多囊卵巢综合征患者血清preptin与胰岛素抵抗相关性研究

　　作者：奚杰　孙大伟　张敏　刘世凯　刘丹彤　黄平　 作者单位：061001　河北省，沧州市中心医院妇一科(奚杰、张敏、刘世凯、刘丹彤、黄平);吉林油田总医院微创妇科(孙大伟)

　　【摘要】 目的　研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清preptin水平变化以及preptin水平与胰岛素抵抗的关系，探讨其在PCOS病理生理过程中的作用。方法　选择未合并糖尿病的PCOS患者41例作为研究对象，同期选择正常女性60例作为对照，测定血清preptin水平及内分泌代谢指标。结果　(1)PCOS组血清preptin水平高于对照组(P<0.05);PCOS非胰岛素抵抗组血清preptin水平低于PCOS胰岛素抵抗组(P<0.05)，但仍高于正常对照组(P<0.05)，差异有统计学意义。(2) preptin与甘油三酯(TG)(r=0.17，P<0.01)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(r=0.19，P<0.01)、2 h糖耐量(2 h OGTT)(r=0.18，P<0.05)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(r=0.20，P<0.01)呈正相关，与体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)无关。结论　preptin可能在PCOS患者胰岛素抵抗发生的病理生理过程中扮演了潜在的推动性角色，可能成为评价PCOS患者体内早期血糖代谢失衡的早期指标。

　　【关键词】 多囊卵巢综合征;　胰岛素分泌细胞;　胰岛素抗药性;　preptin

　　多囊卵巢综合征(PCOS)是女性常见的生殖内分泌疾病，PCOS由Stein等于1935年首先报道，故又称为Stein-Levinthal综合征，育龄妇女中发病率约为6%～10%[1]。自Reaven于1989年首次提出 PCOS患者存在胰岛素抵抗以来，愈来愈多的研究认为，胰岛素抵抗可能参与和促进了PCOS 内分泌紊乱的发展过程。近年许多证据提示 PCOS患者中普遍存在胰岛素抵抗[2]。preptin由胰岛β细胞同胰岛素、胰淀粉素共同分泌，被认为可以在生理状态下增强了葡萄糖介导的胰岛素分泌。以往preptin研究较少，人体研究就更少，国内学者Yang等[3]发现，2型糖尿病患者体内preptin水平升高，而且preptin与胰岛素抵抗的重要评价指标胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)正相关(r=0.13，P<0.05)。本研究旨在探究PCOS患者血清preptin的变化以及其与胰岛素抵抗的关系。

　　一、对象和方法

　　1. 研究对象：选择2009年9月至2010年9月在河北省沧州市中心医院就诊的未并发糖尿病PCOS患者41例，同期选择60例非PCOS女性作为对照组，两组年龄差异无统计学意义。PCOS诊断标准参照美国生殖医学学会鹿特丹工作组修正的标准[4]，并符合以下3条中的任意2条，(1)长期无排卵;(2)雄激素水平升高的临床(如多毛、痤疮)和(或)生化依据;(3)卵巢增大，单侧卵巢体积>10 ml或超声下有直径2～9 mm 的小卵泡>12个。除以上3条外，排除其他疾病所致的雄激素增多症。

　　关于胰岛素抵抗的判断，采用稳态模式评估法，稳态模式评估法是假定肝脏和外周组织的胰岛素抵抗是相等的，按血葡萄糖和胰岛素在不同器官(包括胰腺、肝和周围组织)的相互影响而建立的数学模型。此模型的计算公式仅涉及空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)，即稳态模型的HOMA-IR=[FINS(U/L)×FBG(mmol/L)]/22.5。HOMA-IR与钳夹试验有很好的相关性，在流行病学调查中HOMA-IR是评价胰岛素抵抗的常用指标，一般认为中国人HOMA-IR正常值小于2.69[5]。PCOS组中19例为胰岛素抵抗，22例未发生胰岛素抵抗，对照组全部未发生胰岛素抵抗。

　　正常对照组来自本院体检中心健康人群。所有研究对象肝肾功能正常、无心脑血管疾病，6个月内无使用激素类药物史，血压正常。

　　2. 采样方法：采用统一的调查问卷，了解研究对象年龄、月经史、婚育史等。全部对象测量身高、体重、腰围、臀围3次，取均值。受试前3 d进食足量碳水化合物，取血样前12 h禁食。月经周期第3～5天清晨8时空腹静脉采血10 ml，其中5 ml用于分离血清，低温冰箱-20 ℃保存备测。

　　3. 内分泌激素水平测定：用化学发光法测定黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。

　　4. 代谢指标测定：空腹血清同时测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、FBG及FINS。PCOS患者同天进行口服糖耐量试验(OGTT)及胰岛素释放试验，于服糖后2 h采血，测定血糖2 h BG。血脂用全自动生化分析仪测定，血糖采用葡萄糖氧化酶法测定，胰岛素采用放射免疫分析法(RIA)。按HOMA模型计算胰岛素抵抗指数：HOMA-IR=(FINS×FBG)/22.5。

　　5. preptin测定：ELISA法测定血清preptin(试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司)。

　　6. 统计学处理：采用SPSS 17.0统计软件进行数据处理。计量资料用均数±标准差(x-±s)表示，两样本间采用独立样本t检验，相关分析采用Spearman分析。P<0.05为差异有统计学意义。

　　二、结果

　　两组人群年龄、体重指数(BMI)、性别匹配。与对照组比较PCOS组LH/FSH、FBG、2 h BG、FINS、HOMA-IR、TG均升高，见表1。

　　两组血清preptin水平比较(表1,2)：PCOS组明显高于正常对照组。说明PCOS患者中preptin水平存在基础性的升高，PCOS非胰岛素抵抗组血清preptin水平低于PCOS胰岛素抵抗组，但仍高于正常对照组(P<0.05);PCOS非胰岛素抵抗组FBG、2 h BG、FINS也均低于PCOS胰岛素抵抗组(P<0.05)，而与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在全部样本中做Spearman相关分析显示，preptin与TG(r=0.17，P<0.01)、HDL-C(r=0.19，P<0.01)、2 h BG(r=0.18，P<0.05)、HOMA-IR(r=0.20，P<0.01)呈正相关，与BMI、腰臀比(WHR)、FBG、FINS无关。　表1　PCOS组和对照组临床、内分泌、代谢指标、血清preptin水平的比较表2　PCOS患者胰岛素抵抗与preptin水平关系

　　三、讨论

　　1986年，Tatemoto等[6]从小鼠bTC6-F7B细胞中提纯出一种34肽(3948 Da)，命名为preptin，并且preptin能使葡萄糖介导的小鼠bTC6-F7细胞分泌胰岛素增加，并且呈剂量依赖性，这种肽类与胰淀素、胰岛素一同由胰岛β细胞分泌，三者均参与血糖平衡的调节[7]。其分子结构对应着原胰岛素样生长因子Ⅱ(pro-IGF-Ⅱ)分子结构中69位到102位氨基酸相应的位置。preptin可能是原胰岛素样生长因子ⅡE区保守序列在翻译后水平蛋白加工过程中形成的非特异性的产物。其生理作用主要集中在糖代谢和骨质代谢，一般认为preptin对葡萄糖诱导的胰岛素分泌起到了生理性放大作用。Yang等[3]的研究证明2型糖尿病患者体内血清preptin高于对照组，preptin与TC、TG、舒张压(DBP)、HDL-C、游离脂肪酸(FFA)、糖化血红蛋白(HbA1C)、HOMA-IR正相关。国内也有类似报道[8]，preptin与FBG、HbA1c、HOME-IR、TG、FINS呈正相关性。

　　以上结果提示了血清preptin与胰岛素抵抗可能存在的相关性。而胰岛素抵抗也是PCOS重要的病理生理变化，50%～70%的PCOS患者表现出不同程度的胰岛素抵抗，增加了2型糖尿病、高血压、血脂障碍的代谢性疾病的风险[9]，所以血清preptin的升高可能会发生在PCOS患者中。土耳其学者Celik等[10]也发现PCOS患者血清preptin明显升高[(823.2 ± 140.7)pg/ml vs.(324.9 ± 147.3)pg/ml]。

　　本试验发现PCOS非胰岛素抵抗组血清preptin水平低于PCOS胰岛素抵抗组，但仍高于正常对照组，根据HOMA-IR提示的胰岛素抵抗可能与preptin的关系，PCOS患者在未出现胰岛素抵抗之前(HOMA-IR<2.69)，体内糖代谢可能也存在一定程度的紊乱，原因是早期由于对胰岛素的不敏感，胰岛素的分泌代偿性增加，同时与之共分泌的preptin也增加，此时胰岛素水平和糖耐量的变化很可能不会表现出异常(FBG、2 h BG、FINS与对照组差别不大)，但是血清preptin的水平与正常对照组相比也有一定程度的升高;随着机体对胰岛素不敏感的情况加重，才会由于preptin对葡萄糖诱导的胰岛素分泌的放大作用，胰岛素分泌进一步增强，促进形成高胰岛素血症，最终胰岛素抵抗形成。但目前preptin在病理状况下对胰岛素的放大作用未得到证实，需要进一步研究，例如对不同PCOS人群preptin分泌模式的研究，对preptin与胰岛素分泌过程中的存进作用的量化等。但是对于尚未表现出胰岛素抵抗症状的PCOS患者，监测并根据其血清preptin水平评估其发生胰岛素抵抗或高胰岛素血症风险具有一定意义。

　　【参考文献】

　　[1]　Azziz R，Marin C，Hoq L，et al.Health care-related conomic burden of the polycystic ovary syndrome during the reproductive life span.J Clin Endocrinol Metab,2005,90(8)：4650-4658.15944216

　　[2]　Ovalle F，Azziz R.Insulin resistance，polycystic ovary syndrome，and type 2 diabetes mellitus.Fertil Steril,2002,77(6)：1095-1105.12057712

　　[3]　Yang G，Li L，Chen W，et al.Circulating preptin levels in normal，impaired glucose tolerance，and type 2 diabetic subjects.Ann Med,2009,41(1)：52-56.18618352

　　[4]　Rotterdam ESHRE/ASRM-Sponsored PCOS Consensus Workshop Group.Revised 2003 consensus on diagnostic criteria and long-term health risks related to polycystic ovary syndrome.Fertil Steril,2004,81(1)：19-25.14711538

　　[5]　杨文英，杨兆军，李光伟，等.联合测量腰臀围比值(或腰围)和血压可预测代谢综合征.中华内分泌代谢杂志，2005,21(3)：227-229.

　　[6]　Tatemoto K， Efendic′ S， Mutt V， et al.Pancreastatin，a novel pancreatic peptide that inhibits insulin secretion.Nature,1986,324(6096)：476-478.3537810

　　[7]　Scheja L，Heese B，Zitzer H，et al.Acute-phase serum amyloid A as a marker of insulin resistance in mice.Exp Diabetes Res,2008,2008：230837.18584041

　　[8]　谢君辉，张木勋，李宇君，等.2型糖尿病患者血清preptin和胰岛素抵抗相关性研究.临床内科杂志，2009,26(3)：164-166.

　　[9]　Prelevic GM.Insulin resistance in polycystic ovary syndrome.Curr Opin Obstet Gynecol,1997,9(3)：193-201.9263704

　　[10]　Celik O，Celik N，Hascalik S，et al.An appraisal of serum preptin levels in PCOS.Fertil Steril,2011,95(1)：314-316.20883990