巨细胞病毒感染与冠心病急性心肌梗死的相关性研究

　　作者：刘大男,李金生,刘兴德,方颖,吴立荣,李　　作者单位：贵阳医学院附属医院心内科,贵州 贵阳

　　【摘要】目的 探讨巨细胞病毒(CMV)感染与急性心肌梗死(AMI)的关系。方法 分别采用酶联免疫法和PCR技术测定51例AMI患者(AMI组)、42例陈旧性心肌梗死患者(陈旧性心肌梗死组)及冠脉造影正常的31例正常对照者(正常对照组)、33例非冠心病患者(非冠心病组)血浆CMV抗体水平及DNA，并检测各组的纤维蛋白原(Fg)、6酮前列环素(6KetoPGF1α)、血栓素B2(TXB2)和P选择素(GMP140)。结果 AMI组(治疗前)IgG水平、IgM阳性率及水平显著高于其余组(均P<0.01)，DNA检测结果相一致。校正危险因素前、后，IgG阳性与AMI均有相关性(OR 3.262,P=0.021;OR 3.047,P=0.030)。AMI组IgG(+)与IgG(-)患者比较，Fg、TXB2、GMP140显著升高，6KetoPGF1α显著降低(P<0.01或P<0.05);IgG与Fg、TXB2、GMP140呈正相关，与6KetoPGF1α呈负相关。结论 急性或激活性CMV感染与AMI的发生有关，可能是后者的促发因素。CMV感染可能通过触发或加重冠脉内炎症反应，促使血栓形成，参与动脉粥样硬化、AMI的病理过程。

　　【关键词】 心肌梗死,巨细胞病毒,纤维蛋白原; 6酮前列环素; 血栓素B2; P选择素

　　【Abstract】Objective To investigate the relationship between cytomegalovirus (CMV) infection and acute myocardial infarction (AMI). Methods The levels of serum antiCMV antibody, DNA, fibrinogen (Fg), 6ketoprostaglandin F1 alpha (6KetoPGF1α), thromboxane B2 (TXB2) and Pselectin (GMP140) were measured by enzymelinked immunosorbent assay and PCR in AMI group (n=51), old myocardial infarction (OMI) group(n=42 patients)，normal control group(n=31) and noncoronary heart disease group (n=33). Results Before treated, the prevalences and levels of CMVIgG，CMVIgM in AMI group were significantly higher than those in other groups (P<0.01). Correcting of the major cardiovascular risk factors before and after, the prevalence of CMVIgG was associated with AMI (OR=3.262, 3.047). IgGpositive patients had significantly higher levels of Fg, TXB2 and GMP140 and lower level of 6KetoPGF1α than IgGnegative patients in AMI group (P<0.01, P<0.05). The level of CMVIgG was positive correlation with the levels of Fg, TXB2 and GMP140 and negative correlation with the level of 6KetoPGF1α. Conclusions There is a significant correlation between acute or active CMV infection and AMI. By inducing or accelerating inflammation and thrombosis in coronary artery, CMV infection involves in the pathogenesis of atherosclerosis and AMI.

　　【Key words】 Myocardial infarction; Cytomegalovirus; Fibrinogen; 6ketoprostaglandin F1 alpha; Thromboxane B2; Pselectin

　　近十几年来，病原微生物感染与动脉粥样硬化、冠心病的关系引起国内外学者的关注。有研究〔1〕表明巨细胞病毒(CMV)感染是动脉粥样硬化、冠心病的独立危险因子，但机制不清楚。易损斑块破裂、血栓形成是导致急性心肌梗死(AMI)的主要机制。本研究结合免疫学、分子生物学检测AMI患者血浆中纤维蛋白原(Fg)、血栓素B2(TXB2)、6酮前列环素(6KetoPGF1α)、P选择素(GMP140)水平，探讨CMV感染与AMI的关系。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象

　　AMI组51例，均为首次发病，年龄60～74(平均66.7±5.2)岁，男36例，女15例，分别于急性期(心肌梗死发作24h内)和恢复期(入院治疗4 w后，且均无再梗死及心绞痛发作)取血检测;陈旧性心肌梗死组42例，年龄60～78(平均66.7±5.8)岁，男32例，女10例;均符合1981年全国冠心病诊断标准。非冠心病组33例(其中高血压病13例，风湿性心瓣膜病10例，扩张型心肌病10例)，年龄60～74(平均66.6±5.6)岁，男23例，女10例，经冠状动脉造影除外冠心病的患者;正常对照组31例，年龄60～73(平均66.6±5.3)岁，男23例，女8例，因可疑冠心病同期入院，但经冠状动脉造影及全面体检除外心、肺、肝、脑、肾等器质性疾病。

　　1.2 方法

　　1.2.1 血标本采集

　　所有入选者均采集空腹静脉血，分离血浆及白细胞置-70℃冰箱保存，以备同批测定CMV特异性抗体(IgG、IgM)、CMV DNA及Fg、6KetoPGF1α、TXB2、GMP140，采血后立即送检Fg。AMI组分别于治疗前及治疗4 w后采血，陈旧性心肌梗死组和非冠心病组停用调脂、抗凝、抗血小板聚集药1 w后，并且陈旧性心肌梗死组在无心绞痛发作时采血。患者知情并签署同意书。

　　1.2.2 标本检测

　　IgG、IgM测定采用酶联免疫吸附(ELISA)法;DNA采用常规PCR技术对IgG或IgM阳性者进行检测，由上海复兴公司提供PCR定性试剂盒。Fg测定采用血液凝固法;6KetoPGF1α、TXB2测定采用放射免疫分析法;GMP140测定采用ELISA法，分别由深圳和北京晶美公司提供试剂盒。

　　1.3 统计学处理

　　计量资料以x±s表示，应用SPSS10.0软件包进行资料统计，两样本率比较用χ2检验，两样本均数比较用t检验，多样本均数比较用q检验，方差不齐时进行变量变换，相关关系采用多元Logistic回归分析，偏相关分析。

　　2 结果

　　2.1 CMV感染情况

　　见表1，与非冠心病组、正常对照组比较，心肌梗死患者IgG水平、阳性率显著升高(均P<0.01);AMI组IgG水平、IgM阳性率及水平显著高于其余3组(均P<0.01)，其余3组间IgM阳性率及水平差异无显著性;治疗后AMI组IgG水平、IgM阳性率及水平显著降低(P<0.01)，IgG阳性率下降不显著。DNA检测结果显示，各组CMV抗体阳性与CMV DNA阳性一致。

　　2.2 CMV感染与心肌梗死的关系 CMV IgG与AMI具有相关性(OR为3.262,95%CI 1.180～11.322,χ2 5.052,P=0.021)，校正性别、年龄、吸烟、肥胖、高血脂、高血压、糖尿病后，二者的相关性仍然存在(OR=3.047,95%CI 1.100～9.728,χ2=4.545,P=0.030)。未校正上述危险因素前CMV IgG与陈旧性心肌梗死具有相关性(OR=3.899, 95%CI 1.230～12.359,χ2=4.956,P=0.027)，校正后二者的相关性消除(OR=1.607, 95%CI 0.917～3.247,χ2=1.612,P=0.180)。表1 各组CMV IgG、IgM及DNA测定结果(略)

　　2.3 各组Fg、TXB2、6KetoPGF1α、GMP140 检测结果

　　见表2。表2 各组Fg、TXB2、6KetoPGF1α、GMP140测定结果(略)

　　2.4 IgG与各项指标的相关分析

　　急性心肌梗死组IgG阳性患者IgG与Fg、TXB2、GMP140呈正相关(分别r=0.582, P=0.000;r=0.565,P=0.000;r=0.513,P=0.001)，而与6KetoPGF1α呈负相关(r=-0.502,P=0.002);校正吸烟、年龄、肥胖、糖尿病后IgG与Fg、TXB2、GMP140仍呈正相关(分别r=0.520,P=0.001;r=0.498,P=0.002;r=0.469,P=0.003)，与6KetoPGF1α仍呈负相关(r=-0.422,P=0.007)。陈旧性心肌梗死组IgG阳性患者IgG与Fg、TXB2、GMP140不相关(分别r=0.345,P=0.062;r=0.480, P=0.032;r=0.330, P=0.074)，与6KetoPGF1α呈负相关(r=-0.495, P=0.030);校正冠心病危险因素后IgG与Fg、TXB2、GMP140不相关(分别r=0.316,P=0.086;r=0.463, P=0.041;r=0.305, P=0.100)，与6KetoPGF1α仍呈负相关(r=-0.479,P=0.038)。

　　3 讨论

　　CMV常呈隐性感染,急性感染表现为高滴度的IgG和(或)IgM阳性。Eryol〔2〕报道，CMV IgG≥8 U/ml预示发生冠心病的危险(OR=2.1, P=0.04)。Zhu等〔3〕研究显示CMV感染与心肌梗死或冠心病死亡有关(RH=2.0, 95%CI 1.4～3.2)。本研究显示，AMI时患者IgG、IgM阳性率及水平显著升高，AMI组治疗后、陈旧性心肌梗死组IgG阳性率虽然高，但IgG水平降低，IgM阳性率及水平与非冠心病组、正常对照组相近，并且各组DNA阳性与抗体阳性一致，提示AMI时存在急性或激活性CMV感染，陈旧性心肌梗死组存在慢性CMV感染，推测急性或激活性CMV感染可能促发AMI，慢性持续性CMV感染可能与动脉粥样硬化的发生、发展有关。治疗4 w后AMI组IgG水平虽降低，但仍显著高于陈旧性心肌梗死组，可能是由于IgG持续时间较长，其水平变化受人群IgG水平的影响。正常组有一定的感染率，提示CMV感染只是AMI的危险因素之一。多元Logistic回归分析显示，CMV感染与AMI的发生有关，且不受冠心病危险因素的影响，而与陈旧性心肌梗死的关系却被其与冠心病危险因素之间的关系所掩盖，进一步提示CMV感染与AMI有关。

　　炎症、血栓形成均是导致斑块不稳定、破裂，引发急性冠脉综合征的主要机制〔4，5〕。Fg为急性期反应蛋白，Fg升高是冠心病的危险因素，能促发粥样硬化局部或全身炎症反应和血栓形成;血栓素A2/前列环素I2 (TXA2/PGI2)失衡使血管舒缩功能失调，是导致血栓形成的重要原因之一;血浆GMP140主要由活化的血小板产生,可介导血小板、白细胞及内皮细胞之间的相互作用，促使冠脉内血栓形成和局部炎症反应。本研究显示心肌梗死，尤其是AMI时，Fg、TXB2、GMP140显著升高，6KetoPGF1α显著降低，提示存在较强的炎症激活及血小板活化、血栓形成倾向。本研究也显示心肌梗死各组CMV IgG(+)与IgG(-)患者比较，Fg、TXB2、GMP140明显升高，6KetoPGF1α明显降低，并且AMI时Fg、TXB2、GMP140、6KetoPGF1α水平变化与IgG(+)有很好的相关性，提示CMV感染可能是心肌梗死，尤其是AMI患者Fg、TXB2、GMP140、6KetoPGF1α变化的因素。研究〔6〕表明，CMV感染可导致血管壁持续感染和慢性炎症状态，造成促炎、促凝、促动脉粥样硬化形成的环境。这些均能使Fg、TXB2、GMP140升高，6KetoPGF1α降低。CMV感染可损伤血管内皮使PGI2合成酶减少,因此活化血小板产生的内过氧化物PGH2不能被转化成PGI2，而被其微粒体中的TXA2合成酶转化为TXA2，导致或加重TXA2/PGI2失衡，故血TXB2/6KetoPGF1α失衡。

　　研究〔7,8〕显示，CMV感染可导致异体心脏移植接受者发生动脉粥样硬化，而预先接受更昔洛韦或CMV超免疫球蛋白治疗，可显著抑制冠脉内膜增厚及降低冠心病的发病率。本研究表明急性或激活性CMV感染与AMI的发生密切相关，可能是后者的促发因素。CMV感染可能通过触发或加重冠脉内炎症反应，促使血管壁损伤、血管收缩、血小板活化、血栓形成及斑块易损性增强、破裂，参与动脉粥样硬化、AMI的病理过程。

　　【参考文献】

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　　2 Eryol NK, Kilic H, Gul A, et al.Are the high levels of cytomegalovirus antibodies a determinant in the development of coronary artery disease〔J〕? Int Heart J，2005;46(2):2059.

　　3 Zhu J,Nieto FJ,Horne BD,et al.Prospective study of pathogen burden and risk of myocardial infarction or death〔J〕.Circulation,2001;103(1):4551.

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