环氧合酶-2和VEGF在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

　　作者：孙桃姣 熊斌　陈建刚 龚玲玲

　　【关键词】  口腔鳞状细胞癌

　　［摘要］  目的：研究口腔鳞状细胞癌组织中COX-2和VEGF的表达及其临床意义。方法：用链霉素亲生物素-过氧化酶免疫组织化学（SP）法检测40例口腔鳞状细胞癌组织中COX-2和VEGF的表达，分析COX-2和VEGF表达与临床病理参数的关系以及COX-2表达与VEGF表达的相关性。结果：COX-2表达阳性率为47.5%（19/40），VEGF表达阳性率为60%（24/40）。COX-2和VEGF的表达与口腔鳞状细胞癌患者的年龄、性别及组织分化程度无明显关系（P＞0.05），与临床分期和淋巴结转移有关。Ⅲ期与Ⅰ、Ⅱ期比较，原发灶中COX-2和VEGF表达率有升高趋势（P＜0.05）。有淋巴结转移者与无淋巴结转移者比较，原发灶中COX-2和VEGF表达率有升高趋势（P＜0.05）。COX-2表达与VEGF的表达呈正相关，COX-2阳性组与COX-2阴性组比较，原发灶中VEGF的表达呈升高趋势（P＜0.05）。结论：COX-2和VEGF的表达与口腔鳞状细胞癌的增殖、浸润和转移有关，COX-2可能通过诱导血管生成而促进肿瘤浸润、转移，检测口腔鳞状细胞癌中COX-2和VEGF的表达有助于临床诊断和治疗。

　　［关键词］  口腔鳞状细胞癌  COX-2  VEGF

　　Expression of COX-2 and VEGF in Human Oral Squamous Cell Carcinoma.

　　SUN Tao-jiao, XIONG Bin, CHEN Jian-gang, et al.

　　Zhongnan Hospital, Wuhan University, Wuhan 430071

　　［Abstrct］Objective: To explore the relationship between expression of COX-2 and VEGF and progression as well as, metastases of oral squamous cell carcinoma. Methods: The expression of COX-2 and VEGF were detected in 40 oral squamous cell carcinoma patients by immunohistochemical staining. The relationship between expression of COX-2 and VEGF and progression as well as metastases of oral squamous cell carcinoma was evaluated. Results: Among 40 cases of oral squamous cell carcinoma, 19 cases were positive for COX-2(47.5%), and 24 cases for VEGF(60%), respectively. The expression of COX-2 and VEGF were closely correlated with stage and lymph node metastasis of oral squamous cell carcinoma(P＜0.05). Conclusion： COX-2 and VEGF were involved in progression and metastases of oral squamous cell carcinoma. The expression of COX-2 and VEGF will be helpful to the diagnosis and treatment of oral squamous cell carcinoma.

　　［Key words］  Oral squamous cell carcinoma  Cyclooxygenase-2  Vascular endothelial growth factor

    环氧合酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）是一种多功能的蛋白质。在多种恶性肿瘤组织中，COX-2的表达增高，它与恶性肿瘤发生发展密切相关。COX-2通过多种途径促进肿瘤的发生发展，许多研究显示，COX-2与调节肿瘤血管生成有关，而肿瘤血管生成是肿瘤生长、转移的基础。为了探讨COX-2与口腔鳞状细胞癌进展的关系，我们采用免疫组织化学技术研究了40例口腔鳞状细胞癌组织中COX-2和VEGF的表达情况，结合临床病理资料，探讨其临床意义。

　　1  材料与方法

　　1.1  一般资料  40例经病理证实的口腔鳞状细胞癌组织取自武汉大学口腔医学院和武汉大学中南医院。其中男性22例，女性18例，年龄20~78岁，平均57±11岁。高分化鳞癌16例，中分化鳞癌19例，低分化鳞癌5例。按UICC的分期标准［1］，Ⅰ期13例、Ⅱ期19例、Ⅲ期8例、Ⅳ期0例。

　　1.2  实验方法  组织标本均为经10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋之存档组织块，5 μM切片。COX-2多克隆抗体和VEGF单克隆抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology公司。链霉素亲生物素-过氧化酶免疫组织化学（SP）试剂盒购自福州迈新公司。一抗工作液浓度为1∶100，免疫组化染色程序按试剂盒说明书进行。每批染色均设立阴性空白对照（以PBS液代替第一抗体）。

　　1.3  结果判断  COX-2和VEGF免疫组化SP法染色细胞质或细胞膜呈棕色为阳性；计数5个高倍视野(每个视野约100个细胞)，阳性细胞占肿瘤细胞的10%以下者为“一”，≥10%者为“+”［2］。

　　1.4  统计处理  本研究应用χ2检验及精确概率法分析组间差异，用等级相关分析分析COX-2与VEGF的相关性。检验水准α定为0.05。

　　2  结果

　　2.1  口腔鳞状细胞癌组织中COX-2和VEGF表达  COX-2和VEGF主要定位于肿瘤细胞，在阳性细胞的细胞质或细胞膜呈棕（褐）色，阳性颗粒粗细不等，见图1、图2。COX-2表达阳性率为47.5%（19/40），VEGF表达阳性率为60%（24/40）。

　　图1 － 图2  略

　　2.2  COX-2和VEGF表达与临床病理特征的关系  COX-2和VEGF表达与口腔鳞状细胞癌患者的年龄、性别及组织分化程度无明显关系（P＞0.05），与临床分期和淋巴结转移有关。Ⅲ期与Ⅰ、Ⅱ期比较，原发灶中COX-2和VEGF表达率有升高趋势（P＜0.05）。有淋巴结转移者与无淋巴结转移者比较，原发灶中COX-2和VEGF表达率有升高趋势（P＜0.05），详见表1。

　　表1  COX-2和VEGF表达与口腔鳞状细胞癌临床病理特征的关系　略

　　2.3  COX-2的表达与VEGF表达的相关性  COX-2的表达与VEGF表达呈明显的正相关性（rs=0.583,P＜0.05）。在COX-2阳性组中VEGF的阳性率（76.6%）明显高于COX-2阴性组中的阳性率（23.4%）。

　　3  讨论

    COX是花生四烯酸代谢的关键限速酶［3］。目前发现其存在两种亚型：结构型的环氧合酶（COX-1）和诱导型的环氧合酶（COX-2）［3］。COX-1参与维持机体的各种生理功能［3］。正常情况下，绝大多数细胞不表达COX-2，只有在细胞外许多刺激因子的作用下才诱导表达［4］。

    在许多肿瘤中COX-2过度表达，其过度表达与肿瘤的进展、预后有关［3］。本研究显示，与正常口腔黏膜比较，口腔鳞状细胞癌组织中COX-2呈过度表达。COX-2的表达与口腔鳞状细胞癌患者的年龄、性别及组织分化程度无明显关系（P＞0.05），与临床分期和淋巴结转移有关。COX-2在Ⅲ期口腔鳞状细胞癌中的阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期，在有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者。提示COX-2的过度表达与口腔鳞状细胞癌的进展、转移有关。Chan等［5］已报告，在24例头颈鳞癌中，COX-2 mRNA的平均水平与正常口腔黏膜比较上升了150倍。

    最近研究显示，COX-2在肿瘤发生发展的很多分子机制中发挥作用，COX-2抑制细胞凋亡、抑制免疫和诱导肿瘤血管生成［1］。血管生成在肿瘤的生长、转移和播散中发挥重要作用，VEGF是人体中最强的血管生成因子，通过与内皮细胞上两个特殊受体结合，直接刺激内皮细胞的分裂、游走和增殖，从而促进血管生成。近年来，多种肿瘤组织中都发现了VEGF的过表达［6］。为了进一步探讨COX-2表达与肿瘤血管生成的关系，本文观察了口腔鳞状细胞癌中VEGF的表达，并分析了COX-2表达与VEGF表达的相关性。我们发现，与正常口腔黏膜比较，VEGF在口腔鳞状细胞癌中呈高表达。其表达率与患者的年龄、性别及组织分化程度无明显关系（P＞0.05），与临床分期和淋巴结转移有关。Ⅲ期病例表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期，有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者。提示VEGF在口腔鳞状细胞癌的进展中发挥重要作用。COX-2的表达与VEGF表达呈明显的正相关性（P＜0.05）。在COX-2阳性组中VEGF的表达率明显高于COX-2阴性组中的表达率。提示COX-2通过VEGF而诱导肿瘤血管生成，从而促进口腔鳞状细胞癌增殖、浸润和转移。有研究者将Lewis肺癌细胞植入COX-2-/-鼠及野生型鼠中，COX-2-/-鼠血管密度较野生型鼠低30%，肿瘤生长明显减慢［7］，这进一步说明COX-2表达与肿瘤血管生成的相关性。检测口腔鳞状细胞癌中COX-2和VEGF的表达有助于临床诊断和治疗。

　　参考文献

　　［1］  刘新春，程玉峰，李德爱. 实用抗肿瘤药物治疗学［M］.北京：人民卫生出版社，2002，529-530

　　［2］  Xiong B, Sun TJ, Yuan HY, et al. Cyclooxygenase-2 expression and angiogenesis in colorectal cancer ［J］. World J Gastroenterology, 2003, 9(6)∶1 237

　　［3］  Yamauchi T, Watanabe M, Kubota T, et al. Cyclooxygenase-2 expression as a new marker for patients with colorectal cancer ［J］. Dis Colon Rectum, 2002, 45∶98

　　［4］  Cao Y, Prescott SM. Many actions of cycooxygenase-2 in cellular dynamics and in cancer ［J］. J Cellular Physiology, 2002, 190∶279

　　［5］  Chan G, Boyle JO, Yang EK, et al. Cyclooxygenase-2 expression is up-regulated in squamous cell carcinoma of the head and neck ［J］. Cancer Res, 1999, 59∶991

　　［6］  Lee JC, Chow NH, Wang ST, et al. Prognosis value of vascular endothelial growth factor expression in colorectal cancer patients ［J］. Eur J Cancer, 2000, 36∶748

　　［7］  Williams CS, Tsujii M, Reese J, et al. Host cyclooxygenase-2 modulates carcinoma growth ［J］. J Clin Invest, 2000,105∶1 589