血管内皮生长因子在肺癌中的表达及临床应用价值
发表时间：2010-09-25 浏览次数：436次
作者：贾建桃 王秦秦 马丽菊
【摘要】 目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达与肺癌临床病理特征的关系，探讨VEGF潜在临床应用价值。方法:采用免疫组织化学法，检测手术切除的68例肺癌组织和50例对照组织标本中VEGF的表达。结果:VEGF在肺癌中的表达率高于对照组。VEGF主要表达于细胞质和细胞膜，与肺癌的TNM分期和淋巴结转移有关，与其它各项临床病理特征无明显统计学相关性。结论:VEGF与肺癌疾病进展、转移和患者的预后有关，可作为评估肺癌病程、转移力和判断预后的一个重要标志物。
【关键词】 肺癌;血管内皮生长因子;免疫组织化学
肺癌生长和转移是一个复杂的多步骤过程，受到多种因素的影响和组织中多种生长因子的调节，其中新生血管与肿瘤无限增殖密切相关。VEGF是迄今为止诱导肿瘤血管形成作用最强、特异性最高的血管生长因子 [1] ，它参与了肿瘤的增殖、转移和血管的再生。本研究主要应用免疫组化技术检测VEGF在肺癌组织和对照组中的表达，并探讨其在肺癌诊断治疗中的临床意义。
1 资料与方法
1.1 标本来源收集昆明医学院第一、第三附属医院病理科2003年～2006年手术切除的肺癌石蜡包埋标本68例，其中男性45例，女性23例，年龄30岁～82岁，中位年龄56岁。所有病例术前均未进行放、化疗。按照国际抗癌组织协会(UICC)所提出的TNM分期法，对全部资料进行统一分类:腺癌24例，鳞癌33例，小细胞癌6例，大细胞癌5例。高分化17例，中分化28例，低分化18例，未分化5例。有淋巴结转移的24例，无淋巴结转移的44例。Ⅰ期40例，Ⅱ期14例，Ⅲ期9例，Ⅳ期5例。对照组取远癌肺组织和同期肺良性疾病旁肺组织标本共50例。
1.2 方法石蜡标本切片成5μm厚，置55℃～60℃烤2h，常规脱蜡后采用辣根过氧化酶标记链霉卵白素(SP)免疫组织化学方法，DAB显色，苏木精复染，封片。鼠抗人VEGF单克隆抗体为北京中山生物技术公司产品，工作浓度1∶50;SP试剂盒为美国ZYMED公司产品，染色步骤按产品说明书进行。用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。
1.3 结果判定光学显微镜下观察，以胞质或胞膜呈棕黄色者为阳性细胞，参考Volm Metal的评判标准 [2] ，以随意5个400倍视野的癌巢区阳性细胞所占比例的平均数分，阳性细胞数<10%为阴性，阳性细胞数>10%为阳性。
1.4 统计学处理应用SPSS11.0统计分析软件，显著性用χ 2 检 验，P<0.05时有统计学意义。
2 结果
2.1 VEGF在肺癌及对照组中的表达VEGF蛋白主要表达于胞质和胞膜。VEGF的阳性表达率在肺癌组和对照组间有显著性差异(见表1)。
表1 VEGF在肺癌及对照组中的表达比较 (略)
2.2 VEGF表达与肺癌临床病理特征间的关系VEGF的阳性表达与患者性别、年龄、肺癌组织学分型和分化程度之间无显著性差异(P>0.05)，而与有无淋巴结转移和TNM分期有相关性(P<0.05)(见表2)。
表2 VEGF表达与肺癌临床病理特征间的关系 (略)
3 讨论
VEGF是目前所知道的最强的血管内皮细胞的生长因子，对肿瘤新生血管内皮细胞增殖、迁移和血管构建调控的作用强且特异性高，被认为在肿瘤的新生血管生成中起关键作用。1988年Srivas-tava [3] 等在对皮肤黑色素瘤的研究中首次发现了新的血管形成与肿瘤进展、转移的有关。此后大量研究表明肿瘤的生长和转移依赖于新的血管形成。因而VEGF对包括肺癌在内的肿瘤的生长、转移和复发起关键作用。
本研究中肺癌组VEGF的表达明显增高，与对照组比较有显著性差异，与患者的年龄、性别、肺癌的组织学分型和分化程度无明显相关性，这与李斌、吴萍等 [4，5] 的研究结果一致。
本研究结果同时表明VEGF的表达随肺癌TNM分期进展而增高，提示VEGF可作为评价肺癌患者病情进展的一个参考指标。Han等 [6] 的研究表显示:VEGF阳性表达与生存期呈显著负相关，表明VEGF的表达可作为判断预后的危险因素之一。
本实验研究结果还显示:有淋巴结转移的肺癌组VEGF阳性率明显高于无淋巴结转移组，这与车国卫等 [7] 的研究结果一致。Li等 [8] 应用反义VEGF基因阻断VEGF基因的表达，明显抑制肿瘤的生长、血管生成、肺转移和远处器官转移，从而证实了VEGF与肺癌生长和淋巴结的转移密切相关。可能的机制是VEGF促进肿瘤中微血管的形成，同时诱导血管通透性增加，导致肿瘤细胞的生物学行为进一步恶化并更容易侵入血管，进而进入淋巴管。因此，VEGF促进肿瘤血管生成的同时也增加了肿瘤细胞淋巴结转移的几率。 虽然VEGF能特异性地促进肿瘤血管的生成，但肿瘤血管生成是一复杂的被动过程，受肿瘤细胞和宿主细胞产生和释放的多种血管生成因子和血管生成抑制因子共同调控。因此，深入探讨影响肿瘤血管生成的因素，了解VEGF在肿瘤血管生成中的作用，及其导致肿瘤细胞增殖和转移的机理，不仅有助于判定肺癌病情进展和预后评价，而且为开发研制抗血管生成的药物治疗肺癌提供理论和方法学依据。
【参考文献】
[1] Nicosia RF.What is the role of vascular endothelial growth factor-related molecules in tumor angiogenesis.Am J Pathol[J]，1998，153(1):11～16.
[2] Toi M，Hoshina S，Takayanagi T，et al.Association of vascular endothelial growth factor expression with tumor angiogenesis and with early relapse in promary breast cancer[J].Jpn J Cancer Res，1994，85(10):1045～1049.
[3] Srivastava A，Laidler P，Davies，et al.Theprognostic significance of tumor vascularity in intermediate-thickness(0.76mm～4.0mm thick)skin melanoma.Aquantitative histologic study.Am J Pathol[J]，1988，133(2):419～423.
[4] 李 斌，曹学文，张建华，等.血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.中国肺癌杂志[J]，2004，7(2):142～145.
[5] 吴 萍，金晓菲，叶晓锋，等.血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及意义.中国肿瘤[J]，2005，14(11):754～756.
[6] Han H，Silverman JF，Santucci TS，et al.Vascular endothelial growth factor expression in stageⅠnon-small cell lung cancer corre-lates with neoangiogenesis and a poor prognosis.Ann Surg Oncol[J]，2001，8(1):72～79.
[7] 车国卫，周清华，唐梦琳，等.肺癌中的血管生成及其临床意义探讨.中国肿瘤临床[J]，2002，29(9):609～612.
