生存素在乳腺癌和宫颈癌中的表达及其临床意义

　　作者：赵荧,王发亮,薄爱华,侯金超,牛书雷　　作者单位：河北北方学院实验中心，河北 张家口 075029

　　【摘要】目的探讨生存素(Survivin)在乳腺癌和宫颈癌中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测66例乳腺癌、22例乳腺腺瘤、宫颈鳞状细胞癌46例和宫颈上皮不典型增生20例中Survivin的表达。结果 ①Survivin表达的阳性率在乳腺腺瘤组织中明显高于乳腺癌组织(P<0.05﹚,宫颈癌明显高于宫颈上皮不典型增生(P<0.05);②Survivin与患者的年龄和乳腺癌的位置无关(P>0.05),而与淋巴结是否转移有关(P<0.05)。结论 ①Survivin蛋白可以通过抑制细胞凋亡对乳腺癌和宫颈癌的发生、发展起重要作用;②检测乳腺癌和宫颈癌中Survivin的表达对制定化疗方案具有重要意义。

　　【关键词】 乳腺癌,腺腺瘤,颈癌,颈上皮不典型增生

　　生存素(Survivin) 是凋亡抑制蛋白家族的一个新成员，在正常成体组织中，除了胎盘和胸腺外，几乎检测不到〔1〕，但在大多数肿瘤组织中却发现Survivin的异常高表达现象，而且Survivin的高表达可能预示着对治疗的抵抗和预后不良〔2〕，尤其是Survivin与乳腺癌和宫颈癌生物学特性的关系研究甚少。鉴于此，本研究拟探讨Survivin在乳腺癌和宫颈癌发生和发展中的重要作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 收集女性乳腺腺瘤标本22例，年龄22～51(平均35.7)岁;乳腺癌66例,年龄27～72(平均47.8)岁。宫颈上皮不典型增生15例，年龄31～70(平均50.2)岁;宫颈癌46例，年龄36～73(平均54.3)岁。

　　1.2 试剂 兔抗人Survivin多克隆抗血清和SABC试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;DAB显色剂购自北京中衫金桥生物技术公司。SABC免疫组织化学染色程序按照试剂盒规程进行操作。

　　1.3 免疫组织化学染色 抗原修复采用微波法(95℃,10 min);Ⅰ抗室温过夜，PBS清洗后，Ⅱ抗37℃，30 min，Ⅲ抗时间和温度同Ⅱ抗;DAB显色10 min。阳性对照为已知胃癌阳性切片;阴性对照为PBS代替Ⅰ抗。

　　1.4 结果判定 以肿瘤细胞胞浆中出现黄色或棕黄色颗粒为阳性细胞，在×400倍光镜下至少观察10个视野，阳性细胞数≥10%，判定为阳性，阳性细胞数<10%，判定为阴性。

　　1.5 统计学处理 利用SPSS11.0统计软件进行χ2检验。

　　2 结果

　　2.1 各组织中Survivin阳性率比较 乳腺癌组织中Survivin阳性率为42.42%(28/66)，乳腺腺瘤组织中阳性率为72.73%(16/22)。Survivin蛋白在乳腺腺瘤中的阳性表达明显高于乳腺癌(χ2=6.06，P<0.05)。宫颈炎症伴不典型增生Survivin的阳性率〔35.00%(7/20)〕明显低于宫颈癌〔63.04%(29/46)〕(P<0.05)。

　　2.2 Survivin阳性率与乳腺癌和宫颈癌临床病理特征的关系 Survivin阳性率与乳腺癌和宫颈癌淋巴结转移、宫颈癌病理类型呈明显相关性(P<0.05)。见表1。

　　表1 Survivin蛋白的阳性表达与乳腺癌及宫颈癌临床病理特征的关系(略)

　　1)P<0.05

　　3 讨论

　　Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的新成员，在胚胎发育时期，它广泛分布于不同的胚胎组织，在成人分化成熟的组织中一般不表达或低表达(胸腺、生殖腺除外);而在大多数肿瘤组织中表达〔3～5〕。Survivin基因由于其独特的亚细胞分布，被认为是处于细胞增殖与细胞死亡界面的分子，其过表达有利于细胞逃离生长监控，从而促进细胞异常的增殖和恶性转化，因此 Survivin基因在乳腺和宫颈良恶性病变组织中表达上调，提示该基因可能参与乳腺癌和宫颈癌的发生和发展过程，是一个有价值的肿瘤标记物。

　　陆云飞等报道〔6〕，Survivin在乳腺癌组织中表达阳性率明显高于乳腺腺瘤，但本实验数据显示Survivin在腺瘤中的阳性率明显高于乳腺癌，这与金军等在大肠良恶性病变中所见的现象相同〔7〕。另外，有研究〔8〕发现Survivin蛋白表达与乳腺癌临床分期之间存在显著性差异，临床分期愈晚，Survivin蛋白的阳性表达率愈高。徐虹〔9〕报告了宫颈癌组织和宫颈瘤样病变中Survivin表达增生，我们的观察与之相符。综合上述实验结果不难推测出，Survivin基因在肿瘤发生早期被激活，一旦恶性肿瘤形成，Survivin基因又有部分处于半关闭状态，此时可能是由于其他抗凋亡基因取代了Survivin的主导地位而发挥了抗凋亡作用。随着肿瘤恶性程度的进一步加大，Survivin基因发挥的抗凋亡作用又会逐渐加强，从而抑制癌细胞的凋亡，并促进其不断增殖。

　　目前有关Survivin在肿瘤中的表达及其生物学意义的研究不多〔9，10〕，结果也有所不同。Tanaka〔11〕和Nasu〔12〕曾报道Survivin的表达与患者的年龄、病理类型、乳腺癌的发病位置及淋巴结转移无关，但本实验发现，Survivin在有淋巴结转移组的阳性率明显高于无淋巴结转移组，这与国内辛榕等〔13〕报道的结果一致。这说明Survivin是乳腺癌预后差的参考指标。

　　Survivin在功能上作为线粒体依赖凋亡途径一个新的上游调节剂和治疗肿瘤的分子靶目标，该途径的抗癌活性是通过诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管形成的双重机制而实现的。刘铭球等研究报道，在肿瘤化疗药物阿霉素(adriamycin)处理MCF7肿瘤细胞18 h后，应用广谱CDKs的抑制剂flavopiridol 72 h后检测发现肿瘤细胞Survivin表达水平受到明显抑制，凋亡细胞大量生成，证明flavopiridol能够抑制Survivin Thr34的磷酸化反应〔14〕。可见，以Survivin为靶向的基因治疗具有潜在的应用价值，有望成为乳腺癌等肿瘤治疗的新靶点。

　　【参考文献】

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　　9 徐 虹，蒋东霞，胡杰英,等.宫颈癌组织中Survivin和Caspase3蛋白的表达〔J〕.郑州大学学报(医学版)，2007;42(2):2635.

　　10 郭敏敏，张小玲，盛修贵. Survivin基因在宫颈鳞癌和腺癌中的表达及其临床意义〔J〕.中华肿瘤防治杂志，2007;14(4):2946.

　　11 Tanaka K,Iwamoto S,Gon G,et al.Expression of survivin and relationship to loss of apoptosis in breast carcinomas〔J〕.Clin Cancer Res,2000;6(1):12734.

　　12 Nasu S,Yagihashi A,Izawa A, et al.Survivin mRNA expression in patients with breast cancer〔J〕.Anticancer Res,2002;22(3):183943.

　　13 辛 榕,郭德玉,于冬梅,等.乳腺癌中survivin蛋白的表达和PCNA及腋窝淋巴结转移的关系〔J〕.第三军医大学学报,2003;25(8):71820.

　　14 刘铭球,陈洪雷.Survivin基因在乳腺癌中的研究进展〔J〕.实用医学进修杂志,2005;33(4):1938.