肺血栓栓塞症患者P选择素和组织因子的表达及相关性

　　作者：张鹏,艾力曼·马合木提,霍亚凤　　作者单位：新疆医科大学第一附属医院心内科，新疆 乌鲁木齐

　　【摘要】目的：探讨肺血栓栓塞(pulmonary thromboembolism PTE)患者血清P选择素(P-selectin)和组织因子(tissue factor TF)表达的测定及相关性比较，探讨两者在肺静脉血栓栓塞症中的作用和意义。方法：测定PTE患者158例(病例组)和正常对照者142例(对照组)，采用酶联免疫法(ELISA)测定2组空腹血清P-选择素和组织因子并进行比较;同时检测空腹血糖、血脂、血常规、纤维蛋白原、D-二聚体等指标，并进行相关分析。结果：与对照组相比，PTE组P-选择素、组织因子表达水平较对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。大面积和次大面积PTE患者P选择素和TF表达水平明显高于非大面积患者(P<0.05)。PTE组P选择素与白细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原、空腹血糖和HDL-C有相关性(P<0.05)，与年龄、中性粒细胞、D-二聚体、胆固醇(TC)和甘油三脂(TG)不相关(P>0.05);TF与白细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原、空腹血糖、TC和HDL-C有相关性(P<0.05)，与年龄、中性粒细胞、D-二聚体、TG无相关性(P>0.05)，P选择素与TF也密切相关(P<0.05)。结论：PTE患者P选择素和TF水平明显升高，两者与PTE的病情密切相关，两者共同参与了VTE病程中炎症反应和血栓形成的过程。

　　【关键词】 肺栓塞,P-选择素,组织因子

　　Abstract：Objective：To explore the roles and significance of P-selectin and tissue( TF )in the patients with pulmonary thromboembolism(PTE).Methods：158 patients with PTE and 142 healthy were selected.Fasting Serum P-selectin and serum TF were measured with enzyme immunoassay(ELISA) and were compared between the two groups.Meantime，fasting blood sugar，blood lipid， fibrinogen， D-dimer and blood routine examination were measured and correlation was analysed.Results：The levels of P-selectin and TF were significantly higher in the group of PTE than in the normal control group(P<0.01).As compared with non-mussive PTE，there was a significant increase in the mussive and submassive PTE.P-selectin level was positively correlated with white blood cell count，platelet count， fibrinogen， fasting sugar，high density lipoprotein(HDL-C)(P<0.05)， and was not correlated with age， neutrophil leucocyte， D-dimer， total cholesterol(TC) and triglyceride(TG).TF level was positively correlated with white blood cell count，platelet count， fibrinogen， fasting sugar，TC and HDL-C(P<0.05)， was not correlated with age， neutrophil leucocyte， D-dimer， TG.P-selectin level was positively correlated with TF level，too.Conclusion：P-selectin level and TF level are elevated significantly in PTE patients.They are positively correlated with PTE disease process .They may take part in the process of inflammatory reaction and formation of venous thrombus in PTE patients.

　　Key words：pulmonary thromboembolism(PTE);P-selectin; tissue factor(TF)

　　肺血栓栓塞症(pulmonary thromboembolism， PTE)是指血栓栓子堵塞肺动脉主干和其分支所引起的以肺循环障碍为主要表现的临床病理综合征。肺栓塞的症状多，且缺乏特异性，误诊率高[1]。因此，探讨PTE的病理生理意义重大，可能为PTE的防治提供新的思路和途径。本文旨在通过P选择素和TF在PTE中的表达的测定和相关性分析，以探讨两者在PTE中的作用和意义。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料

　　选择新疆医科大学第一附属医院呼吸科、心内科等科室2009年3月—2010年3月住院的PTE患者158例，男73例，女85例，年龄(56.02±15.97岁)，符合PTE诊断标准，并经CT或肺动脉造影证实。PTE的临床症状以呼吸困难、气促最常见，其他症状为胸痛、咳嗽、发热、心悸、咯血[2]。按照中华医学会呼吸学分会《肺血栓栓塞症的诊断和治疗指南(草案)》中制定的分型标准，将PTE患者分为大面积、次大面积PTE(A组)、非大面积(不含次大面积)PTE(B组)[2]。同期新疆医科大学第一附属医院体检中心健康志愿者142例作为正常对照组，男82例，女60例，年龄(48.39±14.42岁)，均系无心、肝、脑、肾和感染性疾病和糖尿病的健康成年人。研究方案经医学伦理会批准，并经受试者知情同意。两组年龄、性别、体重指数，均有可比性。

　　1.2　标本采集与制备

　　于清晨空腹抽取静脉血3ml，置入未加抗凝剂的清洁生化管中，以3000 r/min离心10min分离血清，分别按一次用量分装，置-80℃冰箱保存。

　　1.3　检测方法

　　用ELISA法检测血清P选择素、TF的水平，用ELISA法于Ultra-Mark型酶联仪(Bio-Rad公司)检测，ELISA试剂盒由美国GBD公司提供，方法均按照试剂盒操作步骤进行。

　　1.4　统计学方法

　　采用SPSS17.0统计软件，各组数据用均数±标准差(x-±s)表示，两组间比较用t检验，相关性分析采用Spearman秩相关分析， 所有统计学处理均由SPSS 17.0软件包完成，检验水准α=0.05，P<0.05为差异有显著性。

　　2　结　果

　　2.1　两组P选择素和组织因子比较 PTE组P选择素和组织因子水平较对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。表1　PTE组与对照组血清P选择素与组织因子比较

　　2.2　PTE不同病变程度患者P选择素和组织因子比较 大面积和次大面积PTE组较非大面积PTE组P选择素和TF明显升高(P<0.05)。表2　PTE不同病变程度患者P选择素和组织因子比较

　　2.3　PTE组P选择素和组织因子与各危险因素相关性分析

　　PTE组P选择素与白细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原、空腹血糖、HDL-C有相关性(P<0.05)，与年龄、中性粒细胞、D-二聚体、胆固醇(TC)和甘油三脂(TG)不相关(P>0.05);TF与白细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原空腹血糖、TC、HDL-C有相关性(P<0.05)，与年龄、中性粒细胞、D-二聚体、TG无相关性(P>0.05)，P选择素与TF也密切相关( r= 0.244， P=0.032)。表3　PTE组P选择素和组织因子与各危险因素相关性分析

　　3　讨　论

　　P选择素是粘附分子选择素的重要成员，主要分布于胞内贮存颗粒即血小板的α颗粒及内皮细胞的Weibel-Palade小体，它主要表达在活化的血小板/内皮细胞表面，通过介导细胞初始黏附启动参与血栓形成及炎症反应过程[3]，它与机体免疫防御功能及多种疾病密切相关。组织因子(tissue factor，TF)，又称凝血因子Ⅲ，是一种跨膜糖蛋白，为凝血因子Ⅶ/Ⅶa在细胞表面的受体和和辅因子，是外源性凝血的始动因子[4]。因此，本研究选取了P选择素、TF作为指标来研究PTE患者静脉血栓形成和炎症反应情况。

　　本研究显示，PTE组P选择素和TF表达水平明显高于对照组，P选择素和TF与PTE的发病密切相关。P选择素在PTE这种疾病中表达上调，这对PTE的发生和发展尤为重要。Kyrle PA等[5]人对544例无明显诱因发生PTE患者随访，PTE复发患者P选择素浓度明显高于无复发患者(P=0.006)，是未发生血栓的患者的17倍。可以认为P选择素是静脉血栓栓塞症的一个危险因素。Sullivan[6]等进行基因敲除的方法进行实验研究，结果表明，缺乏E-选择素、P选择素或白介素10均可导致静脉血栓中纤维蛋白减少，支持其在纤维蛋白形成、血栓形成中的作用。同时，Wang等[7]人实验显示P选择素缺陷大鼠的白细胞黏附功能出现障碍，说明P选择素可介导白细胞在内皮细胞表面黏附、活化并释放炎性递质参与炎症过程。因此检测P选择素对PTE时炎症反应的监测也有一定的临床意义。TF是凝血机制的天然启动因子，它在凝血系统中的作用目前主要认为[8]：当TF与F相结合后，便可变构激活F 形成TF-Fa复合物，进而启动内外两条凝血途径。另外，Falati[9]等采用共聚焦光试验显微镜实时监测小鼠微循环中血栓形成过程，发现TF不仅参与血栓形成始动过程，还参与血栓的不断增大以及血栓形成的整个过程，即循环中的TF不断覆盖在血栓表面，反复启动凝血，使血栓不断增大。

　　本研究表明，大面积和次大面积PTE患者P选择素和TF水平较非大面积PTE患者明显增高(P<0.05)，表明随着病变程度的加重，PTE和TF水平也逐渐增高。说明P选择素和TF对于PTE的病情评估有一定意义，对于PTE的早期诊断和病情判断提供了有力依据和指标。另外，P选择素和TF也可作为新靶点干预血小板/内皮细胞和白细胞相互作用得以抗栓治疗。有研究显示[10,3]，iloprost和GPⅡb / Ⅲa受体拮抗剂abciximab可抑制TF的表达，抗P-选择素抗体可抑制和干预P选择素/PSGL-1的相互作用，进而明显降低静脉血栓形成风险和改善PTE的预后。

　　我们对各因素进行分析发现，P选择素、TF与白细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原、HDL-C、空腹血糖明显相关，这可能是炎症和HDL-C等因素通过血小板上的特殊受体，使血小板活化，而血小板作为一个炎性细胞，被激活后可释放大量的细胞因子，在血栓和炎症中发挥重要的作用，其中包括有P选择素、TF等因子;血糖的增高可通过阿司匹林抵抗途径刺激血栓素形成，激活血小板，导致血栓形成[11];纤维蛋白原明显增高标志着血液转向高凝状态。TF与TC亦相关，可能为脂质代谢紊乱通过影响血管内皮及凝血-纤溶系统，血小板活化，TF水平增高。P选择素与TF明显相关(r=0.244，P=0.032)，可以认为P选择素与TF相互作用与影响，共同参与了VTE病程中炎症反应与血栓形成的过程。有研究表明[12]，P选择素在静脉起始阶段内皮细胞激活后，移位至内皮细胞表面，通过与微泡中的PSGL-1受体作用可使组织因子表达增加，介导内源性凝血过程的启动。这也阐明了P选择素和TF之间存在的密切联系。

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