前列腺素类物质在子宫腺肌病中的相关性研究

　　作者：于春丽 段承志 作者单位：泰山医学院附属泰安医院妇科，山东 泰安 271000

　　【摘要】 目的 研究6-酮-前列腺素F1α(6-k-PGF1α)和血栓素B2(TXB2)与子宫腺肌病的发生及不同临床病理特征的关系。方法 采用放射免疫法检测子宫腺肌病病灶及其在位内膜和对照组组织液中6-k-PGF1α和TXB2的含量。结果 子宫腺肌病组6-k-PGF1α的含量高于对照组，差别有显著意义(p<0.05);TXB2含量两组差别无统计学意义(P>0.05);经量增多组6-keto-PGF1α含量高于经量未变组(p<0.05)， TXB2水平两组无显著差别;腺肌病在位内膜6-Keto-PGF1α和TXB2含量高于对照组，差别均有统计学意义(P<0.05)。结论 6-Keto-PGF1与腺肌病的疼痛、经量增多等症状有关;TXB2与这些症状无相关性;在位内膜中6-Keto-PGF1α和TXB2水平的增高可能与腺肌病的发生有关。

　　【关键词】 TXB2 6-keto-PGF1ɑ 子宫腺肌病 放射免疫分析

　　The study of relationship between adennomyosis and the level of 6-keto-PGF1α and TXB2

　　YU Chun-li, DUAN Cheng-zhi

　　(Dept. of Obstetrics and Gynecology,Tai’an Central Hospital ,Tai’an,271000)

　　Abstract：Objective: To explore the relationship between the level of 6-keto-PGF1α and TXB2 and the clinical pathological abnormalities of adennomyosis. Methods: The concentration of TXB2 and 6-keto-PGF1αof eutopic and ectopic endometrium in adennomyosis and the control group were measured in radioimmunoassay. Results: The level of 6-keto-PGF1αin supernatant of adennomyosis was significant higher than those in control group (p<0.05); No significant difference of TXB2 level was found between the two groups(p>0.05); Unlike TXB2, the 6-keto-PGF1αlevel in patient with symptoms was significant higher than those in one without symptoms (p<0.05), The TXB2 and 6-keto-PGF1αconcentrations in supernatant of eutopic endometrium in adennomyosis were pronounced higher than those of control group (p<0.05). Conclusions: The significant higher 6-keto-PGF1αlevel in supernatantthe had correlation with symptoms of adenomyosis, such as menorrhalgia and menorrhea; the pronounced higher level of 6-k-PGFF1α and TXB2 in eutopic endometrium may play an important role in occurrence of adennomyosis.

　　Key words：6-keto-PGF1α;TXB2;adennomyosis;radioimmunoassay

　　前列腺素类物质(prostglandin,PGs)是重要的炎性介质和致痛物，与炎症、免疫、过敏等重要病理过程有关。以往研究证实了PGs与原发性痛经的相关性，因此推论PGs可能与子宫腺肌病相关。本研究采用放射免疫法检测子宫腺肌病(简称腺肌病)病灶及其在位内膜中的TXB2和6-keto-PGF1x水平，旨在研究其与子宫腺肌病不同临床病理特征的关系，探讨TXB2和6-keto-PGF11x在子宫腺肌病发病机制及其发生发展过程中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 临床资料 选择2003年2月～2004年11月在泰安市中心医院手术治疗并经病理证实的子宫腺肌病患者50例，其中增殖期28例，分泌期22例;均行经腹全子宫或次全子宫切除术。患者年龄32～51岁，平均年龄为43.1岁;参照文献依疼痛程度不同分为三级，Ⅰ级17例，Ⅱ级20例，Ⅲ级9例;无疼痛症状者记作0级4人。初潮年龄：12～19岁，平均年龄：15.54岁;既往月经周期：21～45天，平均天数：29.35天;既往月经期： 2～7.5天， 平均天数：5.07天。根据患者月经量改变分为月经量增多和未变两组，月经量增多者36例，月经量未变者14例。

　　对照组选择无月经改变、病理证实为正常子宫内膜的子宫肌瘤患者30例，年龄39～53岁，平均年龄为44.5岁;其中增殖期17例，分泌期13例。两组患者除年龄分布不同，月经周期、月经期及初潮年龄差别均无显著性。所有患者术前6个月内未服激素，三个月内未放置宫内节育器。

　　1.2 标本选择 子宫腺肌病标本取肌层病灶和在位内膜各两块;对照组取正常肌层和在位内膜组织各两块。手术中无菌取材，生理盐水冲洗后放入-80℃低温冰箱中保存备用。

　　1.3 方法

　　1.3.1 试剂 TXB2和6-keto-PGF1ɑ放射免疫测定药盒购自解放军总医院科技开发中心放免研究所。

　　1.3.2 步骤 取出冷冻的标本称取40mg左右，剪碎、研磨、制成组织液，离心后按照放免药盒说明进行TXB2和6-keto-PGF1ɑ的测定。

　　1.3.2.1 TXB2测定(平衡法) ①组织液4℃离心(3500rpm,15min)取上清液;②将试管编号，向标准管及样品管中分别加入200μl标准液和样品液;③所有试管中加入100μl抗血清和100μl125I- TXB2，混匀后放入4℃冰箱内静置24小时;④加入PR试剂500μl，混匀，室温下放置15min;⑤4℃离心3500rpm 20 min;⑥任取两管作为T管测其cpm数;⑦吸出上清液，放入放射免疫r计数器中测量各管中放射性沉淀cpm数。

　　1.3.2.2 6-keto-PGF1ɑ测定(非平衡法) ①组织液4℃离心，(3500rpm 20min)取上清液;②将试管编号向标准管和样品管中分别加200μl标准液和样品液;③加入100μl抗血清(非特异管除外)混匀后放37℃水浴箱中温浴5h;④加125I- 6-keto-PGF1ɑ100μl混匀后放入4℃冰箱24h，余步骤同TXB2测定。

　　结果计算 ①以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，由r计数器预先编制程序并绘制标准曲线，绘出样品浓度值。②得出样品浓度后，根据组织的重量，计算样品实际含量。实际含量=实测样品浓度X稀释倍数/样品湿重

　　1.3.3 结果判断标准

　　试剂盒主要技术指标 ①TXB2：NSB〈5g;灵敏度〈12.5pg/ml;标准曲线范围12.5～800pg/ml;.批内变异系数〈3.5%，批间变异系数〈10%。②6-keto-PGF1ɑ：NSB<5%;.灵敏度〈25pg/ml;.标准曲线范围25～1600pg/ml;.批内变异系数〈3.5%，批间变异系数〈10%。

　　TXB2和6-keto-PGF1ɑ有血浆参考值,组织液含量的参考值未见文献记载。

　　1.4 统计学处理 应用SPSS11.0统计学软件进行数据处理,TXB2和6-keto-PGF1α含量的比较采用t检验。

　　2 结果

　　2.1 子宫腺肌病病灶的放免测定结果

　　见表1。子宫腺肌病病灶中6-Keto-PGF1α含量与无临床症状子宫肌瘤患者的正常子宫肌层相比，差别有统计学意义(P<0.001)，即腺肌病病灶中6-Keto-PGF1α水平高于正常子宫肌层。TXB2含量与无临床症状子宫肌瘤患者的正常子宫肌层相比，差别无统计学意义(P>0.05)，即子宫腺肌病病灶中TXB2水平和正常子宫肌层相比，无显著差别。

　　2.2 腺肌病中6-keto-PGF1α和TXB2含量与月经量的关系

　　如表2所示，经量增多组6-keto-PGF1α含量与经量未变组相比，差别有统计学意义(P<0.05)，即经量增多组6-keto-PGF1α含量高于经量未变组。经量增多组TXB2含量与经量未变组相比，差别无统计学意义(P>0.05)， 即两者无显著差别。

　　表1 腺肌病组与对照组中6-keto-PGF1α和TXB2含量的比较(略)

　　表2 经量增多组与未变组6-keto-PGF1α和TXB2含量的比较(略)

　　表3 腺肌病在位内膜和对照组中6-keto-PGF1α和TXB2含量的比较(略)

　　2.3 子宫腺肌病在位内膜的放免测定结果

　　由表3所示，腺肌病组的内膜组织中6-Keto-PGF1α和TXB2含量与对照组正常子宫内膜相比，差别均有统计学意义(P<0.05)，即子宫腺肌病的内膜组织中6-Keto-PGF1α和TXB2含量显著高于正常子宫内膜。

　　3 讨论

　　子宫腺肌病是严重影响妇女身体和生殖健康的常见病和多发病，近年来发病率明显增高。病人年轻化,保守治疗效果不理想，对渴望生育的妇女临床治疗非常棘手。其确切发病机制尚不十分清楚。

　　许多证据提示PGs在痛经发病中起重要作用：①PGF2α引产引起的下腹痉挛性疼痛等症状与痛经的临床表现相似;②分泌期内膜PGs含量多于增殖期，而原发性痛经仅发生于排卵性月经;③PGs释放量以经期第1～2天最多，痛经亦以这段时间最重[1];④PGs合成酶抑制剂可有效缓解疼痛症状。因此推断PGs可能与腺肌病有关。

　　细胞膜的磷脂在磷脂酶的作用下水解出花生四烯酸(AA)，在环氧化酶(COX)的作用下，AA可转变为PGs而发挥多种生物学作用。PGs分为9型，分别命名为PGA、B、C、D、E、F、G、H及I，均为二十碳多不饱和脂肪酸的衍生物，人体内PGA，E及F较多。PG合成后不能在细胞内贮存，迅速释放作用于邻近组织，完成作用后又被迅速灭活。通常每种细胞主要产生一种PGs,PGs几乎参与了所有细胞代谢活动。PGs的生物合成分为三步：①磷脂酶A2被活化，水解磷脂释放AA;②被释出的AA经不同氧化酶催化产生不同产物;③PGH2是PGs的前体，可被不同的合成酶作用，转化成具有不同生物活性的终末产物[4]。

　　PGs具有促进胃肠粘膜损伤修复，维持肾脏血流，参与排卵、妊娠、分娩等生理作用，还可作为分化和生长因子发挥类似免疫抑制剂及血管合成药物的作用，促进肿瘤细胞增殖和血管形成。在非妊娠子宫，子宫内膜主要合成PGE2、PGF2α以及PGI2和TXA2，人子宫内膜PGS分泌呈周期性变化。子宫肌层主要合成PGI2[2]。

　　在正常状态下血浆或组织中TXA2和PGI2平衡失调是造成血小板聚集，血管痉挛收缩或血栓形成的原因之一。子宫腺肌病患者疼痛等症状可能与其血浆、腹腔液或局部出血灶中TXA2和PGI2含量异常有关。由于TXA2和PGI2的不稳定性，目前还难以直接测定，所以国内外均以测定TXB2和6-keto-PGF1ɑ为判断其浓度的指标。

　　本研究对50例子宫腺肌病(病灶及其在位内膜)和30例无月经改变、病理证实为正常子宫内膜的子宫肌瘤应用放射免疫法检测其组织液中TXB2和6-keto-PGF1ɑ水平，结果发现，腺肌病病灶中6-Keto-PGF1α水平高于正常子宫肌层，而TXB2含量与正常子宫肌层相比无显著差别;经量增多组6-keto-PGF1α含量高于经量未变组， TXB2水平两组无显著差别;子宫腺肌病的内膜组织中6-Keto-PGF1α和TXB2含量显著正常子宫内膜。提示6-Keto-PGF1与腺肌病的疼痛、经量增多等症状相关;TXB2与腺肌病的疼痛、经量增多等症状无相关性;在位内膜中6-Keto-PGF1α和TXB2水平的增高可能与腺肌病的发生有关。

　　PGs可刺激异位内膜的基质细胞产生甾体类激素，使局部组织雌激素含量升高[3]。PGs引起疼痛的可能原因包括①增强或延长了致痛物质对感觉神经的致痛作用[7];②引起子宫异常收缩和血管舒缩功能紊乱，致子宫缺血缺氧痉挛而引起疼痛[5]。PGs还与不孕有关：①局部PGs过高或比例失调可引起输卵管节律性运动失调，影响拾卵、受精及孕卵的输送[6];②抑制排卵、溶解黄体，致黄体功能不全或LUFS综合征;③引起子宫的舒缩功能异常，影响孕卵着床[8]。

　　目前PGs的研究着重于腹腔液和血液中PGs含量的变化，组织液中PGs的研究鲜有报导。作者认为，由于异位内膜产物多积聚于致密的组织间隙内，其局部血液循环不良，测定组织液中PGs含量能较为客观的反映病情。本研究检测腺肌病病灶及其在位内膜组织液中的TXB2和6-keto-PGF1ɑ水平，揭示了TXB2和6-keto-PGF1ɑ在子宫腺肌病发病机制中的作用及其与腺肌病不同临床病理特征的关系。

　　腺肌病发病率逐年增高而发病机制尚不清楚，至今无有效的预防措施。非甾体类抗炎药(NSAIDs)对中度和部分重度腺肌病痛经的治疗经临床证明是有效的。通过抑制COX、减少PGs产生而缓解痛经的同时，能否抑制腺肌病的进展尚需进一步研究论证。

　　【参考文献】

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　　[8] Soslow R, Dannenberg A, Rush D, et al. COX-2 is expressed in human pulmonary, colonic, and mammary tumors[J]. Cancer, 2000,89:2637-2645