保元汤对婴幼儿室间隔缺损修补术后细胞免疫及肺感染的影响

　　作者：王欣1,高戈2,胡建国1　　作者单位：1.中南大学湘雅二医院心胸外科; 2.中南大学医学检验系(湖南 长沙)

　　【摘要】 目的：探讨保元汤婴幼儿室间隔缺损修补术后调节细胞免疫的能力及防治肺感染的作用。方法：将85例婴幼儿室间隔缺损患儿随机分为两组，对照组42例，按常规手术和术后处理，治疗组43例，在常规手术和术后处理的同时，手术前7 d起口服纯中药保元汤煎剂，所有患儿于手术前8 d及术后3 d取静脉血10 mL(肝素抗凝)分别做T淋巴细胞集落培养和流式细胞仪T淋巴细胞亚群测定，同时观察术后发生肺感染情况。结果：(1)对照组18患儿发生肺感染，其中支气管炎10例，肺炎6例，呼吸衰竭2例，治疗组9例患儿发生肺感染，其中支气管炎7例，肺炎2例，其构成比有高度显著差异(P<0.01);(2)术后对照组患儿的TL-CFU降低，前后值为186.5 VS 165.4，治疗组患儿的TL-CFU明显升高，前后值为198.9 VS 276.8;术后治疗组较对照组升高明显(P<0.001);(3)对照组患儿术后的CD4+/CD8+比值高化不大，其值分别为1.32 VS 1.31。(4)治疗组患儿CD4+/CD8+比值上升，其值分别为1.31 VS 1.71，治疗组患儿的CD4+/CD8+，治疗组升高较对照组明显(P<0.05)。结论：保元汤煎剂口服可有效提高患儿外因血TL-CFU和CD4+/CD8+比值，增强其细胞免疫功能，可有效减少肺感染的发生率和减轻病情的严重程度。

　　【关键词】 保元汤;室间隔缺损;细胞免疫功能;肺部感染;婴幼儿

　　[ABSTRACT] Objective： To discuss the effect of Baoyuan decoction on cellular immune function after mending surgery for ventricular septal defect of infants and preventive effect on pulmonary infection. Methods：A total of 85 infants with ventricular septal defect into two groups randomly. Forty-two infants in control group were treated by conventional treatment， and 43 infants in treatment group were treated with Baoyuan decoction 7 days before surgery. 10 mL venous blood was extracted on 8 days before surgery and 3 day after surgery. T lymphocytes colony was cultured， and T lymphocytes subsets was detected by flow cytometry. Besides， incidence of pulmonary infection was observed after operation.Result：In control group， 18 infants had pulmonary infection， including 10 bronchitis， 6 pneumonia， 2 respiratory failure. In treatment group， 9 infants had pulmonary infection， including 7 bronchitis， 2 pneumonia. There was significant difference in constituent ratio (P<0.01). In control group， TL-CFU was decreased after treatment (186.5 vs. 165.4). In treatment group， value of TL-CFU was increased (198.9 vs. 276.8). The level of TL-CFU was significantly higher in treatment group after treatment (P<0.001). In control group， CD+4/CD+8 was elevated (1.32 vs. 1.31). While in treatment group， the change of CD+4/CD+8 was significant (1.31 vs. 1.71). The change was more significant(P<0.05).Conclusion Baoyuan decoction can increase the level of TL-CFU and CD+4/CD+8 effectively， and improve the cellular immune function. Also it can reduce the incidence of pulmonary infection and alleviate patient's condition.

　　[KEY WORDS] Baoyuan decoction; Ventricular septal defect; Infants; Immune function; Pulmonary infection

　　婴幼儿处于生长发育阶段，各脏器功能尚未发育完善，特别是机体免疫功能在3岁以前更是不足。若患先天性室间隔缺损(congenital Ventricular Septal defect， cVSD)，血液左向右分流，加重心肺功能负荷，常常引起全身发育迟缓，抵抗力较同龄儿童低下。当患儿需要在体外循环(cardiopulmonary by pass， CPB)条件下心内直视手术时，由于手术创伤、血流与CPB管道接触以及缺血再灌注损伤等，可引发复杂的全身炎症反应(systemic inflammatory responsesyndrome， SIRS)[1]和合并肺部感染，处理不适当致患儿死亡。研其原因，患儿免疫功能低下，解剖异常致血流动力学改变以及炎性细胞和炎性细胞因子起着至关重要的作用。

　　保元汤出自明代魏植岩《博爱心鉴》，也有认为出自《景岳全书》，由人参、黄芪、甘草、肉桂四味药物组成，是一温阳健脾的补益方剂[2]。现代医学研究显示该方具有较好的免疫调控作用，可以提高免疫功能[3]，促进造血干细胞增值等功效。该方在临床中除内科广泛用于心、肾、肝、血液等疾病外，保元汤合桃红四物汤可以治疗胸痹心痛等 [4]。据此，本文观察了保元汤对防治婴幼儿室间隔缺损修补术后的肺部感染的作用以及对细胞免疫功能的影响。

　　1　资料与方法

　　1.1　研究对象

　　2007年2月～2009年6月85例患儿，经详细病史询问、体查，心电图、胸片、心脏超声与心动图诊断为先天性心脏病，室间隔缺损，年龄均小于3岁，准备做手术修补的患儿作为实验对象，排除先天性免疫缺陷者，肺发育不良、胃肠畸形、肾功能不全、血液系统疾病者。

　　1.2　方法

　　1.2.1　保元汤组成

　　党参10 g，黄芪15 g，肉桂3 g，甘草3 g，每日1剂，水煎分2次服，自术前7 d开始服用。

　　1.2.2　血清标本采集　分别于手前7 d及术后3 d抽取静脉血10 mL(肝素抗凝)，分别做T淋巴细胞集落培养和淋巴细胞亚群测定。

　　1.2.3　外周血T淋巴细胞集落测定

　　参照Lowenbery方法稍做修改后的一步单层琼脂法：简单地说，将5×105单个核细胞接种于含10%灭活小牛血清，0.5%琼脂，20%植物血凝素(PHA)白细胞条件培养液(PHA-LCM)使总体积为1 mL，放入饱和湿度37 ℃、5%CO2培养箱中，5 d后在倒置显微镜下集落计数。大于40个细胞为1个集落，同时用抗CD+3、抗CD+4，抗CD+8单克隆抗体鉴定。

　　1.2.4　T淋巴细胞亚群测定

　　将血样收集于含EDTA的无菌采血管，采用梯度密度离心法，使用Ficoll淋巴细胞分离液(Sigma公司)分离获得外周血单个核细胞，加入F1TC-CD+3、PE-CD+4及PECY5-CD+8单克隆抗体，按试剂盒说明书操作后，使用美国BD公司产生的流式细胞仪检测CD+3、CD+4、CD+8表达率(%)。

　　1.3　统计学处理

　　采用SPSS15.0统计分析软件进行数据处理，计量资料以均数+标准系(x-±s)表示，组间比较采用方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结果

　　2.1　术后感染

　　对照组术后发生支气管炎10例(21.8%)、肺炎6例(14.3%)、呼吸衰竭2例(4.7%);治疗组术后发生支气管炎7例(16.3%)、肺炎2例(4.6%)、呼吸衰竭0例。两组患儿术后肺部感染发生构成比差异有统计学意义(P<0.01)。

　　2.2　T淋巴细胞集落数

　　两组患儿外周血增殖后T淋巴细胞集落数治疗组患儿治疗后较治疗前明显上升，也明显高于对照组患儿，差异有统计学意义(均P<0.01)，见表1。表1 　两组外周血T淋巴细胞集落数

　　2.3 两组患儿外周血T细胞亚群计数显示治疗组患儿CD+4/CD+8的比值治疗后有显著提高，较对组照患儿上升明显，差别有显著性，P<0.05，见表2。表2　两组外周血T淋巴细胞亚群计数

　　3　讨论

　　感染的发生源自病原微生物和宿主共同作用的结果。良好的宿主免疫应答是防止和限制感染最重要的条件。任何先天性和获得性因素所致儿童免疫功能低下时，最常见的表现就是容易发生感染。感染的特点包括对条件致病菌易感，感染程度重，容易发生全身扩散。由于婴幼儿先天性心脏病患者机体的免疫应答功能低下，感染的特异性症状，体征和实验室指标可不明显，感染的恢复缓慢，常规治疗效果不佳。矫正心脏的外科手术需要在CPB条件下进行，由于血液成分与CPB管道非生理性人工界面的接触，外科手术接触心肌细胞缺血一再灌流损伤，肠源内毒素的释放，术中温度的变化等均可激活许多机体生化和免疫的改变，其直接的常见的临床损害就是呼吸道感染，本组患者常规手术创伤后的呼吸道感染的发生率为42.9%。

　　机体的免疫功能在防治感染中发挥着十分重要的作用，从理论上讲，机体的免疫功能分为细胞免疫、体抗免疫和非特异性免疫。细胞免疫中T细胞是最重要的调节成分，对免疫应答履行上调和下调的功能。外周血流中成熟的T细胞可分为CD+4的辅助性T细胞和CD+8的杀伤T细胞，CD+4T细胞协助B细胞进行分化和产生抗体，参与促进细胞介导的免疫应答。而CD+8T细胞具有杀伤和抑制作用。计算CD+4和CD+8T细胞比值，能初步评估抗体的免疫状态，该值增大提示免疫应答的正调节占优势[5]。CD+3是T细胞的重要表面抗原，本实验中采用流式细胞术通过CD+3抗体分选105个细胞再用CD+4 CD+8抗体进行T淋巴细胞分群，所以CD+3、CD+4、CD+8细胞值代表所含T细胞的百分率，治疗组患儿口服保元汤后，CD+3、CD+4、CD+4/ CD+8，T细胞率较治疗前上升(60.8VS68.8，37.2VS43.6,1.31VS1.71)，同时与对照组比较其值分别为68.8VS60.5,43.6VS36.8,1.71VS1.31，差异有统计学意义(P<0.05)。显示保元汤能明显提高先心病患儿的细胞免疫功能。

　　采用培养T淋巴细胞集落来分析患者活性细胞的生成能力(the T lymphocyte-colong forming unity， TL-CFU)，比液体培养测定细胞免疫功能更致感，并且能排除细胞之间的干扰[6]，能更直接地反映患者细胞免疫功能的变化。本文治疗组患儿因手术前、后口服保元汤，其TL-CFU较对照组明显提高，差别有统计学意义，患儿细胞免疫功能的提高，其抗病能力增强，大大降低了术后出现肺感染的并发症。

　　保元汤由人参、黄芪、甘草、肉桂组方，结合婴幼儿体质，本研究用党参代人参，党参效力虽然较人参弱，但不温、不燥，性平。它能通过促进垂体前叶肾上腺皮激激素的释放而提高应激能力[7]，有助于患儿耐受手术。它具有增强网状内皮细胞吞噬功能，刺激淋巴细胞产生白介素-2等增强免疫功能的作用[7]，它通过脾脏刺激增加血色素和细胞，还有强心作用[8]，有助于患儿术后康复。党参与黄芪配合，益气活血，促进抗体的免疫功能，作用互补，肉桂具有扩张血管，促进血液循环，促进胃肠蠕动，增加活化功能等功效。甘草调和诸药，有类皮质激素作用，四味药物组方不仅能大大提高机体的免疫功能，还能改善人体的心脏，血液，消化，血液循环等全身状态，实为促进婴幼儿围术期快速康复，减少心肺併发症的良药。

　　【参考文献】

　　1　Gianetti J，Del Sarto P，Bevilacqua，et al.Supplemental nitric oxide and its effect on myoardial injury and function in patients undergoing cardiac surgery with extracorporeal circulation[J].J Thorac Cardiovasc Surg,2004,127(1)：44-50.

　　2　顾展旭，苏鑫，张文风.保元汤免煎剂与汤剂疗效的对比研究[J].长春中医药大学学报，2011,27(3)：345-346.

　　3　苏鑫，粟栗，赵书峰.保元汤不同调节形似对脾虚小鼠负重游泳及M吞噬功能的影响[J].长春中医药大学学报，2010,26(3)：328-329.

　　4　 宋红莉，赵东东.益气活血法治疗胸痹心痛的临床观察[J].辽宁中医药大学学报，2011,13(3)：16-17.

　　5　 Patricia DB，Susan G， Meyan RR，et al.Effect of CVT-E002(TM)coold-fx vesusas a ginsenoside extract on systemic and gut-associatled immune function[J]，Int Immunopnharmacol， 2008,8(8)：1134-1142.

　　6　朱剑飞，汤黎明，王凤等，腺苷2A受体激活抑制大鼠T淋巴细胞功能[J].中国普外基础与临床杂志，2010,17(11)：1136-1140.

　　7　沈丕安.中药药理与临床运用[M].北京：人民卫生出版社，2006.75-84.