ER、CerbB2、Pgp在乳腺癌中的表达及相互关系

　　作者：吴迎爽1 薄爱华2 张晓丽2 邢立强2 周 宁3 赵 倩4 王发亮5 于天晓4 作者单位：1.河北北方学院中西医临床本科2004级2班,河北 张家口 075000;2.河北北方学院实验中心，河北 张家口 075000;3.河北北方学院中医系本科2004级2班,河北 张家口 075000;4.河北北方学院检验系本科2004级2班,河北 张家口 075000;5.河北北方学院临床医学本科2005级2班,河北 张家口 075000

　　【摘要】 目的：探讨雌激素受体(ER)、CerbB2、P糖蛋白(Pgp)在乳癌的表达与腋淋巴结转移之间的相互关系。方法：利用免疫组织化学方法，检测了107例乳腺癌根治标本中ER、CerbB2、Pgp的表达。结果：ER、CerbB2、Pgp阳性表达率分别为5514%(59/107)、8713%(87/107)、2056%(22/107);ER表达与淋巴结转移呈负相关，与CerbB2表达呈正相关，与Pgp表达无相关性;CerbB2与淋巴结转移呈正相关，与P gp表达无相关性;Pgp与淋巴结转移无明显相关性。结论：乳腺癌组织中ER、CerbB2与淋巴结转移有关，Pgp与耐药有关。

　　【关键词】 乳腺癌雌激素受体(ER);CerbB2;P糖蛋白(Pgp);免疫组织化学

　　乳腺癌是女性发病率很高的恶性肿瘤,其早期诊断和提示预后成为医学界倍受关注的问题,研究表明，其预后与淋巴结转移密切相关。本文通过检测107例乳腺癌患者中ER、CerbB2、Pgp的表达与淋巴结转移的关系，旨在为临床治疗及预后提供有效的指导及生物学指标。

　　1 资料和方法

　　1.1 一般资料 收集2003.4~2006.5月间我市第五医院、附属第一医院肿瘤科乳腺癌手术切除107例病例，年龄分布27～77岁，平均年龄4957岁，中位年龄49岁，术前均未进行化疗或放疗。

　　1.2 切片制备 将新鲜标本固定于10%中性福尔马林(24h)，常规梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续切片，厚度5um。其中部分切片用于HE染色和病理诊断，另一部分切片37℃储存，待进行免疫组织化学染色。

　　1.3 免疫组织化学染色 ER、CerbB2、Pgp单克隆抗体和DAB显色剂购自北京中杉金桥公司，SABC试剂盒购自武汉博士德生物技术公司。石蜡切片、脱蜡、水化，微波加热法修复抗原。染色步骤按常规SABC免疫组织化学方法进行，DAB显色，显微镜观察。阳性对照为已知阳性切片，阴性对照以PBS代替Ⅰ抗。

　　1.4 结果判定 以细胞着色棕黄色为阳性，ER胞核着色，CerbB2和Pgp胞浆胞膜着色。阳性病例判定标准：阳性细胞>10%为阳性病例，否则为阴性病例。

　　1.5 统计学处理 采用χ2检验，P<005为有显著性差异。

　　2 结果

　　2.1 107例乳腺癌中，ER阳性表达率为5514%(59/107)，其表达与CerbB2呈正相关(r=01942，P<005);与Pgp表达无相关性(r=00869，P>005);与淋巴结转移呈负相关(r=-01835，P<005)。ER表达与CerbB2、Pgp、淋巴结转移的关系见表1。

　　2.2 CerbB2阳性表达率为8731%(87/107)，其表达与Pgp无相关(r=-01253，P>005);与淋巴结转移呈正相关(r=02718，P<005)。CerbB2表达与Pgp、淋巴结转移的关系见表2。

　　表1 ER表达与CerbB2、Pgp、淋巴结转移的关系　略

　　表2 CerbB2表达与Pgp、淋巴结转移的关系　略

　　2.3 Pgp阳性表达率为2056%(22/107)，与淋巴结转移无明显相关性(r=-00035，P>005)。Pgp表达与淋巴结转移的关系见表3。

　　表3 Pgp表达与淋巴结转移的关系　略

　　3 讨论

　　3.1 乳腺癌的发病有激素依赖型，即其发病与性激素及其受体调节失控有关[1]。椐报告[2]在乳腺癌细胞ER与雌二醇(E2)等形成复合物,与DNA亲和力加强,从而增加DNA合成,促进有丝分裂,并对肿瘤细胞有一定营养作用。ER过表达时,将形成致癌变因素之一,且ER表达可影响病人对内分泌治疗的敏感性,其表达阳性对内分泌治疗反应好,反之,则对内分泌治疗效果差。ER表达与否与CerbB2表达水平有关，其相关报道不一，杨聪颖[3]研究表明ER与CerbB2间呈负相关。本实验表明二者之间呈正相关(r=01802，P<005)。ER表达与淋巴结转移呈负相关(r=-01835，P<005)，故ER表达可作为淋巴结转移指标判断预后的重要因素。

　　3.2 CerbB2癌基因是乳腺癌中常用的基因标志之一，定位于17q21，是一种编码185KD跨膜糖蛋白(P185)的原癌基因，P185具有受体酪氨酸激酶活性，在结构上与表皮生长因子受体(EGFR)高度相似。P185在体内承担着重要的生理功能，它通过多种途径参与跨膜信号的转导，从而对细胞的分化、增殖发挥重要的调节作用[4]。CerbB2过表达说明癌基因激活，使癌变细胞内癌基因数量性质发生改变。本组实验表明CerbB2与ER间呈正相关，CerbB2过表达可增强ER的表达，对内分泌治疗的效果较佳。有研究表明[5，6]，CerbB2表达与淋巴结转移呈正相关，其在乳腺癌中的扩增与过表达与病人预后不佳有相关性。驺义[7]等人报道CerbB2高表达病人10年生存率明显低于低表达组病人。本实验表明：CerbB2与淋巴结转移呈正相关(r=02718，P<005)，与相关文献报道一致[8]，故CerbB2可作为判断预后的一个独立性指标。

　　3.3 肿瘤的多药耐药性(MDR)是导致化疗失败的主要原因之一。多药耐药基因表达产物P糖蛋白(Pgp)增高介导的多药耐药性成为目前肿瘤耐药机理之一。Pgp含有1280个氨基酸，为膜转运蛋白，具有通道蛋白质的性质。Pgp有ATP和多个药物结合位点，可与多种药物结合，并以主动耗能的方式将扩散进入细胞的亲脂类药物泵出细胞外[9]，从而使细胞内药物浓度降低，出现抗药现象，导致细胞耐药，其所介导的MDR化疗药物主要为长春新碱、长春花碱和阿霉素，尤其对长春花碱的耐药起决定作用[10]。因此，检测Pgp含量,可用来指导临床化疗药物的选择，使化疗取得更好的效果。故Pgp阳性的乳腺癌患者在选择化疗药物时应尽量避免使用这三种抗癌药物，而选择与Pgp关系不大的抗癌药物如顺铂等。本组实验表明：Pgp与ER、淋巴结转移无明显相关性(P>005)，与CerbB2表达呈正相关，故CerbB2过表达者，高表达则对长春碱类抗癌药物耐药强。

　　【参考文献】

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　　3 杨聪颖,陈昊,张昶,等.乳腺癌中TopⅡ、GSTπ、雌激素受体、CerbB2癌基因的表达及相互关系[J].宁夏医学院学报,2004,26(5):317319

　　4 薄爱华，戴洁，张林西,等.ER、PR、P53和CerbB2在乳腺癌表达的研究[A].中国现代医学理论与实践[M].北京：北京科技出版社,1997.810

　　5 成军.肿瘤相关基因[M].北京:北京医科大学出版社,2000.33

　　6 蔡丽生.乳腺癌中ER、PR及CerbB2癌基因蛋白表达与腋淋巴转移的相关性研究[J],福建医学杂志,2002,24(6):128130

　　7 驺义.多个癌基因的蛋白表达对乳腺癌的预后意义评价[J].中国现代医学杂志,2003,13(15):6668

　　8 陈艺华.人乳腺癌基因扩增及过表达的研究[J].中华肿瘤杂志,1995,17(1):1618

　　9 Ling V.Pglycoprotein resistance to anticancer drugs[J].Cancer，1996,60:20622066

　　10施启丰,薛善生,周喜风,等.胃癌糖蛋白表达与生物行为的关系[J],齐齐哈尔医学院学报,2003,24(10):10851087