趋化因子受体CCR7与喉癌的淋巴转移
发表时间：2012-02-09 浏览次数：468次
作者：李天明,刘玉蓉,肖燕 作者单位：四川 绵阳，三台县人民医院
【摘要】目的通过检测喉鳞状细胞癌(LSCC，简称喉鳞癌)中趋化因子受体7(CCR7)的表达，并探讨其与喉癌淋巴结转移的关系。方法选取40例喉鳞状细胞癌的存档蜡块为实验组，40例癌旁正常喉黏膜组织(距癌组织5mm以上经病理证实为正常喉黏膜)及20例经病理检查证实为喉良性病变组织声带息肉为对照组。应用免疫组织化学方法检测以上组织中CCR7的表达，并结合临床病历资料进行统计学分析，分析CCR7与喉癌临床病理特征的关系。结果CCR7蛋白在喉癌组织中呈强阳性表达，CCR7的表达水平显著高于对照组(P<0.05)，而且在淋巴结转移组阳性率及表达强度均高于无淋巴结转移组，差异显著(P<0.05)。结论CCR7与喉癌的淋巴结转移密切相关，而与喉癌患者的性别、年龄、是否吸烟、病理分级及临床分型无关。
【关键词】 趋化因子受体CCR7;喉癌;淋巴结转移
Chemokine Receptor 7 and Larygocarcinomatous Lymphatic Metastasis
Li Tianming,Liu Yurong,Xiao Yan,Santai County People’s Hospital, Santai,Sichuan Province 621100,P.R.China
AbstractObjectiveTo detect the expression of chemokine receptor 7 (CR7) in laryngeal squamous carcinoma (LSC) and inquire into the relationship between it and laryngocarcinomatous lymphatic metastasis.MethodsForty cases of LSC tissue were used as an experimental group.Forty cases of adjacent normal laryngeal mucosa tissue (more than 5mm away from the cancer confirmed pathologically as normal laryngeal mucosas) and 20 cases of benign lesion tissue of laryngeal polyp of the vocal cord were used as a control group.The expression of CR7 and VEGF-C in all the obove tissues were detected by immunohistochemistry and analyzed statistically in combination with the pathological data,inquiring into the relationship between CR7 and VEGF-C and the clinical and pathological features of laryngocarcinoma.ResultsCR7 and VEGF-C
protein showed strong positive expression in laryngocarcinoma,and the expression of them was significantly higher than in the control group(P<0.05).Also the positive rate and staining intensity were higher in the lymphatic metastasis group than in the non-lymphatic metastasis group,which showed a significant difference(P<0.05).ConclusionsThe expression of CR7 and VEGF-C are closely related to laryngocarcinomatous lymphatic metastasis but has no relationship to the sex,age and smoking of a patient with laryngocarcinoma,cell differentiation and clinical classification.
KEYWORDSchemokine receptor 7laryngocarcinoma lymphatic metastasis
CCR7是CCR类趋化因子受体的成员之一，趋化因子与其受体的相互作用在人体细胞的生长、发育、分化和凋亡以及肿瘤细胞的生长和转移，淋巴细胞向炎症部位的聚集，HIV感染等许多生理和病理过程中发挥重要作用[1]，同时也在淋巴细胞发挥免疫功能的过程中发挥重要作用。最近研究显示[2-3],CCR7高度表达于某些肿瘤细胞，并且在肿瘤的生长浸润转移中起重要作用。本实验通过检测喉癌组织中CCR7的表达，并结合临床病理资料进行统计学分析，探讨其与喉癌淋巴结转移的关系。
1资料与方法
1.1研究对象选取经病理检查诊断的40例喉部鳞状细胞癌的存档蜡块为实验组。将喉癌患者按年龄、细胞分化程度、TNM分期及有无颈淋巴结转移进行分组。全部病例术前均行喉部高分辨率CT检查，且未行化疗或放疗。40例癌旁正常喉黏膜组织(距癌组织5mm以上经病理证实为正常喉黏膜)及20例经病理证实为喉良性病变组织声带息肉为对照组。
1.2主要实验试剂和方法兔抗人CCR7多克隆抗体(购于Bioword公司)及SP免疫组化试剂盒和即用型DAB显色盒(均购自北京中杉金桥生物技术有限公司)。严格按照试剂盒操作程序进行,作CCR7蛋白免疫组化染色，每批切片染色均以PBS液代替一抗作为阴性对照。
1.3观察方法与结果判断CCR7蛋白阳性表达判断：采用双盲法，免疫组化染色阳性为细胞胞浆不同程度黄色着色。根据染色程度和染色细胞百分率进行综合评分：不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，褐色为3分;着色细胞占计数细胞百分率≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，≥76%为4分。将每张切片平均着色程度得分与平均着色细胞百分率得分相乘，为其最后得分：0为阴性(-);1～4分为弱阳性(+);5～8分为中度阳性(++);9～12分为强阳性(+++)。同时，忽略较弱或可疑的染色。
1.4统计方法采用软件SPSS13.0 for Windows进行统计学分析，统计方法采用χ2检验，检验水准α=0.05，P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
喉癌组织中CCR7的表达明显高于癌旁正常黏膜组织及声带息肉组织，差异显著(P<0.05)。CCR7表达在喉癌患者中淋巴结转移组阳性率及表达强度均高于非转移组，差异显著(P<0.05)。不同性质的喉组织中CCR7的阳性表达率CCR7的表达与喉癌临床病理因素的关系
3讨论
癌细胞如何浸润、粘附淋巴管并最终发生淋巴结转移，具体机制还不甚清楚。近年多项研究发现，趋化因子及其受体与肿瘤的生长、转移密切相关。CCR7是趋化因子受体(CCR类)的成员之一，最初是由Yashida等在EB病毒感染的B细胞中发现的，主要表达于幼稚T细胞、B细胞及树突状细胞表面。最近研究显示，CCR7高度表达于某些肿瘤细胞，并且在肿瘤的生长浸润转移中起重要作用。Shang等[4]通过免疫组化方法发现65.9%的口腔鳞癌组织中有CCR7阳性表达，而且与淋巴结转移、肿瘤大小和临床分期有关，并运用RT-PCR及Western blot方法进一步证实了CCR7阳性表达于口腔鳞癌和TCA8113细胞株，说明CCL21增强了CCR7表达阳性的晚期肿瘤细胞通过基底膜的能力，表明CCR7与其配体CCL21相互作用促进了口腔鳞癌的定向淋巴结转移。Tsuzuki等[5]运用免疫组化方法研究了90例口腔及口咽部鳞状细胞癌患者，60%的患者CCR7表达阳性，通过调查研究发现，与CCR7表达阴性相比较，阳性患者有五个临床特点即肿瘤较大、病程进展快、淋巴结转移率较高、局部复发率高和死亡率高，故认为研究CCR7的表达对判断口腔和口咽鳞癌的预后很有帮助。Ding等[6]采用RT-PCR的方法分析20例食管鳞癌细胞系的CCR7，并用免疫组化的方法分析96例食管鳞癌标本，结果表明CCR7mRNA在20例食管癌细胞系中检测到16例，高表达的CCR7说明食管癌的肿瘤生长、淋巴渗透及淋巴结转移都有密切的关联;体外的研究表明，它的配体CCL21能提高食管癌细胞系的能动性，刺激细胞伪足的形成，明显提高食管癌细胞的迁移能力。Ishida等[7]也研究了CCR7在食道癌及淋巴结转移灶中的临床意义，发现CCR7在食道癌细胞及浸润的淋巴细胞中均有较高表达，多变量回归分析揭示CCR7在癌细胞中的高表达是淋巴转移的独立危险因素。国内学者樊祥奎等[8]用免疫组化染色法对56例食管癌组织标本及40例转移淋巴结内癌组织的CCR7表达情况进行分析发现，CCR7主要表达于食管癌细胞的细胞膜或/和细胞质内，食管癌原发灶内CCR7表达的阳性率在伴有淋巴结转移的病例中为89.2%(33/40)，而在无淋巴结转移的病例中为6.3%(1/16)，二者相比差异具有显著统计学意义，提示食管癌组织CCR7表达与淋巴结转移密切相关。另外，功能性的趋化因子受体还表达于其他许多恶性肿瘤，如乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma，PTC)，这些受体促进肿瘤的生长和转移，Wagner等[9]研究检测两种趋化因子受体CXCR4与CCR7在一系列PTC中的表达，结果提示这两种受体在PTC中均有过度表达，并提示CXCR4和CCR7与肿瘤的侵袭性包括肿瘤的大小、侵犯的周围组织及淋巴结转移灶等有关。
喉癌是起源于上皮组织的恶性肿瘤，对于喉癌组织细胞是否有CCR7表达、其表达与喉癌细胞的恶性程度或转移有无相关性，目前报道较少。为了研究CCR7表达在喉癌淋巴结转移中的作用及其临床病理特征的相关性，本实验结果发现，喉鳞癌中有CCR7强阳性表达，其阳性表达率为60.0%，主要表达于癌细胞的细胞膜或/和细胞浆内，而值得注意的是癌旁组织中CCR7只呈现弱表达，且喉良性病变组织声带息肉中几乎无CCR7表达，提示CCR7可能通过促进正常组织细胞癌变而对喉癌的发生、发展起重要作用。至于在癌旁组织中弱表达的CCR7的作用机制是同癌组织中表现的分子机制相同，还是有其独特的表达机制，有待进一步研究。另外，在分析CCR7表达与临床病理的关系时发现，CCR7的表达与喉鳞癌的淋巴结转移密切相关，而与患者年龄、性别、组织细胞分化程度、病变部位及T分期等无关。本研究表明CCR7在喉鳞癌细胞的阳性表达与淋巴结转移有关，提示CCR7可能参与了喉鳞癌淋巴结转移过程。
【参考文献】
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