COX-2和Ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义
发表时间：2012-04-16 浏览次数：466次
作者：马俊兵1 居红格2 张文莲2 作者单位：(1.包头医学院第一附属医院病理科，内蒙古包头014010; 2.包头医学院病理教研室)
【摘要】 目的：探讨环氧化酶-2(COX - 2)和Ki-67在膀胱癌中的表达及其意义。方法：应用免疫组化S-P法检测52例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱组织中COX-2和Ki-67的表达。结果：COX-2和Ki-67在癌旁组织中均不表达,而在各级别的膀胱移行细胞癌中均有表达,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论：COX-2可以作为评估膀胱移行细胞癌细胞增殖的良好指标,COX-2和Ki-67的表达可以判断膀胱移行细胞癌的恶性程度。
【关键词】 膀胱癌;环氧化酶-2;Ki-67
Abstract Objective: To investigate the expression of COX-2 and Ki-67 in he bladder transitional cell carcinoma and the significance. Methods: The expression of COX-2 and Ki-67 was detected by S-P immunohistochemical technique in the bladder transitional cell carcinoma (n=52) and normal tissues (n=12). Results: The COX-2 and Ki-67 were not expressed in the all normal tissue, but the expression of COX-2 and Ki-67 could be detected in different grades of he bladder transitional cell carcinoma. The positive rate of COX-2 and Ki-67 expression in high grade group was significant higher than that in low grade group (P<0. 05). Conclusion: The expression level of COX-2 correlate significantly with proliferating activity ofhe bladder transitional cell carcinoma cell . The expression of COX - 2 and Ki - 67 Evaluate the malignancy degree of the bladder transitional cell carcinoma.
Key words Carcinoma of bladder; COX-2; Ki-67; Immunohistochemistry
膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其中移行细胞癌占90 %以上，临床特点主要是发病率高和复发率高，复发后预后差。近几年，通过肿瘤标记物来判断预后已成为热点。环氧化酶(cyclooxygenase,COX)是前列腺素合成过程中的限速酶，其异构体COX-2蛋白表达与肿瘤的发生发展密切相关[1]，主要作用可能是促进肿瘤细胞增殖和抑制凋亡。Ki-67是反映肿瘤细胞增殖活性的较好标记物，常用来判定该肿瘤的恶性程度。本研究利用免疫组化方法观察COX-2及Ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达情况，旨在为膀胱移行细胞癌的早期诊断、治疗以及更准确地判断患者预后提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
收集包头医学院第一附属医院2005-2010年的石蜡组织标本52例，经病理学证实为膀胱移行细胞癌。所有病例临床资料齐全，其中男32例，女20例;年龄37～78岁，平均年龄50.2岁;按WHO病理分级:Ⅰ级17例,Ⅱ级26例,Ⅲ级9例。把Ⅰ级归为低级别组，把Ⅱ、Ⅲ归为高级别组。以正常膀胱黏膜标本12例作对照，年龄30～70岁，平均年龄48.6岁。
1.2 试剂与方法
采用免疫组化S-P法。COX-2、Ki-67抗体和DAB显色试剂盒均购自福州迈新公司。肿瘤标本常规二甲苯脱蜡、梯度酒精脱水后将标本置于pH 6.0枸橼酸缓冲液中进行抗原修复,PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min;加过氧化酶阻断剂，室温孵育20 min，PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min;加血清室温孵育20 min，甩干血清,滴加一抗,4 ℃冰箱孵育过夜，PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min;滴加生物素标记二抗，孵育10 min，PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min;最后滴加链霉素抗生物素-过氧化物酶溶液,室温孵育10 min,PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min;DAB反应显色后自来水充分冲洗、苏木素复染。常规行脱水、透明、干燥封片后镜下观察。
1.3 结果判断
所有结果均经过病理科两位病理诊断医师采用盲法进行确认。随机选择10个高倍视野，分别计数200个细胞，阳性细胞百分比≤10 %为(-)，11 %～25 %为(+)，26 %～50 %为(++)，>50 %为(+++)。COX-2蛋白表达阳性为细胞胞膜、胞质内出现黄色颗粒，Ki-67蛋白表达阳性为细胞核出现黄色颗粒。
1.4 统计学处理
应用SPSS 13.0统计软件分析数据，组间比较采用χ2检验(校正)，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
COX-2蛋白阳性表达位于癌细胞胞膜、胞质内，间质细胞及血管内皮细胞亦可见COX-2散在表达。52例膀胱移行细胞癌组织中，31例COX-2阳性表达;而在12例正常组织中未见COX-2表达，两者差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。Ki-67染色主要位于细胞核，Ki-67在正常组织中散在阳性表达，根据评定标准视为(-)，在癌组织阳性表达率为77 %，随着肿瘤级别越高，其表达率和强度增加(见表2)。表1 COX-2、Ki-67在癌旁组织和膀胱移行细胞癌的表达
3 讨论
膀胱癌的发生与发展是多因素、多步骤的复杂病理过程，膀胱癌的发生与细胞增殖密切相关。COX是花生四烯酸转化为前列腺素过程中的重要限速酶，COX有COX-1和COX-2两种同工酶。COX-1为结构型酶，在许多组织中表达并在组织稳态中起作用。COX-2为诱导型酶，在大多数正常细胞中几乎不表达，只有当细胞受到细胞内外刺激因素刺激后才过度表达。COX-2有可能通过其合成的前列腺素，促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进肿瘤相关血管形成以及抑制免疫等机制参与肿瘤的生长、浸润、转移。近年研究发现COX-2在结肠癌、直肠癌、肺癌、前列腺癌、肝癌等肿瘤组织以及某些肿瘤转移灶中均有较高表达[2]。本研究结果与有关文献报道相一致[3-5]，COX-2在正常膀胱组织不表达，在胱移行细胞癌组织中的高表达，随着肿瘤的恶性程度升高，其表达水平和强度增加。
Ki-67是一种增殖期细胞特异性表达的核抗原，其基因定位于10号染色体长臂,是分子量为345 kD和395 kD的两条多肽链组成的核蛋白,与细胞增殖(细胞周期)密切相关。研究表明Ki67表达能可靠而迅速地反映恶性肿瘤增殖率,与多种恶性肿瘤的发展、转移、预后有关[6]。本研究结果显示Ki67表达水平与膀胱癌的恶性程度明显相关,随膀胱癌的恶性程度的增高而增高，可以作为反映膀胱癌恶性程度的指标。
【参考文献】
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