联合检测suPAR、SccAg在宫颈癌中的意义
发表时间：2009-09-29 浏览次数：502次
联合检测suPAR、SccAg在宫颈癌中的意义作者：田瑛 程建新 张军 作者单位：1050011 石家庄，河北医科大学附属四院妇产科 【摘要】 目的 探讨suPAR、SccAg在宫颈癌中的变化及监测意义。方法 采用ELISA方法测定57例宫颈鳞癌患者血清中suPAR、SccAg值，以30例子宫肌瘤的正常宫颈做对照。结果 宫颈癌患者治疗前血清中suPAR、SccAg测定值明显高于正常宫颈的血清测定值（P<0.01）,宫颈癌Ⅰ～Ⅱ期血清suPAR、SccAg测定值明显低于Ⅲ～Ⅳ期者，淋巴结无转移者明显低于有转移者（P<0.01），治疗后无复发者明显低于复发者（P<0.01），而治疗后复发、术中残留对其影响不显著（P>0.05）。在宫颈癌中，suPAR、SccAg表达的阳性率分别为75.64%、61.69%。结论 suPAR、SccAg在宫颈癌呈高表达，提示其可能是宫颈癌发生发展中的特征之一，有待成为术后监测、术后随访及是否追加放疗的参考指标，为判断预后、评估治疗提供帮助。 【关键词】 可溶性尿激酶 鳞状细胞抗原 宫颈癌 侵袭 转移0 引言 宫颈癌是女性生殖系统主要肿瘤之一，近年来随着生殖道病毒性感染的增加及性传播疾病的增加，发病年龄渐趋年轻化，为寻找更为敏感的肿瘤标记物以指导治疗和预后判断，我们进行了此研究。多项研究表明，uPA/uPAR系统在肿瘤的生长、侵袭和转移过程中起着重要作用。uPA在许多肿瘤如乳腺癌、结肠癌、肺癌、胃癌、前列腺癌等肿瘤中的表达较正常组织明显增高，并可以从肿瘤细胞表面脱落，以可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（Soluble Urokinase²type Plasminogen Activator Receptor,suPAR）形式存在于外周循环和其他体液中。国外报道，肿瘤患者的血循环suPAR较健康人高，其检测对肿瘤患者的病情、治疗及预后有重要意义。但国内外此方面对宫颈癌的研究甚少。SccAg做为鳞癌细胞产生的一种特异抗原，属肿瘤基因表型标记物，与宫颈鳞癌的发生、发展有一定关系。本研究采用ELISA方法，测定suPAR、SccAg在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌中的表达，探讨suPAR、SccAg在宫颈癌发生发展中的作用和意义。1 资料与方法 1.1 研究对象 2007年6 月～2008 年6月，收集在河北医科大学附属四院入院治疗的宫颈癌患者57 例, 宫颈上皮内瘤变患者18例。最小年龄29岁，最大63岁,中位年龄37岁。于治疗前抽血，检测血清suPAR、SccAg值，观察其在治疗前后的变化，以同期入院的子宫肌瘤30例患者的正常宫颈（TCT阴性、高危HPV阴性）为对照。 1.2 血清suPAR的测定 试剂盒购于美国ADL公司，应用ELISA方法双抗夹心法测定。 1.3 血清SccAg的测定 试剂盒购于美国ADL公司，ELISA法测定血清中SccAg,每批测定均用质控物做对照,按药盒规范步骤完成。 1.4 统计学方法 采用SPSS.10软件进行t检验、方差分析、多元线性回归检验分析，以P<0.01为差异有统计学意义。2 结果 2.1 宫颈病变程度与suPAR、SccAg表达的关系 血清suPAR、SccAg随着宫颈病变程度加重、肌层浸润深度、临床期别的增加而升高，深肌层浸润及晚期未术病例均高于浅肌层浸润（P<0.01），见表1。 表1 宫颈病变与suPAR、SccAg的关系（略） Tab 1 The relation of cervical diseases and SuPAR,SccAg 2.2 宫颈癌的不同期别suPAR、SccAg变化分析 宫颈癌Ⅰ～Ⅱ期血清suPAR显著低于Ⅲ～Ⅳ期（P<0.01），术中无残留者显著低于术中有残留者（P<0.01），治疗后无复发者（半年内）显著低于复发者（P<0.01）。经多元线性回归分析，临床分期、淋巴结转移、侵犯肌层深度为影响宫颈癌患者血清suPAR水平的重要因素。对于SccAg，临床分期、淋巴结转移对其影响显著，临床Ⅰ～Ⅱ期血清SccAg显著低于Ⅲ～Ⅳ期（P<0.01）,淋巴结无转移者低于有转移者,治疗后有无复发,术中有无残留对其影响不显著(P>0.05)。 表2 宫颈癌影响血清suPAR、SccAg变化的相关因素（略） Tab 2 Related factors of cervical carcinoma influence suPAR and SccAg in the serum3 讨论 肿瘤细胞无限增殖和侵袭转移到邻近组织及远处器官是一个多步骤的复杂过程，在此过程中肿瘤细胞首先必须具备降解细胞外基质及基底膜的功能，而这个降解功能主要由蛋白水解酶来完成。suPAR是尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type piasminogen activator,uPA)的特异性受体，广泛存在于体内多种血细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞及某些肿瘤细胞膜上，其水平为1～10ng/ml。新的观点认为肿瘤细胞的浸润、转移是一种不受调控的肿瘤组织取代正常组织的重建过程，在该过程中肿瘤细胞分泌或诱导分泌的蛋白水解酶对细胞基质的降解是肿瘤组织重建的先决条件［1］。suPAR是由肿瘤细胞释放并影响着uPA/uPAR系统的活动。在体外试验证明蛋白水解后的suPAR直接在细胞表面与uPAR衔接蛋白相互作用,其触发的反应与细胞表面锚定的uPA²uPAR复合体引起的反应是等效的［2］。由于磷脂酰肌醇磷脂酶C(PI²PLC)能够切断UPAR与细胞结合的GPI锚使得UPAR从细胞表面脱落。以suPAR形式存在于外周循环和其他体液中，同时uPAR蛋白水解活性能够在体内外裂解其自身受体,所以，血液中的suPAR可能是体内一个更方便、更可靠的反映uPA系统活性的指标[3]。多项研究表明，uPA/uPAR系统在肿瘤的生长、侵袭和转移过程中起着重要作用[4²5]。 SccAg由鳞癌细胞产生并分泌在体液中，属肿瘤基因表型标记物，是由于靶细胞基因表达和调控异常的结果，表现为蛋白质合成紊乱，产生异常抗原，常出现在肿瘤进展阶段［6］。多项研究提示，SccAg是宫颈癌较特异的肿瘤标记物，其血清水平随临床分期进展而增高，可以做为宫颈癌辅助诊断指标，并用于评价疗效。我们的研究提示，血清SccAg随宫颈癌肌层浸润深度及临床期别的增加而增高，深肌层浸润者较浅肌层浸润者明显升高，晚期无手术机会者最高，但血清SccAg值与术中是否残留、术后近期（半年）有无复发无明显相关。与国外的研究基本一致［7］。 suPAR与SccAg联合检测可大大提高宫颈癌是否早期转移预测的准确性，它既可做为预后判断和评价治疗的指标，亦可做为术后是否需要补充外照射的参考指标。宫颈癌的主要转移途径是经淋巴道转移，术后放疗的目的是消灭亚临床病灶和残存的病灶，对于淋巴结阴性的患者，放疗只会增加放疗损伤而无益提高无瘤生存期。判断术后淋巴结是否转移，以往仅靠传统的病理切片。随着分子生物学的飞速发展，suPAR与SccAg的变化早于病理组织学变化。通过对suPAR与SccAg的联合检测，诊断敏感度显著提高（达90.1%），阴性预测值提高到94.8%,诊断准确性较单项提高到86.2%，联合检测其水平做为评判淋巴结亚临床转移、是否需要放疗、以及判断预后、治疗评价的重要指标，必将为指导临床工作提供重要参考。这一检测仍需大样本进一步研究证实。【参考文献】 ［1］ Dano K,Romer J,Nielsen BS,et al.Cancer invasion and tissue remodeling²cooperation of protease systems and cell types[J].APMIS,1999,107(1):120²127. [2] Resnati M,Pallavicini,Iserhan CN,et al.The fibrinolytic receptor for urokinase Activates the G protein²coupled chemotactic receptor[J].Proc Natl Acad Sci USA,2002,99(3):1359²1364. [3] Kruger A,Soeltl R,Lutz V,et al.Reduction of breast carcinoma tumor growth and lung colonization by overexpression of the soluble urokinase²type plasminogen activator receptor(CD87)[J].Cancer Gene Ther,2000,7(2):292²299. [4] Lutz R,Sabine R,Sonja P,et al.Urokinase gene expression indicates early invasive growth in souamous cell lesions of the uterine cervix[J].Pathol，1999,189(2):245²250. [5] Kathleen D,Aamir A,Asfar S，et al.Evolving role of uPA/uPAR system in human cancers[J].Cancer Treatment Reviews,2008,34(2):122²136. [6] Crombach G,Scharl A,Vierbuchen M,et al.Detection of squamous cell carcinoma antigen in normal squamous epithelia and in squamous cell carcinoma of the uterine cervix[J].Cancer,1989,63(7):1337²1342. [7] Takeshima N.The value of squamous cell carcinoma antigen as a predictor of nodal metastasis in cervical cancer [J].Gynecol Oncol,1998,68(3):263²266.
