新疆哈萨克族、汉族食管癌组织中cerbB2、p53蛋白的表达及其临床病理学意义

　　作者：张烁，卞文安，丁锦辉 作者单位：新疆医科大学第二附属医院病理科, 新疆乌鲁木齐830028, 附属肿瘤医院检验科, 新疆乌鲁木齐830011

　　【摘要】目的：探讨cerbB2、p53蛋白在新疆哈萨克族、汉族食管癌组织中的表达与食管癌临床病理指标的关系以及cerbB2与p53表达的相关性。方法: 应用免疫组化SP法测定8l例哈萨克族、汉族食管鳞状细胞癌石蜡包埋组织和30例癌旁正常食管组织中cerbB2、p53的蛋白表达。结果:在81例食管癌中，cerbB2和p53阳性表达率分别为87.65%、68.14%,二者在民族间的阳性表达率无统计学差异(P>0.05)，但cerbB2、p53在癌旁正常食管组织中的阳性表达率分别为23.33%、36.67%，与癌组织间存在统计学差异(P<0.05)。随着浸润深度增加及病程进展，cerbB2、p53的阳性表达率明显上升。cerbB2表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、临床分期及年龄有关(P<0.05)，p53表达与肿瘤浸润深度及临床分期有关(P<0.05)。结论： cerbB2、p53在食管癌的发生、发展中呈高表达，且与恶性肿瘤的侵袭及临床分期有关，可作为预测食管癌临床预后的分子指标。

　　【关键词】 食管癌; 哈萨克族;　汉族; cerbB2; p53; 免疫组织化学

　　Expression of cerbB2 and p53 protein in tumor tissues of Kazak and Han patients with esophageal carcinoma in Xinjiang and its clinicopathological significance

　　ZHANG Shuo, BIAN Wenan, DING Jinhui

　　(Department of Pathology, Second Affiliated Hospitals, Xinjiang Medical University,Urumqi，830028, China)

　　Abstract：Objective： In order to understand the clinicopathological significance of multiple genes alteration in esophageal carcinoma tissues of Kazak and Han patients in Xinjiang. Methods： The cerbB2 and p53 protein expression in 81 specimens of esophageal carcinoma tissues and nontumor 30 specimens were examined by immunohistochemical SP technique. Results： The positive frequency of cerbB2 and p53 protein were 87.56% and 68.14% in tumor tissues respectively.There was no statistic significance of cerbB2 and p53 immunocreacitivity in tumor tissues between Kazak and Han patients was found (P>0.05)，but cerbB2 and p53 were significant high thannontumor tissues (P<0.05).Expression of cerbB2 and p53 protein were increasing in the process of the development of these lesions. There were close relations both cerbB2 and p53 protein expression in the depth of tumor invasion and clinical course was found (P<0.05).Also，Expression of cerbB2 protein was related with histologic grade 0f tumor (P<0.05). Conclusion： cerbB2 and p53 protein have higher expression in the occur and development of esophageal carcinoma tissues.and they have related to tumor invasion and clinical course，and they could be identified as molecular markers for clinical prognosis of the esophageal carcinoma.

　　Key words： esophageal carcinoma; Kazak; Han; cerbB2; p53; immunohistochemistry

　　食管癌是消化道常见恶性肿瘤之一，其发生、发展与多个基因的异常表达相关，是一个多因素作用、多基因参与和多阶段发展的病理过程。新疆是我国食管癌高发区，尤以北疆哈萨克族(哈族)为高，我们应用免疫组化法检测81例食管癌在哈萨克族、汉族中cerbB2和p53蛋白的表达，以探讨两者的阳性表达与食管癌的临床病理关系以及是否存在民族差异。

　　1资料和方法

　　1.1一般资料81例食管癌患者(食管癌组)均为我院2001年1月～2005年12月经手术切除、病理检查诊断为鳞状细胞癌者，其中男性59例，女性22例;年龄36～75岁，中位年龄56岁;哈萨克族59例，汉族22例。但术前均未经放、化疗以及其他治疗。另取30例癌旁形态学正常的食管组织做对照，所有病例均经病理医师常规检查，病理诊断明确，临床资料完整无误。

　　1.2试剂和实验方法cerbB2及p53单抗为DAKO公司产品，SP试剂盒由迈新公司提供。采用SP法进行免疫组织化学染色。所有食管癌标本均经10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，连续4 μm厚度切片。用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。

　　1.3结果判定cerbB2蛋白染色阳性表现为细胞膜或细胞质有棕黄色颗粒，p53蛋白染色阳性表现为细胞核有棕黄色颗粒。光镜下观察免疫组化染色切片5个具有代表性的高倍视野的平均值，分别计数200个细胞，阳性细胞比率≥25%定为阳性，<25%定为阴性。

　　1.4统计学处理实验数据使用SPSS 13.0统计软件包进行统计学处理,采用χ2检验，检验水准α=0.05。

　　2结果

　　2.1食管癌组织和癌旁正常的食管组织中cerbB2、p53蛋白表达阳性率比较结果见表1。

　　2.2哈萨克与汉族食管癌组织中cerbB2、p53蛋白表达比较结果见表2。

　　2.3cerbB2、p53蛋白表达与食管癌临床病理指标的关系见表3。

　　表1食管癌组织和癌旁正常的食管组织中cerbB2、p53蛋白表达比较(略)

　　表2哈萨克与汉族食管癌组织中cerbB2、p53蛋白表达比较(略)

　　表3cerbB2、p53蛋白表达与食管癌临床病理指标的关系(略)

　　2.4用配对资料的检验，发现食管磷癌cerbB2与p53的蛋白表达阳性率有统计学差异(P<0.05)，同时对二者进行相关性分析，未发现两者存在相关性(P<0.05),见表4。

　　表4cerbB2与p53蛋白表达的相关性分析(略)

　　3讨论

　　3.1cerbB2蛋白表达与食管癌cerbB2又称为neu/Her2，定位于染色体17q21.3，具有内在酪氨酸激酶活性，可以促进细胞分裂和蛋白水解酶的分泌，使D N A合成增加，癌细胞生长加快，是公认的重要肿瘤表达标志物之一。各种文献对cerbB2基因在乳腺癌中过度表达的研究较多，目前cerbB2的研究已经扩大到其他肿瘤，但对食管癌的研究较少见[1]。我们应用免疫组化法检测81例食管癌，cerbB2表达阳性率为87.65%，cerbB2表达与肿瘤的分化程度、浸润深度及临床分期、年龄有关，分化程度差、浸润深度深、临床分期晚、年龄相对年轻者cerbB2表达阳性率高，与有无淋巴结转移、大体类型、性别、以及肿瘤原发部位无关，我们认为cerbB2可以作为判断食管癌恶性程度的辅助指标，并且可以作为判断预后的间接指标，其阳性表达者是肿瘤恶性度高，浸润深的重要标记之一。

　　3.2p53蛋白表达与食管癌p53基因突变在人类肿瘤中最为常见，是迄今为止人类肿瘤最常见的相关基因，与肿瘤的发生、细胞增殖分化、浸润、转移等均有一定的相关性。p53基因位于人类第17号染色体短臂上(17P13.1)，p53基因分为野生型和突变型两种，突变型p53抑制野生型p53活性，引起细胞转化，促进细胞癌变。突变型p53基因失去了野生型p53基因抑制细胞增殖的正常功能，并且具有了癌基因的特性[2]。本研究结果显示，在81例食管癌中，p53表达阳性率为69.14%，p53表达仅与肿瘤浸润深度及临床分期有关，肿瘤浸润深度深者及临床分期高者p53表达阳性率高，而与食管癌的肿瘤分化程度及其它临床病理指标无关，这与有的作者研究结果不一致[3]。我们认为，p53在预测肿瘤转移、评估预后方面可起一定作用。本研究结果显示p53蛋白表达与食管鳞癌的临床分期和肿瘤浸润深度相关，但与淋巴结转移无关，这与有关报道不一致[4]。提示p53蛋白在促进肿瘤发生、细胞增殖和恶性转化过程中起着重要作用，对判断肿瘤恶性程度和预后有一定价值。

　　3.3cerbB2与p53蛋白表达的民族差异性以及相互关系我们的研究结果发现：不同民族间cerbB2与p53表达无差别，这与有关研究相一致[5]，说明本地区食管癌的发病学是由共同的机制启动调控的。而新疆哈萨克族食管癌患病率与死亡率均明显高于其他民族，提示可能存在其它病因发病学因素，如饮食习惯及种族遗传特性等[6]。另外未发现cerbB2与p53表达呈相关。在食管癌的发生、发展中，cerbB2与p53均呈高表达，与肿瘤的转移、浸润及不良预后有关。可作为食管癌预后的分子生物学指标。 综上所述，cerbB2与p53在食管鳞癌中有均呈较高的表达，这意味着肿瘤在发生、发展中存在着多癌基因的表达，它的表达与食管鳞癌的浸润转移等相关因素有着密切关系，可作为用于评价其生物学行为及预后判定的参考指标。

　　【参考文献】

　　[1]Lam KY, Tin L, Ma L,et al. cerbB2 protein expression in oesophageal squamous epithelium from oesophageal squamous cell carcinomas with special reference to histological grade of carcinoma and preinvasive lesions [J].Eur J Surg Oncol,1998,24(5)：431435.

　　[2]Marchetti P, Cannita K, Ricevuto E, et al. Prognostic value of p53 molecular status in highrisk primary breast cancer[J].Ann Oncol,2003，14(5)：704708.

　　[3]牛永东，李恩民，吴贤英，等.食管鳞癌中HPV16/18感染与cerbB2、p53和 Rb表达及意义[J].肿瘤防治杂志，2002，9(2):138141.

　　[4]杨宣琴，王全红，焦士兰，等.食管鳞癌中p53和CD44V6的表达与淋巴结转移的关系[J].实用医技杂志，2004,ll(l2A):24962498.

　　[5]赵春芳，张巍，田卫华，等.新疆食管癌p53、PCNA表达及S 100+树状细胞浸润的免疫组化研究[J].临床与实验病理学杂志，1999，15(5):467.

　　[6]赵学信，王丽蓉，浓望珍，等.哈萨克族食管癌患者三号染色体短臂3p24等位基 因杂合缺失之研究[J].新疆医学院学报，1996，19(3):143145.