不对称二甲基精氨酸与早产儿呼吸窘迫综合征的相关性分析

　　作者：黄惠娟，　陈玮琪，　郑铠军，　杨秀芳，　陈敬国，　叶春华 作者单位：528403 广东 中山，中山大学附属中山医院新生儿科(黄惠娟，郑铠军，杨秀芳，陈敬国，叶春华);510080 广东 中山，中山大学附属第一医院新生儿科(陈玮琪)

　　【摘要】 目的　探讨不对称二甲基精氨酸(ADMA)与早产儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的关系及脐血ADMA对预测NRDS的意义。方法　以胎龄<35周、体质量<2 500 g的早产儿为研究对象，18例NRDS为实验组，其中分2级以上RDS组14例，1级RDS组4例;17例同期住院的早产儿为对照组。分别抽取脐带血，生后7、14 d桡动脉血各2 mL，用ELISA法进行ADMA检测。结果　(1)ADMA变化：早产儿胎龄、出生体质量、分娩方式，母亲合并妊娠高血压综合征与脐血ADMA无明显相关关系;(2)ADMA与NRDS的关系：2级以上RDS组脐血中ADMA明显高于1级RDS组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05);生后7 d和14 d的ADMA水平各组比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)2级以上RDS组脐血ADMA与机械通气时间、吸氧时间呈直线正相关关系(r=0.532,0.663，P<0.05)。结论　脐血ADMA是独立于胎龄、出生体质量、分娩方式及母亲是否有妊娠高血压综合征的指标;脐血ADMA可能是2级以上NRDS的预测因子，脐血ADMA越高，机械通气和吸氧时间越长。

　　【关键词】 不对称二甲基精氨酸;　呼吸窘迫综合征;　脐带血;　婴儿，早产

　　【Abstract】　Objective　To investigate the relationship between ADMA and NRDS and whether cord blood concentration of ADMA is a reliable biochemical marker to predict respiratory distress syndrome in preterm infants.Methods　Eighteen preterm infants with NRDS were included in experimental group and seventeen preterm infants whose gestation age was less then 35 weeks and birth weight was less than 2 500 g were in control group.Experimental group was divided into stage one group and stage two group.Draw 2 mL umbilical cord blood，and then draw 2 mL of radial artery blood respectively at 7 days and 14 days after birth.All the procedures were carried out strictly according to the supplied structure manuals in the ELISA kits.Results　(1)There was no linear correlation between the level of cord plasma concentrations of ADMA and birth weight，gestational age，mode of delivery and mother with hypertensive disorder complicating pregnancy.(2)In stage two group the level of cord plasma concentration of ADMA was significantly higher than that of stage one and the control group(P<0.05).The levels at 7 days and 14 days were not significantly different between experimental group and control group.(3)The level of cord plasma concentration of ADMA in stage two group was significantly related to length of mechanical ventilation(r=0.532，P<0.05) and the length of oxygen(r=0.663，P<0.05).Conclusions　The level of cord plasma concentration of ADMA is negatively correlated with birth weight，gestational age，mode of delivery and mother with hypertensive disorder complicating pregnancy.ADMA may be able to predict the occurrence of stage two NRDS.The higher the level of cord plasma concentrations of ADMA，the longer the time of mechanical ventilation and oxygen inhalation.

　　【Key words】　Neonatal respiratory distress syndrome;　Asymmetric dimethylarginine;　Cord blood;　Infant，preterm

　　近年来研究表明，早产儿肺损伤与血管内皮功能障碍[1]及自由基的过氧化损害等明显相关[2]。大量的研究表明不对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine，ADMA)是内皮功能障碍的调节因子，ADMA的升高是内皮功能失调的标志之一[3]。ADMA还可使一氧化氮合酶失偶联产生氧自由基，引起细胞损害、气道高反应，DNA、线粒体和蛋白质功能障碍[4]。外源性增加小鼠ADMA水平，鼠肺阻力明显增加，肺顺应性明显降低，同时肺胶原蛋白的沉积增加[5]。国外有关肺损伤与ADMA的研究主要在动物实验。在早产儿肺损伤时是否ADMA水平升高，国内相关报道少。新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome，NRDS)是早产儿生后早期出现的危重急症及早期死亡的重要原因之一。病理以出现嗜伊红透明膜和肺不张为特征，是早产儿早期肺损伤的主要原因。如能早期预测早产儿呼吸窘迫综合征肺损伤的发生，早期采取有效的干预措施，对减少呼吸机相关性肺损伤、氧中毒以及支气管肺发育不良等有重要作用。

　　1　资料与方法

　　1.1　临床资料

　　200908/201007中山大学附属中山医院新生儿科收治NRDS患儿18例，为实验组，其中男10例，女8例;病情分级：1级4例，2级9例，3级4例，4级1例。按病情分为两组，1级RDS组4例，其中男2例，女2例;胎龄(221.8±17.2)d;出生体质量(1.63±0.58)kg。2级以上RDS组14例，其中男8例，女6例;胎龄(222.6±16.0)d，出生体质量(1.39±0.51)kg。按随机数字表法抽取同期住院的胎龄<35周、出生体质量<2 500 g的早产儿17例为对照组，其中男10例，女7例;胎龄(224.4±9.9)d;出生体质量(1.71±0.36)kg。3组患儿在性别、胎龄、出生体质量方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

　　1.2　诊断标准

　　符合《实用新生儿学》第3版中NRDS的诊断标准[6]。按照胸部X线表现分为4级。

　　1.3　纳入标准

　　(1)胎龄<35周、出生体质量<2 500 g的早产儿;(2)家属知情同意。

　　1.4　排除标准

　　合并膈疝，严重畸形，严重宫内感染者。

　　1.5　实验方法

　　3组早产儿均抽取脐血2 mL，于第7、14天抽取桡动脉血2 mL。将所取血样置于含有2%EDTA 0.2 mL的抗凝管中，将血标本3 000 r/min离心15 min，然后放置在-20 ℃下冰箱贮存待用。用ELISA法测定脐血、生后7、14 d血浆ADMA值，由美国Groundwork Biotechnology Diagnosticate Ltd提供试剂盒。实验操作过程严格按照说明书指示进行。

　　1.6　观察指标

　　应用鼻塞型持续气道正压通气时间和机械通气时间，吸氧时间。

　　1.7　统计学方法

　　采用SPSS 13.0软件进行统计学处理。计量资料以x-±s表示，脐血ADMA水平与多因素关系采用多元线性回归分析;不同日龄ADMA比较、不同组别ADMA比较采用单因素方差分析及LSD法两两比较;脐血ADMA与机械通气时间、吸氧时间的关系采用直线相关分析。P<0.05为差异具有统计学意义。

　　2　结果

　　2.1　脐血ADMA水平与胎龄、出生体质量、分娩方式、母亲是否有妊娠高血压综合征的关系　见表1。表1　脐血ADMA水平与胎龄、出生体质量、分娩方式、母亲是否有妊娠高血压综合征的关系表1可见，脐血ADMA水平与胎龄、出生体质量、分娩方式、母亲是否有妊娠高血压综合征均无明显直线相关关系。

　　2.2　3组病例不同日龄ADMA水平变化

　　见表2。表2　3组病例不同日龄ADMA水平比较表2可见，3组早产儿脐血中ADMA值比较差异有统计学意义(P<0.05)，进一步用单因素方差分析两两比较之LSD-t检验，2级以上RDS组与1级RDS组和对照组比较，差异有统计学意义(t=2.39，2.63，P<0.05)。1级RDS组与对照组比较差异无统计学意义(t=0.73，P>0.05)。

　　2.3　脐血ADMA水平与机械通气时间的关系

　　见图1。图1　脐血ADMA水平与机械通气时间的关系图1可见，2级以上RDS组早产儿应用机械通气时间(指应用气管插管的机械通气时间)与脐血ADMA水平呈直线正相关(r=0.532，P<0.05)。对照组与1级RDS组早产儿均无需应用气管插管的机械通气，故未进行直线相关分析。

　　2.4　脐血ADMA水平与吸氧时间的关系

　　见图2。图2　脐血ADMA水平与吸氧时间的关系图2可见，2级以上RDS组早产儿吸氧时间与脐血ADMA水平呈直线正相关(r=0.663，P<0.05)。由于对照组中需要吸氧的病例仅4例，1级RDS组病例吸氧时间短，病例仅4例，故对照组和1级RDS组均未进行直线相关分析。

　　3　讨论

　　ADMA是由含精氨酸残基的蛋白质在蛋白质精氨酸甲基化转移酶的催化下进行甲基化，然后经蛋白水解生成。它是一氧化氮合酶的内源性竞争性抑制剂。大量的研究表明ADMA是内皮功能障碍的调节因子，在成人是作为内皮功能障碍导致危重急症的危险因子，但是较少涉及围产医学[7-9]。

　　本研究提示，脐血ADMA水平与早产儿出生体质量、胎龄、分娩方式、母亲是否有妊娠高血压综合征无关，出生时脐血ADMA水平处于较高水平，7 d后迅速下降，14 d与7 d ADMA水平变化不大。国外学者对此研究结果各有不同，Tsukahara等[10]研究示，脐血ADMA水平与出生体质量、胎龄明显相关，与分娩方式无关。Richir等[11]的研究示，脐血ADMA水平与出生体质量、胎龄无明显相关。仔细分析两位学者的研究发现，其选择的早产儿胎龄及体质量明显不同，Tsukahara等研究的新生儿病例对象胎龄为(35.3±5.2)周(24.4～41.4周)，体质量为(2 316±810)g(614～3 350 g)的新生儿，显然包括早产儿及足月儿。Richir等[11]研究选取的早产儿是胎龄25.4～31.7周，出生体质量775～2 255 g，与本研究的病例接近。出生时高水平的ADMA可能在维持血管张力和血液重新分布到重要器官起重要作用，有利于胎儿循环到新生儿循环的转换。可见，ADMA水平可能是独立于胎龄、体质量、分娩方式、母亲妊娠高血压综合征等的生化指标。

　　Wells等[5]持续给小鼠注射外源性ADMA，小鼠肺阻力明显增加，肺顺应性明显降低，同时可诱导肺胶原蛋白的沉积增加，提示ADMA水平升高可影响肺功能，并且后者与肺胶原蛋白的沉积增加有关。NRDS早期主要表现为肺顺应性的降低，肺功能的受损。本研究的2级以上RDS组的脐血ADMA水平明显升高可能提示早产儿肺顺应性的降低及肺功能的受损。

　　研究认为一氧化氮是调节正常肺发育，肺血管阻力，肺通气灌注比例的重要介质[12]。ADMA水平的升高使一氧化氮产生减少，从而导致肺损伤，其最终结果是需要更长时间的机械通气及吸氧。本研究结果提示，2级以上RDS组早产儿应用机械通气时间和吸氧时间与脐血ADMA水平呈直线正相关，机械通气与吸氧时间虽然不能直接反应早产儿肺功能，但是肺阻力增高与肺顺应性的下降是影响机械通气与吸氧时间延长的重要原因。

　　综上分析可见，脐血ADMA独立于出生体质量、胎龄、分娩方式、母亲妊娠高血压综合征的生化指标。脐血ADMA水平可能是2级以上RDS的预测因子。脐血ADMA水平越高，机械通气时间和吸氧时间越长。ADMA做为内源性一氧化氮合酶的抑制剂，为研究一氧化氮在新生儿领域的变化规律及可能的发生机制开辟了一条新的路径，通过研究ADMA的变化规律进一步探讨其对早产儿肺损伤的预测和治疗，为提高早产儿的生存质量，提出了新的课题。

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