氧化物的原因。Subbaramaiah等研究表明熊果酸能抑制人乳腺上皮细胞中的环氧化酶 2的转录，也由此抑制前列腺素 2生成。

　　2　 细胞毒作用

　　熊果酸能直接杀伤肿瘤细胞。李杰等用熊果酸探讨对 T细胞淋巴瘤细胞株 Jurkat杀伤抑制作用，结果显示:在高剂量时，显示较强的细胞毒作用。L i等用熊果酸对人结肠癌 HCT2 15细胞株进行处理，在 48 h和 60 h细胞数显著减少，而未经处理的细胞仍呈指数生长曲线，熊果酸的 I C50值为30μmol·L - 1。用流式细胞仪进行细胞周期分析发现，熊果酸的细胞毒性比较强，使细胞停滞在 G0期和 G1期，同时使 S期的细胞数减少。L ien等发现熊果酸对 HL2 60和 CCRF2CEM具有细胞毒作用。另有报导显示熊果酸对 S180细胞也呈细胞毒作用。

　　3　 肿瘤逆转作用及抗侵袭性

　　肿瘤逆转指恶性肿瘤在某些体内外分化诱导剂存在的条件下，重新分化而向正常方向逆转的现象。Lee等报道，715μmol·L - 1的熊果酸可以诱导 F9畸胎瘤细胞成为内胚层细胞，并且引起与其分化有关的 Ⅳ型胶原及维甲酸受体表达增加，由于熊果酸结构上类似糖皮质激素，可通过与糖皮质激素受体或类似核受体结合发挥作用。Cha等对侵袭性最强的人 HT1080纤维瘤细胞进行研究，实验表明熊果酸能降低基质金属酶 2 9 (MMP2 9)基因的表达，从而对抗人 HT1080纤维瘤细胞的侵袭性。

　　4　 抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡

　　多数研究显示熊果酸对肿瘤细胞有增殖抑制作用，也有诱导凋亡作用。它们与肿瘤的发生、 发展和消退有密切关系。樊文明等研究用女贞叶有效成分熊果酸对人舌磷癌细胞株 TSCCa细胞增殖的影响，结果显示熊果酸能抑制人舌磷癌细胞株 TSCCa细胞增殖，从而发挥抗肿瘤作用。吴其年等探讨熊果酸对人乳腺癌细胞 (MCF2 7)增殖抑制和诱导凋亡的作用，结果 20μmol·L - 1熊果酸浓度起对 MCF2 7细胞的增殖抑制率显著升高 ( P < 0 . 01)，呈剂量依赖性，半增殖抑制浓度 ( I C50)为 36 . 18、 20、 和 30μmol·L - 1熊果酸使细胞凋亡率显著升高 ( P < 0 . 01)，可见熊果酸具有抑制 MCF2 7细胞增殖和诱导凋亡的作用。黄炜等研究表明熊果酸对人肺癌细胞既有增殖抑制作用又有诱导凋亡作用。张秋萍等探讨熊果酸在体外对人红白血病 K562细胞系的作用机制。结果显示熊果酸在体外对 K562细胞具有中度增殖抑制效应，并呈浓度和时间依赖性。在熊果酸作用下 K562细胞呈现凋亡征象，说明熊果酸在体外对 K562细胞有诱导凋亡作用。

　　5　 抑制肿瘤血管形成

　　新生血管形成是肿瘤生长和转移的至关重要的病理过程，而在肿瘤新生血管形成过程中，血管内皮细胞 (VEC)的活化、 增殖、 迁移及小管形成是其关键步骤。目前已经发现了许多血管再生抑制剂，如鱼精蛋白、 干扰素、 血小板因子 24等，但因毒性较大，临床应用受到限制。Sohn等以鸡胚胎绒毛膜 (CAM)实验模型进行研究，结果显示熊果酸有很强的血管生成抑制作用，有剂量依赖性，对于每个 CAM的最大半数抑制剂量 ( I D50 )为 5μg。王兵等探讨熊果酸对体外血管的形成的抑制作用，结果显示熊果酸质量浓度为 62 . 5～500mg·L - 1时对培养血管内皮细胞 (VEC)增殖呈剂量依赖性抑制。在质量浓度为 500 mg·L - 1时，对 VEC迁移及小管形成均有较强的抑制作用。

　　6　 增强免疫功能

　　熊果酸能使小鼠的巨噬细胞吞噬功能显著提高，体内试验表明可明显增强机体免疫功能。You等研究发现熊果酸能诱导小鼠休止巨噬细胞释放 NO、 T NF2 α增多，并呈剂量依赖性，这是通过核因子 2 kB (NF2 kB)复合物介导，使一氧化氮合成酶 ( i NOS)的 mRNA及 T NF -α的 mRNA 水平提高，从而上调 i NOS和 T NF2 α的表达，增加 NO、 T NF2 α的产生，增强抗肿瘤活性。

　　7　 抗肿瘤的其他机制

　　Lee 等的动物实验表明，经熊果酸处理后， FSaⅡ 肿瘤生长明显受到抑制，并检测到肿瘤间质流体压力 ( TIFP) 显著降低，约为对照组的 40%;用 Clark型电极盒检测表明细胞的O2耗量显著降低。

　　8　 肝损伤保护作用近年来，关于三萜类天然产物熊果酸等具有抗肝损伤、 抗肝纤维化作用的报道较多， Martin2 Aragon等研究发现，熊果酸对于 CCl 4诱导的抗氧化酶改变有保护作用。熊果酸能明显减低 CCl 4诱导的小鼠血清丙氨酸 (ALT)和天冬氨酸(AST)的升高，同时也能逆转过氧化物歧化酶、 过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性，以及保持谷胱甘肽体内水平。体外实验中，对于 CCL4中毒的肝细胞，熊果酸 ( P < 0 . 01， 500 mmol·L - 1) 能显著降低谷草转氨酶及乳酸脱氢酶活性，并且发现熊果酸在羟基化后具有很强的自由基清除活性。熊果酸对乙醇诱导的离体肝细胞毒性具有保护作用。乙醇导致肝细胞生存力下降 48%～54%， 同时生化指标如 AST、 ALT和活化因子蛋白 (AP)下降 42%～54%。因此，熊果酸通过作用于这些指标而呈现出剂量依赖性的保护作用。目前大多数抗肿瘤药物都具有不同程度的肝损伤作用;肝癌的化疗尚缺少一种既抗肿瘤、 又保护正常肝细胞的药物，而熊果酸恰恰有望弥补这一缺陷。因此，能否将熊果酸开发成一种独特的抗肝癌药物值得进一步研究。

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