Caveolin-1在84例原发性乳腺癌中表达及其意义
发表时间：2009-06-08 浏览次数：779次
作者单位：中国医科大学病理科病理学研究室，辽宁 沈阳 110001 【摘要】 ［目的］ 探讨Caveolin-1在乳腺癌中的表达及其临床意义。［方法］ 运用SP免疫组化方法检测84例原发性乳腺癌组织中Caveolin-1的表达。［结果］ 84例原发性乳腺癌组织中Caveolin-1阳性表达率为45.2％。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌中，Caveolin-1阳性率分别为81.8%（9／11）、45.1%（23／51）、33.3%（6／18）和25%（1／4）（P＜0.05）。腋淋巴结转移的乳腺癌Caveolin-1阳性率31.1%（14/45），明显低于无腋淋巴结转移（66.7%，P＜0.01）。T1、T2、T3乳腺癌的阳性表达率分别为66.7%（10/15）、41.8%(20/49)、36.4%(4/11)，三者间无明显差异。但T1和T2＋T3之间差异有显著性（P＜0.05）。Caveolin-1表达与年龄、组织学类型、分化程度、C-erbB-2和受体状况均未见相关性。［结论］ 原发性乳腺癌Caveolin-1的表达与肿块大小和腋淋巴结状况密切相关，随着病情的进展其表达呈下调趋势。
【关键词】 乳腺肿瘤
微囊（Caveolae）是细胞膜系统中的一个十分重要的结构。微囊蛋白-1（Caveolin-1）是该结构的重要组成成分之一。Caveolin-1在维系细胞的脂类代谢平衡、控制细胞的增殖和调节细胞迁移等诸多方面发挥着重要作用。本研究运用免疫组化方法检测人原发乳腺癌组织中微囊蛋白-1的表达状况并分析该表达与某些临床病理因素相关性。
1 材料与方法
1.1 材 料
标本来源于辽宁省肿瘤医院，1997年~2000年手术切除的84例原发性浸润性导管癌组织。肿瘤组织经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋。患者均为女性，年龄25~73岁，平均年龄46岁。AJCC和UICC联合制定（1997年）的为分期标准。Ⅰ期11例，Ⅱ期51例，Ⅲ期18例，Ⅳ期4例。其中高分化13例，中分化28例，低分化43例。T1 15例，T2 49例，T3 11例。腋淋巴结转移者45例，无转移者39例。患者术前均未接受过放疗、化疗。
1.2 免疫组化染色
石蜡包埋组织进行连续切片，厚度4μm。
试剂：Caveolin-1多抗（美国Santa Cruze公司），ER及C-erbB-2即用型、SP超敏试剂盒和DAB酶底物显色试剂盒（福州迈新生物技术开发公司）。
切片染色方法按链霉素抗生素蛋白—过氧化物酶（SP）法试剂盒说明书步骤操作。抗Caveolin-1（1∶100）、ER及C-erbB-2均经高压修复预处理。抗原修复液为pH6.0柠檬酸缓冲液。经DAB染色后，苏木素对比复染，中性树胶封片。以PBS代替一抗作为阴性对照。
1.3 阳性判断标准
盲法判定结果。每张切片分别由两位病理医师独立阅片，一致肯定为阳性者方被视为阳性。光镜下，每张切片选择5个高倍视野，每一视野计数100个肿瘤细胞。阳性细胞为细胞膜和／或细胞浆呈棕黄色。取正常乳腺组织导管上皮作为阳性对照。（1）按阳性细胞百分率计分，0~25%为0分，26%~50%为1分，51%~75%为2分，76%~100%为3分。（2）按染色强度计分，无着色为0分，着色略深的为1分，较深的为2分。两者合计＜2分为阴性，≥2分为阳性。
1.4 统计学处理
统计学软件为SPSS11.0版。Caveolin-1与临床病理学因素相关性采用卡方检验，α＝0.05，P值为双侧。
2 结 果
Caveolin-1是一种膜/浆表达蛋白，在正常乳腺导管上皮细胞和血管内皮细胞中广泛表达。84例原发性乳腺癌组织中Caveolin-1呈阳性表达者38例(45.2%)。T1、T2、T3的阳性表达率分别为66.7%、41%、36.4%（P＞0.05）；但T1（≤2cm）和T2+T3（＞2cm）之间有显著性差异（P=0.036）。在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌中，Caveolin-1阳性率分别为81.8%、45.1%、33.3%和25%，有统计学差异（P=0.047）。Caveolin-1在腋淋巴结转移癌中阳性表达率为31.3%，淋巴结无转移癌病例中阳性表达率为66.7%，两者比较具有统计学差异(P=0.001)。见表1。Caveolin-1的表达与乳腺癌的组织学类型、分化程度、ER受体、C-erbB-2的表达和年龄等无关。
3 讨 论
本研究表明Caveolin-1广泛存在正常乳腺导管上皮和血管内皮细胞，而它在乳腺癌中表达显著降低，与文献中报道的肺癌[1]、胃癌[2]、乳腺癌等多种肿瘤组织结果一致。Caveolin-1在肿瘤中表达下降的分子学机制，目前主要认为与Caveolin-1第132位密码子（P132L）基因突变及其启动子甲基化有关。Caveolin-1的架构区具有蛋白激酶抑制活性，能够抑制EGF-R、Raf、G蛋白、C-src酪氨酸激酶、MEK-1和ERK-2等。本研究同时发现Caveolin-1表达与肿块大小在T1和T2+T3之间有统计学差异，并呈负相关。
体内外实验还发现Caveolin-1能抑制表皮生长因子受体家族中的一种重要受体（C-erbB-2）酪氨酸激酶活性，C-erbB-2异常表达也能负向调控Caveolin-1。而本实验C-erbB-2阳性者Caveolin-1表达率（37.5%）虽然明显低于阴性者（61%），却未显示出统计学差异，可能与本实验样本较少有关。本研究发现有腋淋巴结转移的乳腺癌中Caveolin-1表达明显低于无淋巴结转移者，且随着病期的早晚其表达呈下调趋势，提示Caveolin-1表达下调可能通过影响乳腺癌细胞β-Catenin的分布和/或MMPs和VEGF、C-erbB-2基因的表达间接或直接提高肿瘤细胞的侵袭和转移能力。
Caveolin-1作为肿瘤抑制因子的作用机制在不同肿瘤乃至同一种肿瘤的研究中尚存很多争议。Caveolin-1在肾透明细胞癌[3]、前列腺癌组织中表达增高，并与淋巴结转移、分期成正相关，这于我们在乳腺癌组织中的研究结果矛盾。对于Caveolin-1表达与乳腺癌受体ER、PgR的关系，Chen ST[4]的研究结果和我们的一致，即两者无关联，但Sagara Y[5]却作出了相反的结论。肿块大小、腋淋巴结转移、分期都是影响乳腺癌预后的独立因素。综上，Caveolin-1在乳腺癌中的表达与三者密切相关，因此探索Caveolin-1与乳腺癌预后的关系应成为下一阶段的重要课题。
