KAI1和E-钙黏蛋白在75例胃癌中的表达

KAI1和E-钙黏蛋白在75例胃癌中的表达作者：殷科，罗翠松，王铭河    作者单位：宁波市第一人民医院，浙江 宁波 315010    【摘要】  ［目的］ 探讨KAI1、E-钙黏蛋白在胃癌中的表达及意义。［方法］ 用免疫组织化学S-P法检测75例胃癌及癌旁组织中KAI1和E-钙黏蛋白的表达。［结果］ 胃癌组织中KAI1和E-钙黏蛋白的表达为52.00%和46.67％，癌旁组织为98.52％和92.43％，有显著性差异（P均<0.01）；胃癌组织中KAI1和E-钙黏蛋白的表达与胃癌的临床分期、浸润深度和有无淋巴结转移密切相关（P均<0.05），与肿瘤分化程度无关（P均>0.05）。KAI1与E-钙黏蛋白的表达呈正相关（r=0.417,P<0.05）。［结论］ KAI1和E-钙黏蛋白表达与胃癌的浸润转移有关，联合检测这两项指标有助于判断胃癌的生物学行为。    【关键词】  胃肿瘤；KAI1蛋白；E-钙黏蛋白    近年来的大量研究表明KAI1和E-钙黏蛋白的低表达与许多恶性肿瘤的发生、发展和侵袭转移有密切的关系[1]。我们采用免疫组织化学方法，检测75例胃癌组织中KAI1和E-钙黏蛋白的表达，以探讨它们在胃癌发生发展和侵袭转移过程中的意义。1   材料与方法    1.1   一般资料    收集复旦大学附属肿瘤医院2005年5月~2006年12月间资料完整，经病理证实的胃癌标本75例。所有胃癌患者术前未接受放、化疗，均行规范淋巴结清扫术。其中男性45例，女性30例，年龄37～72岁，中位年龄61岁。按国际抗癌联盟颁布的胃癌新TNM分期标准：Ⅰ期8例，Ⅱ期22例，Ⅲ期36例，Ⅳ期9例。肿瘤组织学按WHO分型：高分化腺癌13例，中分化腺癌34例，低分化腺癌21例，未分化癌 7例。肿瘤浸润深度：浸润达浆膜层者48例，浸润未达浆膜层者27例。胃周淋巴结转移情况：发生淋巴结转移者51例，未发生淋巴结转移者24例。    1.2   主要试剂    S-P免疫组化试剂盒和即用型鼠抗人E-钙黏蛋白（工作浓度1∶50）单克隆抗体购自福州迈新生物技术开发公司，浓缩型鼠抗人KAI1（工作浓度1∶100）单克隆抗体购自PharMingen公司，染色剂：二氨基联苯胺四盐酸盐（diamino benzidine，DAB）购自福州迈新生物技术开发公司。用已知阳性的胃癌切片作阳性对照，用PBS液代替一抗作为阴性对照。    1.3   结果判定    染色阳性物质呈棕色细颗粒状，每张切片选择5个视野，每个区域分别计数200个细胞，共计1 000个细胞的染色比例，<5％为阴性，5％～50％为弱阳性，>51％为阳性[2]。    1.4   统计学处理    所有数据均使用SPSS 13.0软件进行卡方检验和相关性分析。检验水准α=0.05。2   结   果    2.1   胃癌、癌旁正常组织中KAI1和E-钙黏蛋白的定位和表达    KAI1阳性表达主要在细胞膜，胞浆中也有少量表达，呈棕色颗粒状。E-钙黏蛋白主要表达在胞膜，呈连续性着色，部分肿瘤细胞的胞浆或胞核亦有表达。在75例胃癌组织中，KAI1和E-钙黏蛋白的表达率分别为52.00%、46.67%，明显低于正常癌旁胃黏膜组（98.52%、92.43％），两者比较有显著性差异（P<0.01）。    2.2   胃癌组织中KAI1和E-钙黏蛋白表达与临床病理特征的关系    由表1可知75例胃癌中KAI1和E-钙黏蛋白的阳性表达在不同组织学分型中无显著性差异（P>0.05），但在不同临床分期、浸润程度和有无淋巴结转移中有显著性差异（P<0.05）。    2.3   KAI1和E-钙黏蛋白表达之间的关系    由表2可知，75例胃癌中，KAI1和E-钙黏蛋白同为阳性者26例，同为阴性者27例，两者呈正相关（r=0.417，P<0.05）。3   讨   论    KAI1基因可以与整合素形成复合体，调节整合素的粘附功能，并影响整合素介导的细胞转移，KAI1对肿瘤转移的抑制作用可能源于对细胞运动、转移和增生的影响[3，4]。Uchida等[5]用免疫组化研究108例食管癌患者KAI1的表达，发现正常食管上皮细胞均表达KAI1，但癌细胞中KAI1表达呈弱阳性或阴性；在有淋巴结转移的患者中，KAI1表达显著降低（P=0.0129）。本研究结果显示，KAI1蛋白的表达率为52.00%，明显低于正常癌旁胃黏膜组（98.52%），两者比较有显著性差异（P<0.01），且在不同临床分期、浸润程度和有无淋巴结转移中的阳性表达亦有显著性差异(P<0.05)，但在不同组织类型中的阳性表达无统计学意义(P>0.05)。所以我们推测KAI1基因的低表达可以促进肿瘤细胞的转移。对75例胃癌及其癌旁组织中E-钙黏蛋白表达结果的测定显示：胃癌组织中E-钙黏蛋白的表达明显低于癌旁组织（P<0.05），且在不同临床分期、浸润程度和有无淋巴结转移中有显著性差异(P<0.05)，这提示E钙黏蛋白与胃癌的侵袭和转移有密切的关系。    国外学者在研究KAI1与膀胱癌的关系中，体外实验发现KAI1mRNA表达降低与钙依赖性及非依赖性的细胞黏附减弱、纤维结合素黏附性减弱及体外侵袭力的增加呈相关性[6]。Jawhari等[7]对胃癌细胞株检测时发现，E-钙黏蛋白在6种癌细胞株中丧失膜表达及钙依赖性的积聚作用。这表明KAI1和E-钙黏蛋白在抑制癌细胞的转移过程中存在着协同作用，本实验结果显示两者也呈正相关（r=0.417，P<0.05）。故我们推测：在胃癌发生发展过程中，KAI1和E-钙黏蛋白的低表达，直接影响了KAI1和E-钙黏蛋白的结合以及它们和钙离子结合力，从而促进了胃癌细胞的浸润和转移。【参考文献】[1] Hirohashi S. Inactivation of the E-cadherin herin-mediated cell a-dhesion system in human cancers[J]. Am J Pathol, 1998, 153(2):333-339.[2] Yang X, Wei L, Tang C, et al. KAI1 protein is down-regulted during the progression of human breast cancer[J]. Clin Cancer Res, 2000, 6(9):3424-3429.[3] Gao AC, Lou W, Dong JT, et al. Defining regulatory elements in the human KAI1(CD 82) metastasis suppressor gene[J]. Prostate, 2003, 57(4):256-260.[4] Liu FS, Dong JT, Hsieh YT, et al. KAI1 metastasis suppressor protein is down-regulated during the progression of human Endometrial cancer[J]. Clin Cancer Res, 2003, 9(4): 1393-1398.[5] Uchida S, Shimada Y, Watanabe G, et al. Motility-related protein-1(MRP-1/CD9)and KAI1/CD82 expression inversely correlate with lymph node metastasis in esophageal squamous cell carcinoma[J]. Br J Cancer, 1999, 79(7-8):1168-1173.[6] Jackson P,Kingsley EA,Russel PJ. Inverse correlation between KAI1 mRNA levels and invasive behaviour in bladder cancer cell lines[J].Cancer Lett,2000,156(1):9-17.[7] Jawhari AU, Noda M, Fathing MJ, et al. Abnormal expression and function of E-cadherin-catenin complex in gastric carcinoma cell lines[J]. Br J cancer,1999,80(3-4):322-330.