巨噬细胞移动抑制因子在原发性肝癌中的临床意义

　　作者：林曲， 黄明声， 温景芸， 董 敏， 汪清铭， 吴祥元 作者单位：中山大学附属第三医院 1. 肿瘤科， 2. 放射科， 广东 广州 510630

　　【摘要】 【目的】 探讨肝癌患者血清巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)水平与其临床特征及预后的关系。【方法】 用酶联免疫吸附法检测2004年1月至2006年5月60例确诊初治的原发性肝癌患者的血清MIF水平，并与30例健康人相比较，分析其与临床特征及预后的关系。【结果】 原发性肝癌患者血清MIF水平较健康对照组显著升高(中位值，34.1 ng/mL 与15.9 ng/mL，P<0.001)。血清MIF水平与血管侵犯(P=0.014)、进展的临床TMN分期(P=0.037)及转移(P=0.026)密切相关。血清MIF高(>34.1 ng/mL)的患者2年生存率较血清MIF低的患者(≤34.1 ng/mL)明显降低(59%与28%，Log Rank为6.02, P=0.014)。多因素分析表明MIF水平是影响患者生存的独立预后因素。【结论】 MIF可能参与了原发性肝癌的疾病进展过程，提示MIF在原发性肝癌患者中可作为反应肿瘤侵袭及预后的一个有用的生物标记物。

　　【关键词】 肝细胞癌;侵袭;预后;巨噬细胞移动抑制因子

　　1 材料和方法

　　1.1 病 例

　　中山大学附属第三医院2004年1月至2006年5月确诊初治的原发性肝癌60例，男57例，女3例，中位年龄53岁(34~83岁)。诊断依据临床表现、实验室检查和计算机X线断层照像(computerized tomography, CT)、磁共振成像等影像学资料，诊断符合2001年9月第八届全国肝癌会议修订诊断标准[4]，15例经CT引导下肝穿刺取活组织作病理检查确诊，同时合并感染及风湿性疾病者除外。同时设正常对照组30名，男25名，女5名，为正常体检者，中位年龄45岁(29～68岁)。

　　1.2 方 法

　　患者入院后留取外周静脉血4 mL，分离血清，-70 ℃冻存待检。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定患者及正常对照组血清MIF水平，试剂盒购自美国R&D Systems公司，其实验步骤按试剂盒说明书进行。

　　1.3 统计学分析

　　所有数据均采用SPSS10.0统计软件包进行统计学分析。连续性变量以中位数与最大值和最小值表达，变量间比较采用Mann-Whitney U检验。连续变量间的相关性应用Pearson相关系数判定。采用Kaplan-Meier法比较不同MIF水平肝癌患者之间生存率的差异，并应用Log-Rank检验进行统计学显著性分析。MIF水平及其它临床特征与患者生存的关系采用Cox回归模型分析。设定P<0.05时具有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 原发性肝癌患者血清MIF水平

　　60例原发性肝癌患者血清MIF水平中位值为34.1 ng/mL (12.3 ng/mL ~145.2 ng/mL)，30名正常对照组血清MIF水平中位值为15.9 ng/mL (5.6 ng/mL ~30.3 ng/mL)，2组比较差异有显著性(P<0.001)。

　　2.2 肝癌患者血清MIF水平与临床特征的关系

　　肝癌患者血清MIF水平与患者的性别(P = 0.107)、年龄(P = 0.135)、乙型肝炎表面抗原携带状态(P =0.528)、肝硬化基础(P =0.647) 肿瘤数目(P =0.439)及肿瘤体积大小(P =0.178)等无明显相关。但高MIF水平与静脉侵犯(P = 0.014)、进展性临床分期(P = 0.037)及转移(P =0.026)密切相关，详见表1。

　　2.3 MIF水平与肝癌患者的预后分析

　　2.3.1 选取60例肝癌患者中位血清MIF水平(34.1 ng/mL)为分界点，整组病例分为高MIF水平组(>34.1 ng/mL)及低MIF水平组(≤34.1 ng/mL)。低MIF水平组患者2年生存率(59%)明显高于高MIF水平组(28%)，差异有显著性(Log-Rank=6.02 , P =0.014;图1)。

　　2.3.2 多因素分析结果 选用MIF水平与患者年龄、乙型肝炎表面抗原携带状态、肝硬化基础、肿瘤数目、肿瘤体积大小、静脉侵犯、肿瘤转移及临床分期等有可能影响患者预后的变量进行Cox模型回归分析。多因素分析结果显示，患者生存的独立预后因素包括MIF血清水平、静脉侵犯、转移及临床分期，见表2。

　　3 讨 论

　　巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一种含有115个氨基酸的蛋白质,MIF是受下丘脑垂体控制的多功能性细胞因子，作用较为广泛。除了可以由激活的T淋巴细胞产生外，许多的组织细胞都可以产生MIF，可促进多种炎症性疾病的发生。有的学者认为，MIF是通过使P53失活，抑制自然杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，诱导新生血管发生而诱导肿瘤的形成，从而对肿瘤的发生和发展起着重要的作用[5-7]。研究表明，肺癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌等癌组织中MIF的表达增加[8,9]，且能提高鼻咽癌细胞体外侵袭能力[10]。本研究结果显示，肝癌患者血清MIF水平较正常人明显升高，可能与肿瘤细胞产生或由其引发炎性细胞后续反应有关。近期研究表明，MIF在肿瘤组织中的表达多与较高的肿瘤转移性密切相关[11]。本结果也显示较高水平的MIF与肝癌患者的肿瘤进展趋势密切相关。如临床分期为进展性者(Ⅲ、Ⅳ期)或出现转移者其血清MIF浓度较高。值得注意的是，血清MIF水平高的肝癌患者其较易出现静脉侵犯。这些结果进一步提示MIF可能参与了肿瘤血管生成反应，从而促进了肿瘤的生长和转移，血清MIF在临床预测肿瘤血管侵犯及疾病进展方面可能是一个有用的指标，而且由于不需外科手术切除病理组织，在初治病人进行病情评价及指导治疗方面更加方便易行。

　　临床病理等因素与肝癌患者预后之间的关系已被广为研究，但血清MIF水平与肝癌患者的预后之间关系如何，目前尚未见报道。研究表明，MIF在一些肿瘤组织的表达增多与肿瘤患者较差的预后有关[12,13]。本研究结果显示血清MIF水平高的肝癌患者其累积生存率较低，进一步的多因素分析结果显示，影响患者预后的因素主要包括MIF血清水平、静脉侵犯、转移及临床分期等指标，这提示MIF参与了肝癌的疾病演进过程，同时血清MIF水平在预测肝癌患者生存方面是一个有价值的影响因素，与其它预后指标(如临床分期、静脉侵犯及转移等)联合使用，可能更准确的预测肝癌患者的预后。

　　综上所述，细胞因子MIF与肝癌患者的血管侵袭、肿瘤转移等临床特征密切相关，其可能参与了肝癌疾病进展过程，因此，通过针对MIF的靶向治疗从而控制肿瘤微血管生成，减少转移风险，可能成为今后肝癌患者一种有潜在价值的治疗手段。

　　【参考文献】

　　LUE H , KLEEMANN R, CALANDRA T, et al. Macrophage migration inhibitory factor (MIF):mechanisms of action and role in disease[J]. Microbes Infect, 2002, 4(4): 449-460.

　　SUN B, NISHIHIRA J, YOSHIKI T, et al. Macrophage migration inhibitory factor promotes tumor invasion and metastasis via the Rho-dependent pathway[J]. Clin Cancer Res, 2005, 11(3): 1050-1058.

　　HAGEMANN T, WILSON J, KULBE H, et al. Macrophages induce invasiveness of epithelial cancer cells via NF-kappa B and JNK[J]. J Immunol, 2005, 175(2):1197-1205.

　　张天泽，余光炜. 肿瘤学[M]. 天津：天津科学技术出版社，2005：1588-1592.

　　HUDSON J D, SHOAIBI M A, MAESTRO R, et al. A proinflammatory cytokine inhibits p53 tumor suppressor activity[J]. J Exp Med, 1999, 190(10): 1375-1382.

　　REN Y, TSUI H T, POON R T, et al. Macrophage migration inhibitory factor: roles in regulating tumor cell migration and expression of angiogenic factors in hepatocellular carcinoma [J]. Int J Cancer, 2003, 107(1): 22-29.

　　REN Y, LAW S, HUANG X, et al. Macrophage migration inhibitory factor stimulates angiogenic factor expression and correlates with differentiation and lymph node status in patients with esophageal squamous cell carcinoma [J]. Ann Surg, 2005, 242(1): 55-63.

　　KAMIMURA A, KAMACHI M, NISHGIRA J, et al. Intracellular distribution of macrophage migration inhibitory factor predicts the prognosis of patients with adenocarcinoma of the lung [J]. Cancer, 2000, 89(2): 334-341.

　　MEYER-SIEGLER K L, ICZKOWSKI K A, VERA P L, et al. Further evidence for increased macrophage migration inhibitory factor expression in prostate cancer[J]. BMC Cancer, 2005, 5(1):73.

　　李 智，林素暇，梁惠珍，等. 巨噬细胞移动抑制因子与鼻咽癌微血管生成和淋巴结转移的关系[J]. 中山大学学报：医学科学版，2005，26(1)：24-28.

　　BANDO H, MATSUMOTO G, BANDO M, et al. Expression of macrophage migration inhibitory facto in human breast cancer: association with nodal spread [J]. Jpn J Cancer Res, 2002, 93(4): 389-396.

　　TOMIYASU M, YOSHINO I, SUEMISU R, et al. Quantification of macrophage migration inhibitory factor mRNA expression in no-small cell lung cancer tissues and its clinical significance [J]. Clin Cancer Res, 2002, 8(12): 3755-3760.

　　SUZUKI F, NAKAMARU Y, ORIDATE N, et al. Prognostic significance of cytoplasmic macrophage migration inhibitory factor expression in patients with squamous cells carcinoma of the head and neck treated with concurrent chemoradiotherapy [J]. Oncol Rep, 2005, 13(1): 59-64.