子宫内膜癌PTEN蛋白表达及其临床意义

　　作者：刘云春 王志军 (1.河北北方学院附属第一医院妇产科，河北 张家口 075000;　2.河北北方学院法医系2002级本科1班,河北 张家口 075000)

　　【摘要】 目的:探讨抑癌基因第10染色体同源丢失性磷酸酶―张力蛋白基因(PTEN)蛋白表达与子宫内膜癌的发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测PTEN蛋白在56例子宫内膜癌及30例正常子宫内膜组织的表达。结果:56例子宫内膜癌中PTEN蛋白表达缺失率为571%,明显高于正常子宫内膜中的完全表达(P<005)。PTEN蛋白在低分化组的表达缺失率明显高于中高分化组(P<0 05)。结论:抑癌基因PTEN蛋白表达缺失在子宫内膜癌的发生、发展、浸润等过程中有一定作用。

　　【关键词】 PTEN基因;子宫内膜癌;免疫组化

　　Expression of PTEN Protein in Endometrial Carcinoma and its Clinical Significance

　　LIU Yunchun, WANG Zhijun

　　Department of Obstetrics and Gynecology, The First Affiliated Hospital，

　　Hebei North University,Zhangjiakou,075000,Hebei，China

　　【ABSTRACT】 Objecctive: To investigate the expression of PTEN protein in endometrial carcinoma and its relationship with clinical feature. Methods: To test the expressions of PTEN protein of 56 cases with endometrial carcinoma and 30 nomal women by immunohistochemistry. Results: The positive expression rates of PTEN were 429% in endometrial carcinoma and 100% in normal edometriun(P<005). Conclusion: PTEN gene participates in the origination and development of endometrial carcinoma.

　　【KEY WORDS】 Endometrial carcinoma; PTEN; Immunohistochemistry

　　第10染色体同源丢失性磷酸酶―张力蛋白基因(PTEN)是1997年发现的一种肿瘤抑制基因,在许多肿瘤中出现表达缺失或突变。为研究PTEN与子宫内膜癌发病之间的关系,我们采用免疫组化SP法检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其与子宫内膜癌发生、发展、治疗及预后的相关性。

　　1 资料与方法

　　11 一般资料 河北北方学院附属第一医院20038~20055月收治的资料完整的子宫内膜癌患者56例及正常子宫内膜30例和非典型增生子宫内膜32例。年龄 39~70岁，平均50岁。按照子宫内膜癌的手术病理学分期(FIGO,1998)其中Ⅰ期30例，Ⅱ期16例，Ⅲ期10例。病理分级中G128例;G220例;G38例。肌层浸润≤1/2者43例，淋巴转移19例。患者术前均未行放疗、化疗和激素治疗。

　　12 方法 采用免疫组化链霉素抗生素蛋白―过氧化物酶(SP)法检测PTEN蛋白的表达，PTEN基因多克隆抗体和SP试剂盒均购于福州迈新生物技术公司,操作按SP试剂盒要求进行,步骤如下:所有组织蜡块5μm连续切片,65℃烘烤、脱蜡,3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶15min,高压加热修复抗原,10%的正常血清封闭，依次滴加一抗(PTEN羊多抗)、二抗、链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶液,DAB显色10min,苏木素复染,脱水,透明。中性树胶封片,显微镜下观察:阳性对照为已知阳性的子宫内膜癌，用PBS液取代一抗做阴性对照。

　　13 结果判定 PTEN蛋白定位于细胞胞浆,呈棕黄色颗粒,细胞核和细胞膜均不着色。在高倍镜下计数1000个细胞,计算阳性细胞所占的百分比(<15%为-,15%～50%为+,>50%为++)。

　　14 统计学处理 采用SPSS100软件包进行χ2检验及Fishers精确检验(P<005为有统计学意义)。

　　2 结果

　　21 PTEN在子宫内膜癌中的表达PTEN在正常子宫内膜中表达无缺失,子宫内膜癌中表达缺失为571%,见表1。

　　22 PTEN在子宫内膜癌中的表达及临床病理特征PTEN在子宫内膜癌中的表达缺失与临床分期和病理分级有关，Ⅰ/Ⅱ期的表达缺失率明显高于PTENⅢ期(P<005 );与肌层浸润、淋巴转移无关(P>005)，见表2表1 PTEN在子宫内膜癌中的表达表2 PTEN在子宫内膜癌中的表达及临床病理特征(略)

　　3 讨论

　　31 PTEN基因的结构及功能 PTEN蛋白定位于胞浆,由403个氨基酸组成,分子量为47122U,主要结构功能区位于N端,含有一个蛋白酪氨酸磷酸酶催化区,与一个较长的张力蛋白和辅助蛋白的同源区。目前认为,该基因是一抑癌基因,其作用主要表现在以下几个方面:调控细胞周期,诱导细胞凋亡,调节细胞迁移、浸润、整合素介导的细胞铺展及局部粘附的形成等。PTEN的功能异常主要通过基因突变、基因同源性丢失、启动子甲基化、表达缺失等方式发生。其基因变化中,以突变最为常见,主要为体细胞突变。另外,mRNA以及蛋白表达的异常也是失活的重要方式。

　　32 PTEN表达与子宫内膜癌的关系 迄今为止,PTEN基因与子宫内膜癌的确切关系尚未完全明了,该基因在子宫内膜癌中的突变率为33%～55%[1],是目前发现的子宫内膜癌中突变率最高的基因,而且子宫内膜癌也是迄今发现的PTEN基因突变率最高的肿瘤。PTEN蛋白表达的缺失,是多种机制引起PTEN基因功能丧失的表现,包括PTEN基因同源性丢失,无义突变和启动子甲基化等[2]。Geroge等[3]在对子宫内膜癌、癌前病变及正常子宫内膜的PTEN蛋白表达的研究中发现,61%的子宫内膜癌无PTEN蛋白表达,75%癌前病变亦无PTEN蛋白表达,而正常子宫内膜仅5%缺乏PTEN的表达。作者认为PTEN蛋白表达的缺失可能是子宫内膜癌发生中的一早期事件,这一结果将为癌前病变的研究提供重要信息。本研究结果显示在AHE和CE中表达缺失分别为281%和571%,而在NE中完全表达，提示抑癌基因PTEN参与了肿瘤发生发展过程是子宫内膜癌发生的早期事件。PTEN 在Ⅰ/Ⅱ期组明显高于Ⅲ期组，低分化组明显高于中高分化组，提示可能与预后不良有关。综上所述，抑癌基因PTEN蛋白表达缺失在子宫内膜癌的发生、发展、浸润等过程中可能有一定作用。

　　参考文献

　　1 Gao QL,Ye F,Li J,et al.PTEN coding product：marker for tumorigenesis and progression of endometrial carcinoma [J].Aizheng,2003,22(6):640644

　　2 Mcnamia ME,Soung P,Perera S,et al. Loss of PTEN express paraffine mbedde primary prostate cancer correlates with high Geason Score and advanced stage[J]. Cancer Res,1999,59:4291

　　3 George LM, Ming CL,Jeffrey TE,et al.Altered PTEN expression as a diagnostic marker for the earlist endometrial precancers[J].J National Cancer Insitute,2000,92(11):924