某医院儿科院内临床细菌学检测及耐药性分析

　　作者：魏春雷，瞿绪光，茆海峰 作者单位：江苏连云港市第一人民医院 儿内科，222000

　　【摘要】 　　目的 了解我院儿科临床主要致病菌的分布及对目前常用抗生素的耐药情况。方法 采用美国DADE公司MicroScan Walk Away40全自动细菌鉴定药敏分析仪鉴定菌株(微量稀释法)并进行药敏试验(配套药敏卡)或采用纸片扩散KB(KirbyBauer)法进行药敏试验。结果 2002年5月～2007年5月儿科共送检标本3 226例，分离出438例菌株，革兰阳性菌共145株，占33.10%，革兰阴性菌236株，占53.88%，葡萄球菌对头孢霉素的耐药率均较高，达77%～96%，所有葡萄球菌对万古霉素及氟哌酸耐药率最低。福氏志贺氏菌及大肠埃希菌对氨苄西林，头孢呋辛耐药率达90%以上。肺炎克雷伯杆菌对抗生素多重耐药，且发现1株菌株对亚胺培南耐药。结论 细菌耐药性仍是目前临床上严重问题，应重视开展儿科抗感染治疗中的耐药性监测工作，同时合理使用抗生素以降低耐药性。

　　【关键词】 病原菌 抗菌药 抗药性 儿科

　　在儿科感染性疾病中，病原菌对抗生素的耐药已成严重问题，为了解近年来儿科感染性疾病中细菌的分布及耐药情况，促进抗生素的合理使用，使临床抗菌治疗达到最佳疗效，现将2002～2007年儿科临床分离的438株细菌及耐药性监测结果报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 为连云港市第一人民医院2002年5月～2007年5月临床分离菌株，包括住院患者和门诊患者的分离菌株(排除同一患者重复菌株)。

　　1.2 方法 采用美国DADE公司MicroScan Walkway40全自动细菌鉴定药敏分析仪鉴定菌株(微量稀释法)并进行药敏试验(配套药敏卡)，或使用常规法按《全国临床检验操作规程》进行接种分离及药敏试验，常规法所用培养基为MH(MullerHinton)琼脂，药敏试验采用纸片扩散KB(KirbyBauer)法，药敏纸片由英国Oxoid公司提供，药物选择试验方法和结果判定均按美国临床实验室标准委员会(NCCLS)2002年版规定的标准进行，质控菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC)25923，大肠埃希菌ATCC25922，粪肠球菌ATCC29212，铜绿假单胞菌ATCC27853，肺炎克雷伯菌ATCC700603。

　　1.3 统计学方法 采用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5软件进行分析处理。

　　2 结果

　　2.1 病原菌种类及分布 共送检标本3 226例，阳性标本438例，阳性率13.58%，居前5位的：福氏志贺氏菌(18.95%)，表皮葡萄球菌(18.22%)，猪霍乱沙门氏菌(18.22%)，大肠埃希菌(5.94%)，溶血葡萄球菌(7.75%)，其中革兰阳性菌共145株，占33.10%，居前三位的是表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，葡萄球菌人亚种;革兰阴性菌236株，占53.88%，居前三位的依次是福氏志贺氏菌，猪霍乱沙门氏菌，大肠埃希菌。真菌检出58例，占分离率的13.22%，真菌与其他病原菌同时感染也有上升趋势。

　　2.2 细菌对抗生素的耐药性 表皮葡萄球菌、葡萄球菌人亚种，溶血葡萄球菌对头孢霉素的耐药率均较高，达77%～96%，其中葡萄球菌人亚种及表皮葡萄球菌对苯唑青霉素的耐药率达96%～100%。金黄色葡萄球菌对克拉霉素耐药率更是高达100%，而所有葡萄球菌对万古霉素及氟哌酸耐药率最低，见表1。福氏志贺氏菌及大肠埃希菌对氨苄西林，头孢呋辛耐药率达90%以上，对复方新诺明也有70%左右的耐药率，猪霍乱沙门氏菌对氨苄西林，复方新诺明，氧哌嗪耐药率达96%～100%，而对头孢菌素，氟哌酸均高度敏感。肺炎克雷伯杆菌对抗生素多重耐药，且发现1株菌株对亚胺培南耐药。

　　3 讨论

　　抗菌药物的广泛应用必然导致病原菌谱的改变和细菌耐药性的产生及耐药率的增高。因此，使用抗生素药物既要达到有效安全的治疗、预防疾病的目的，又要合理用药，减缓或防止细菌耐药性的发生，延长抗生素的使用寿命。加强临床细菌耐药性监测，对指导抗生素药物的合理使用是十分重要的。本研究表明，2002年5月～2007年5月在我科感染致病菌中，以革兰阴性菌为主，占53.88%，略高于文献报道[1]，考虑与阳性结果多来自粪便标本有关。革兰阴性杆菌居前五位的是福氏志贺氏菌，猪霍乱沙门氏菌，大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，宋氏志贺氏菌，革兰阳性菌则以表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，葡萄球菌人亚种，金黄色葡萄球菌为主。真菌的分离率达13.2%，说明真菌引起的感染在临床占有一定的比例，这与广谱抗生素的广泛使用、免疫抑制剂及各种介入性医疗手段增加有关。可能与正常菌群中敏感假丝酵母菌属被抗菌药物杀死或抑制，影响了正常菌群的生态平衡，机体生物屏障作用减弱，使白色假丝酵母菌大量生长繁殖，导致菌群失调，引起真菌感染。因此，临床医生应重视标本的送检，临床微生物实验室必须做好真菌的分离培养和药敏试验，重视真菌耐药性的监测。

　　从被监测的药物来看，临床分离的革兰阴性杆菌对常用抗生素的耐药率较高，但亚胺培南仍保持着对革兰氏阴性菌广泛的敏感覆盖率，可作为耐药菌所致重症感染患者的首选。但是，临床上已发现一株肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药，因此，临床医生应对亚胺培南有保护性使用意识，减少耐药性产生。福氏志贺氏菌是儿童细菌性痢疾的主要血清型，也是本组居第1位的细菌种类，由于该细菌的耐药质粒R可以在肠道细菌间通过结合等途径互相传递，介导志贺菌对氨苄西林和复方新诺明等药物产生多重耐药性[2]。另外，在志贺菌对喹诺酮类药物耐药机制的研究中已发生耐药细菌的GyrA基因发生于点突变[3]，这使近年来志贺菌对多种抗生素的耐药性逐渐增加，而且同一菌株对多种药物耐药。本研究中福氏志贺氏菌对氨苄青霉素、复方新诺明高度耐药，对二代及部分三代头孢霉素耐药性逐渐增高，对庆大霉素及氟哌酸的耐药率相对较低，这是因为氨基糖甙类抗生素对小儿易产生耳、肾毒性，喹诺酮类对小儿软骨发育有一定影响，儿科临床基本不用。

　　分离的革兰阳性球菌中，主要为葡萄球菌，它们对常用抗生素如苯唑青霉素，头孢霉素耐药率达80%以上。表皮葡萄球菌是本研究中主要的革兰阳性球菌，近年发现，凝固酶阴性葡萄球菌也产肠毒素及致病因子，是医院感染的重要致病菌，而且，耐甲氧西林凝固酶阳性葡萄球菌比例也在升高，其耐药性比金黄色葡萄球菌更普遍。耐甲氧西林的葡萄球菌由于细菌细胞中青霉素结合蛋白(PBP)发生突变，产生新的PBP2a，与目前临床上使用的β内酰胺类抗生素亲和力较低，从而对头孢菌素类，β内酰胺酶抑制剂及亚胺硫霉素耐药[4]。本研究中表皮葡萄球菌，金黄色葡萄球菌对青霉素类、红霉素、复方新诺明及头孢霉素表现出多重耐药。

　　抗生素不合理使用已较普遍，导致菌群失调，耐药菌株上升。且由于儿童生理特点限制了喹诺酮类及氨基糖甙类药物的使用，更限制了儿科医生用药选择。我们应制定合理使用抗生素管理办法和具体措施，严格掌握抗生素使用适应症和预防用药指征，加强感染性疾病监测，并根据微生物检测结果，有计划，分批，交替使用抗生素，来防止或减少耐药菌株的产生。

　　【参考文献】

　　[1] 杨金姚.医院个人病原菌分布及耐药谱调查[J].实用预防医学,2005,12(1):175176.

　　[2] 丁建强,马亦林,龚 正,等.志贺菌流行菌株耐药性及R质粒的研究[J].中华传染病杂志,1998,16(3):161163.

　　[3] Horiuchi S,Inagaki Y,Yamamoto N,et al.Reduced susceptibilities of Shigella sonnei strains isolated from patients with dysentery to fluoroquinolones[J].Antimicrob Agents Chemother,1993,37(11):24862489.

　　[4] Nationdnal committee for clinical laboratory standards methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobicallyfifth edition:Approved standard M2A7[S].Pennsylvania:NCCLS,1999.2628.