乳腺癌组织中VEGF和C-erbB-2的表达及意义

　　作者：粟连秀，张兆明，陈红秋，杨达平，李雄 作者单位：广西贵港市人民医院病理科，广西贵港537100

　　【摘要】 目的 探讨乳腺癌组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)及原癌基因C-erbB-2的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法，对80例乳腺癌组织和20例乳腺良性病变组织中VEGF及C-erbB-2的表达进行检测。结果 VEGF与C-erbB-2在乳腺癌的阳性表达率分别为62.50%和35.00%，高于在乳腺良性病变组织中的零表达(P均<0.01)。VEGF和C-erbB-2的阳性表达与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小和组织学分型无关(P>均0.05)，而与腋窝淋巴结转移有关(P<0.05或0.01)，VEGF还与临床分期有关(P<0.05)。乳腺癌中VEGF表达与C-erbB-2表达密切有关(χ2=12.97，P<0.01)。结论 VEGF和C-erbB-2参与了乳腺癌的发生和发展过程，VEGF和C-erbB-2可作为临床上判定乳腺癌预后的指标。

　　【关键词】 乳腺肿瘤;VEGF;C-erbB-2;免疫组织化学

　　The expressions and clinical significances of VEGF and C-erbB-2 in breast cancer tissues

　　SU Lian-xiu, ZHANG Zhao-ming, CHEN Hong-qiu, YANG Da-ping, LI Xiong

　　(Department of Pathology, Guigang People’s Hospital, Guigang, Guangxi 537100, China)

　　Abstract: Objective To outline the expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF) in breast cancer tissues and initial cancer gene C-erbB-2 as well as their relationship with clinical pathological characteristics. Methods A MaxVisionTM method was used to detect the expression of VEGF and C-erbB-2 in 80 patients with breast cancer and 20 specimen of breast benign lesion tissues. Results 62.50% patients were found with positive expression of VEGF and 35.00% patients with positive expression of C-erbB-2 in breast cancer tissues, in comparison to the benign lesion tissues (no positive expression was found), there were statistically significant differences (P<0.01). The expression of VEGF and C-erbB-2 had no correlation with the breast cancer patients’ age, tumor size and histological classification (P>0.05), and correlated positively with the lymph node metastasis (P<0.05 or 0.01), VEGF correlated positively with clinical stage (P<0.05). The expression of VEGF in breast cancer correlated positively with the expression of C-erbB-2 (χ2=12.97,P<0.01). Conclusion VEGF and C-erbB-2 play an important role in the oncogenesis and development of breast cancer, VEGF and C-erbB-2 may be markers for clinically predicting the prognosis of breast cancer.

　　Key words: breast neoplasm; VEGF; C-erbB-2; immunohistochemistry

　　乳腺癌是危害妇女健康的常见恶性肿瘤之一，其发病率和病死率均呈较快的增长趋势。乳腺癌与其它肿瘤一样，肿瘤的发生、发展及预后与多种因素有关。本组研究应用免疫组化方法检测80例乳腺癌中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、原癌基因(C-erbB-2)的表达，探讨乳腺癌组织中VEGF和C-erbB-2的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 收集贵港市人民医院病理科2003年1月～2005年9月乳腺癌手术根治标本80例。全部患者术前均无放疗、化疗及激素治疗史。患者均为女性，年龄26～75岁，平均51.3岁;肿瘤直径1～10cm;腋窝淋巴结转移阳性40例，阴性40例。根据WHO乳腺癌分类标准进行组织学分型，其中浸润性导管癌63例，浸润性小叶癌11例，粘液癌3例，腺样囊性癌1例，分泌型乳腺癌1例，大汗腺癌1例。按照国际抗癌联盟(UICC)1997年TNM分期标准：Ⅰ期17例，Ⅱ期40例，Ⅲ期23例。另取20例乳腺良性病变组织标本作为对照组(其中乳腺腺病10例，乳腺纤维腺瘤10例)。所有标本均经10%甲醛固定，做4μm连续切片，进行HE及免疫组化染色。

　　1.2 试剂 即用型VEGF、C-erbB-2单克隆抗体，即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒及DAB显色剂均为福州迈新生物技术公司产品。

　　1.3 方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法。严格按照产品的操作说明。具体染色步骤：①石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS(pH7.4)冲洗3次，每次3min;②微波抗原修复;③3%H2O2室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗3次，每次3min，除去PBS液;④分别滴加VEGF、C-erbB-2一抗工作液，室温下孵育60min;⑤PBS冲洗3次，每次5min，除去PBS液，每张切片加1滴即用型MaxVisionTM试剂，室温下孵育15min。PBS冲洗3次，每次3min;⑥除去PBS液，每张切片加2滴新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察5min;⑦自来水冲洗，苏木素复染，自来水冲洗返蓝，梯度酒精脱水干燥，中性树胶封固。用试剂公司提供的VEGF和C-erbB-2阳性的组织切片做阳性对照，以PBS代替一抗做阴性对照。

　　1.4 结果判断 VEGF以细胞浆或细胞胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性判定标准，C-erbB-2以细胞胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性判定标准，无阳性细胞或阳性细胞<10%为(-)，阳性细胞≥10%为(+)。

　　1.5 统计学分析 应用SPSS10.0统计软件分析，计数资料采用χ2检验。

　　2 结果

　　2.1 VEGF、C-erbB-2在乳腺癌组织和乳腺良性病变组织中的表达 在80例乳腺癌组织中，有50例VEGF染色呈阳性，阳性表达率为62.50%;有28例C-erbB-2染色呈阳性，阳性表达率为35.00%。VEGF和C-erbB-2在乳腺腺病及乳腺纤维腺瘤中均为阴性表达，表达率为零。两者在乳腺癌组织的阳性表达率高于乳腺良性病变组织(χ2分别等于25.00和9.72，P均<0.01)。

　　2.2 VEGF和C-erbB-2阳性表达与乳腺癌临床病理特征的关系 VEGF的表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小及组织学分型无关，而与乳腺癌临床分期及腋窝淋巴结转移有关(P均<0.05);C-erbB-2的表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、组织学分型及临床分期无关，而与乳腺癌的腋窝淋巴结转移有关(P<0.01)，见表1。

　　表1 VEGF和C-erbB-2表达与乳腺癌临床病理特征的关系(略)

　　2.3 乳腺癌中VEGF与C-erbB-2表达之间的关系 C-erbB-2在VEGF阳性组中的阳性表达率为44.00%，在VEGF阴性组中的阳性表达率为20.00%，两者在乳腺癌中的表达密切有关(P<0.01)，见表2。

　　3 讨论

　　VEGF是作用于血管内皮细胞、上调血管生成的重要特异因子，能刺激血管内皮细胞增殖、迁移和诱导血管形成，是肿瘤血管生成过程中的重要调节因子，在实体肿瘤的生长、转移中起着重要的作用[1,2]。曾谷清等[3]采用SABC免疫和双技术检测53例乳腺癌标本，其VEGF阳性表达与患者的年龄、肿瘤大小、绝经状况、ER和PR的表达、TNM分期及5年生存率无关(P>0.05)，而与组织学分级及淋巴结转移密切有关(P<0.05)。本组研究结果显示VEGF在乳腺腺病及乳腺纤维腺瘤组织中不表达，在乳腺癌组织中高表达，差异有高度显著性(P<0.01)，且VEGF的表达与乳腺癌的临床分期及腋窝淋巴结转移有关(P均<0.05)。这些结果表明VEGF在乳腺癌的发生发展过程中起重要的作用，与乳腺癌的浸润转移密切有关，VEGF可以作为乳腺癌生物学行为和预后判断的指标。

　　表2 乳腺癌中VEGF和C-erbB-2表达的关系(略)

　　C-erbB-2是具有酪氨酸激酶活性的原癌基因，与表皮生长因子受体具有高度同源性[4]。在正常情况下，处于非激活状态，参与细胞生长、增殖及分化的调控，如果其被激活，结构发生改变则具有肿瘤转化活性[5]。对乳腺癌C-erbB-2表达研究发现[6]，其与乳腺癌的发生发展密切相关，过度表达提示恶性程度高，预后差。本组研究结果显示：C-erbB-2在乳腺良性病变组织中不表达，在乳腺癌组织中阳性表达率为35.00%，差异有高度显著性(P<0.01)，并且C-erbB-2阳性表达与淋巴结转移有关(P<0.01)，这与文献报道一致。

　　本组研究还显示，乳腺癌中C-erbB-2表达与VEGF表达密切有关，提示C-erbB-2和VEGF对乳腺癌的生长浸润和转移可能具有一定的协同作用。同时检测VEGF及C-erbB-2，有利于评估乳腺癌的生物学行为及预后，对制定乳腺癌术后治疗方案有重要的指导意义。

　　【参考文献】

　　[1] 王禹，张颖超，杨威，等.乳腺癌和良性乳腺疾病患者血清中VEGF的变化[J].吉林大学学报：医学版，2005，31(1):133-135.

　　[2] Ferrara N. Vascular endothelial growth factor:molecular and biological aspects [J]. Curr Top Microbiol Immunol,1999,237:1-30.

　　[3] 曾谷清，王汉群，方松清，等.乳腺癌组织P16蛋白和VEGF的表达及其临床意义[J].中国医师杂志，2004，6(2):175-178.

　　[4] Michael PD . Clinical significance of HER-2/neu overexpression:Part I [J]. Principles & Practice of Oncology,1999,13:1-9.

　　[5] 陈健，王静，赵俊生.血管内皮生长因子、癌基因C-erbB-2与胃癌[J].甘肃科学学报，2001,13(2):65-69.

　　[6] 张遵红，刘辉.C-erbB-2在乳腺癌中的表达及意义[J].右江民族医学院学报，2004，26(4):474-475.