卵巢癌中C-erbB2、p53基因表达及临床意义

　　作者：赵明珠　　作者单位：湖北省黄梅县中医医院妇产科

　　【摘要】 目的：探讨卵巢癌中C-erbB2基因、p53基因的表达情况及p53蛋白表达与PCNA的相关性。方法：对比2008年1月～2009年1月应用免疫组化SP三步法检测的40份卵巢癌组织、10份正常卵巢组织中C-erbB2基因、p53基因的表达情况及PCNA计数。结果：卵巢癌组织中存在C-erbB2基因与p53基因的异常表达，阴性率显著高于正常卵巢组(P<0.01)，p53蛋白表达阳性与阴性两组间PCNA计数差异有统计学意义，阳性组高于阴性组(P<0.05)。结论：C-erbB2基因、p53基因的异常表达与卵巢癌的发生有关，其异常表达强度与肿瘤的分化及患者的预后有关，临床联合检测C-erbB2基因、p53基因的表达情况及PCNA计数，有助于准确判断卵巢癌的恶性程度及患者的预后。

　　【关键词】 卵巢癌;癌基因C-erbB2;抑癌基因p53;增生细胞核抗原PCNA;免疫组织化学

　　[ABSTRACT] Objective： To explore the gene expression of C-erbB2 and p53 in ovarian cancer and correlation between the protein expression of p53 and PCNA. Methods： The gene expression of C-erbB2 and p53 and the count of PCNA in 40 tissues of ovarian cancer and 10 normal ovarian tissues which were collected from January 2008 to January 2009 were compared by SP three-step method of immunohistochemistry. Results： Abnormal gene expression of C-erbB2 and p53 was present in the tissues of ovarian cancer. The negative ratio was significantly higher than that of the normal group (P<0.01). There was a significant difference in the count of PCNA between the two groups of positive and negative protein expressions of p53. The count in the positive group was higher that in the negative group (P<0.05). Conclusions： It can be concluded that the abnormal gene expression of C-erbB2 and p53 is associated with the occurrence of ovarian cancer and its intensity is also related with the tumor differentiation and patients' prognosis. Combined detection of C-erbB2 and p53 and the count of PCNA will help to accurately diagnose the malignant degree of ovarian cancer and patients' prognosis.

　　[KEY WORDS] Ovarian cancer; C-erbB2; p53; PCNA; Immunohistochemistry

　　卵巢癌是妇科临床较常见的恶性肿瘤，其治疗主要以手术为主。近年来分子生物学不断发展，对癌基因及其表达产物的检测在肿瘤的发病机制、恶性程度及临床治疗和预后估计都显示了重要的作用。C-erbB2原癌基因及p53抑癌基因均为肿瘤相关基因，其异常表达可在多种恶性肿瘤中检测到[1]。增生细胞核抗原(proliferating cell nucleus antigen， PCNA)是一种酸性核蛋白，可以反映细胞的增殖活性，是细胞增殖动力学研究常用的指标。笔者采用免疫组化的方法检测2008年1月～2009年1月住院手术治疗的卵巢癌患者40例卵巢组织中C-erbB2、p53及PCNA的表达情况并与同期10例正常卵巢组织进行对比分析，旨在探讨卵巢癌相关基因表达与细胞增殖状态及预后的关系，结果报道如下。

　　1　资料与方法

　　1.1　临床资料

　　选择2008年1月～2011年1月住院手术治疗，病历资料完整并经病理证实的40例卵巢癌病例为研究对象，并选取同期10例正常卵巢组织为对照。

　　1.2　实验方法

　　将40例卵巢癌组织设为观察组，10例正常卵巢组织设为对照组。标本甲醛固定，石蜡包埋，制成4 μm切片，HE染色。采用SP三步法，按试剂盒上步骤说明进行，鼠抗人C-erbB2、p53、PCNA单克隆抗体及SP试剂盒(即用型)均为ZYMED的产品。阴性对照采用PBS代替一抗，用已知阳性的标本作阳性对照。

　　1.3　结果判定

　　结果判定标准参照3个参数的半定量计数方法，即染色强度、阳性细胞数和两者积分的乘积[2]。

　　1.4　统计学处理

　　本组数据采用SPSS10.0统计软件包进行数据处理，组间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结果

　　2.1　卵巢组织癌基因C-erbB2的表达情况

　　观察组卵巢组织癌基因C-erbB2、抑癌基因p53表达阳性率显著高于对照组P<0.05，表明C-erbB2基因、p53基因的异常表达与卵巢癌的发生有关，见表1、2。表1　C-erbB2的表达情况　表2　抑癌基因p53的表达情况

　　2.2　卵巢癌p53蛋白表达与PCNA计数间的关系

　　卵巢癌p53蛋白表达PCNA计数阳性组为(78.5±17.6)，阴性组为(58.1±18.3)，阳性组明显高于阴性组(P<0.01)，且随恶性程度升高，提示PCNA计数与p53蛋白表达具有相关性。

　　3　讨论

　　3.1　卵巢癌中C-erbB2的表达及意义

　　C-erbB2原癌基因定位于17号染色体q21区带，编码具有酪氨酸激酶活性的细胞表面糖蛋白，分子量185KD，能激活C-erbB2基因编码蛋白所诱导的酪氨酸激酶活性，起调节上皮细胞生长和分化的信号传递通道作用。C-erbB2通过基因扩增等途径激活，变为活化的癌基因，可促进细胞癌变和癌细胞生长增殖[3]。有研究表明，C-erbB2基因的扩增和过度表达与卵巢癌的发生、发展及患者的预后密切相关[4]。本组资料表明，C-erbB2基因在卵巢癌与正常卵巢组织中表达有显著差异，表明C-erbB2基因的过度表达可以作为一个有价值的判断患者预后的因素。

　　3.2　卵巢癌中p53的表达特点及其意义

　　p53抑癌基因定位于17号染色体短臂，编码一种核磷蛋白，调节转录，并在细胞G1期起调控点作用，识别并修复损伤的DNA，其编码产物具有控制细胞增殖和调节其他基因表达的作用，所以野生型p53基因被认为是细胞生长的监控器，但其编码产物半衰期很短，用免疫组化方法不能测出，而突变型p53蛋白半衰期长，因此认为免疫组化检测阳性即为突变型p53基因存在。本组资料表明卵巢癌p53蛋白表达阳性率为62.5%，提示p53基因突变在卵巢癌的发生过程中是一个重要的遗传学事件。同时在p53蛋白有较高和较强表达的病例中，淋巴结转移概率增加，表明p53蛋白表达可能与淋巴结转移及患者的不良预后有关[5]。

　　3.3　检测PCNA的意义及p53表达与肿瘤细胞增殖的关系

　　PCNA是一种仅在增殖细胞中合成与表达的多肽，与细胞的增殖周期有关，在G1期PCNA表达逐渐增加，S期达到高峰，而G2/M期表达减少，是DNA合成所必需的，对调节复制叉领头链和滞后链的合成起重要作用。肿瘤细胞的增殖是决定肿瘤细胞生物学行为的重要参数，其研究对评估肿瘤患者预后及制定合理的治疗方案具有实际意义[6]。本研究结果表明，PCNA计数在p53蛋白表达呈阳性的卵巢癌中显著升高，且随恶性程度升高而升高，提示PCNA计数与p53蛋白表达具有相关关系。

　　卵巢癌是妇科最严重的疾病，手术加化疗的治疗方案可延长部分患者的生存时间，如能早期诊断可更有效的治疗及提高患者预后效果。本组资料表明联合检测原癌基因C-erbB2、抑癌基因p53及增生细胞核抗原PCNA，有助于进一步了解肿瘤的恶性程度，对于早期诊断及判断预后具有积极作用。

　　【参考文献】

　　1　方琦，王旭芬. 非激素依赖性乳腺癌CerbB-2表达与P53、Ki-67的关系[J]. 南方医科大学学报，2011,31.(2)：380-382.

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　　3　Kawamura K， Komohara Y， Takaishi K， et al. Detection ofM 2m acrophages and colony -stimulating factor 1expression in serous andmuci nousovari an epithelial tumors[J] . Pathol Int,2009,59 (5)：300-305.

　　4　曾永群，陈秋月，李凡彩.CA-125抗原、肿瘤抑制蛋白质p53、Ki-67抗原及抑癌基因p27蛋白作为卵巢癌病理辅助诊断指标的评价[J].中国全科医学，2010,13(6)：1877.

　　5　Torroella-Kouri M， Silvera R， Rodriguez D， et al.Identification of asubpopu lati on of macrophages in mammary tumor -bearing miceth atare neit herM 1n or M2 and are lessdifferent iated[J] . Cancer Res,2009,69(11)：4800-4809 .

　　6　 Kandalaft LE ， Powell DJJr . Immunotherapy for ovari an cancer ：whats ' next[J] . J ClinOnco， 2011， 29(7) ： 925 -933.