胃嗜酸性肉芽肿中嗜酸细胞与微血管密度及临床病理特征的关系
发表时间：2012-12-21 浏览次数：1231次
作者 作者单位
边雪梅 江苏省镇江市第三人民医院 消化内科，212000
高振军 江苏省镇江市第一人民医院 消化内科，212000
【Abstract】 Objectives To investigate the relationship between eosinophilic cells and microvessel density and the degree of ulcer lesion in gastric eosinophilic granuloma.Methods Paraffin embeded tissues from 23 gastric eosinophilic granuloma patients and 15 gastric ulcer patients were studied. Antihuman CD34 antibody was stained to detect the microvessel density. Eosinophil cells were counted in hematoxylineosin staining.Resorts The microvessel density was significantly greater in gastric eosinophilic granuloma patients than in gastric ulcer control subjects. Microvessel density was higher in the patients with more eosinophil cells than those with lower ones. There was relevance between the density of microvessels and the number of eosinophils. There were more eosinophilic cells in patients whose ulcer diameter was larger than five centimeters. The same resort was found in patients whose ulcer was deeper. The number of eosinophilic cells was higher in the patients with more serious fibrosis extent.Conclusion Microvessel density plays an important role in the infiltration of eosinophilic cells. The number of eosinophilic cells in gastric eosinophilic granuloma patients is closely related to the degree of ulcer lesion and fibrosis.
【Key words】 Gastric eosinophilic granuloma,Eosinophils,Microvessel density,Ulcer; Fibrosis
胃嗜酸性肉芽肿(gastric eosinophilic granuloma,GEG)是一种以胃黏膜下层及肌层大量嗜酸细胞浸润为特征的良性病变。由Kaizsen于1937年首次报道，临床少见，但近年来报道逐渐增多。临床易误诊为胃癌或胃溃疡(gastric ulcer,GU)，其病因及发病机制目前尚不清楚。内科抗酸治疗效果较差，多采用手术治疗。嗜酸细胞(eosinophilic cells,EC)是GEG中的特征细胞，嗜酸细胞浸润的多少是GEG诊断的主要标准之一。为了解其浸润的机制及与GEG病变的关系，我们对微血管密度(microvessel density,MVD)与嗜酸细胞的关系进行了研究，并对嗜酸细胞与GEG病变的程度及纤维化的关系进行了初步探讨。
1 资料与方法
1.1 资料 选取镇江市第一人民医院1995年～2009年手术及术后病理确诊之GEG蜡块标本共23例，男20例，女3例，年龄19～64岁，平均年龄39.2岁。随机取同期GU手术切除标本15例作为对照组。试剂 ：鼠抗人CD34抗体，免疫组化SP检测试剂盒，DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。
1.2 方法 (1)免疫组化SP染色： 每例标本连续切取4 μm厚组织切片2片，1片作HE染色，另1片做免疫组化染色。抗CD34免疫组化染色经微波抗原修复，阴性对照采用PBS缓冲液做一抗，其余步骤严格按SP染色试剂盒说明书进行。结果判定，胞浆染成棕黄色或棕褐色为抗CD34阳性。(2)HE染色： 石蜡切片脱蜡至水冲洗后，苏木精室温染色5 min，自来水洗，1%盐酸酒精分色，冲洗后，伊红室温下染色5 min，水洗、脱水、透明，中性树胶封片，光镜下观察。(3)MVD计数： GEG的MVD检测标准参照肿瘤MVD的标准[1]，抗CD34抗体免疫组化染色阳性的与比邻微血管、细胞及其它结缔组织不相连的任何内皮细胞均作为一条独立的微血管，每一标本在低倍镜(×100)下选3个微血管最多的区域，在每一个区域中计数一个高倍视野(×400)下的微血管数，取3个视野的均值即为MVD计数(/×400),有平滑肌包绕的大血管除外。(4)嗜酸细胞计数： HE染色下计数嗜酸细胞，嗜酸细胞呈圆形或椭圆形，胞桨红，核为蓝色，多为双核。在黏膜下层嗜酸性粒细胞集中区域选取5 个视野，高倍镜(×400)下计数，取平均值即为该标本的嗜酸性粒细胞数(/×400)。
1.3 统计学方法 采用SPSS10.0统计学软件处理。数据用±s表示。样本之间比较采取t检验或χ2检验。
2 结果
2.1 GEG和GU中MVD计数 GEG组织中微血管多位于黏膜下层和肌层，GU组MVD多位于黏膜固有层及黏膜下层，两者之间比较，见表1。表1 GEG与GU中MVD比较
2.2 GEG中MVD与嗜酸细胞的关系 MVD与嗜酸细胞在病变组织的不同部位差别较大，但在连续切片的病理组织上发现MVD较密集的部位也是嗜酸细胞集中的区域，以MVD计数的平均值为标准，把GEG组分为高计数组(MVD≥47.2)13例和低计数组(MVD<47.2)10例。见表2。表2 不同MVD的嗜酸细胞比较
2.3 嗜酸细胞与GEG临床病理特征的关系 从病例切片上发现，病变组织中有大量的嗜酸细胞、淋巴细胞及少量的中性粒细胞，以及小血管，各部位分布差别较大，在黏膜下层嗜酸细胞较集中，嗜酸细胞较聚集的部位也是淋巴细胞及中性粒细胞集中的部位。本组病例中胃体或胃底部4例，胃窦或幽门部8例，同时累及胃窦和胃体部11例;溃疡最大径≥5 cm的有10例, <5 cm的有13例;溃疡深度浸润达浆膜或周围组织的有12例，未浸润达浆膜或周围组织的有11例;纤维母细胞较多，胶原纤维较少，无玻璃样变或瘢痕形成的早期纤维化病例有15例，纤维母细胞少，较胶原纤维较多，伴有玻璃样变或瘢痕形成的晚期纤维化病例有8例。结果见表3。表3 嗜酸细胞与GEG临床病理特征的关系
由表3可见，在不同部位的GEG病变中嗜酸细胞计数无显著性差异(P>0.05);在不同大小及深度的GEG溃疡病变中嗜酸细胞计数差异有显著性(P<0.05);嗜酸细胞计数在不同纤维化程度的GEG病变中差异具有非常显著性(P<0.01)。
3 讨论
3.1 嗜酸细胞与MVD的关系 GEG在病理组织学上一般有溃疡形成，粘膜下和肌层有大量嗜酸细胞、淋巴细胞浸润，肉芽组织中有大量纤维组织，可见纤维瘢痕和玻璃样变，小动脉、小静脉和淋巴管大量增生，肌层被嗜酸细胞分割挤压，甚至浆膜层亦有大量嗜酸细胞浸润[2]。GEG的病因尚不清楚，有过敏反应学说，炎症学说，异物反应学说和家族遗传学说等推测，但目前多数学者认为是胃组织对局部炎性刺激物产生的一种特殊反应和过敏反应。
MVD是新生血管的标志，1935年Herteg首先使用血管新生来描述胎盘中的血管形成，后又被用来描述损伤及肿瘤中的新血管形成，GEG和GU是胃黏膜的损伤性变化，Farnawski等[3]在动物实验中证实溃疡与其它部位外伤时的修复进程相似。Ito等[4]观察到胃黏膜受损后不久在溃疡底部就会形成肉芽组织及向表面垂直生长的新生血管及大量炎性细胞。
毛细血管是物质交换和炎性细胞渗出的场所，而芽生的小血管是毛细血管形成的基础。血管新生首先是血管内皮细胞的迁移，迁移的内皮细胞延伸并与邻近的内皮细胞相互形成较牢固的血管芽，内皮细胞弯曲形成腔，内皮细胞的增殖使血管芽延长，有腔的血管芽相互连接形成毛细血管。此过程主要受血管生成因子和一些调控因子的调节，血管生成因子主要包括纤维母细胞生成因子(FGF)内皮细胞生长因子(嗜酸细胞GF)，转化生长因子(TGFα)以及血管生成素等，调控因子主要包括具有促进血管增殖作用的肥大细胞及肥大细胞释放的肝素，铜离子等，以及具有抑制血管增殖作用的鱼精蛋白等[5]，在本研究中发现，GEG比GU病变中的MVD明显增高，可能在GEG与GU病变中血管生成因子或调控因子的数量有差异。
在GEG病变中，MVD高的区域，嗜酸细胞亦明显增高，MVD与嗜酸细胞的数量成正相关。说明GEG中的血管增加有可能与嗜酸细胞的浸润有关，新生血管及由其发展成的毛细血管仅由一层上皮细胞构成，无平滑肌包绕，通透性高，有利于炎性细胞的渗出。大量的新生血管增加了血液与病变组织的接触面积。在嗜酸细胞趋化因子的作用下，使嗜酸细胞更易浸润到病变组织。嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)是嗜酸细胞特异性趋化因子，嗜酸细胞在组织中的浸润主要由Eotaxin-1 和Eotaxin-2的协调作用决定[6]，Salcedo等[7]发现eotaxin可引起血管新生，并伴有大量以嗜酸细胞为主的炎性细胞浸润，说明血管新生与嗜酸细胞浸润是密切相关的。嗜酸细胞在血管形成中亦起重要的作用，高嗜酸细胞血症病人的嗜酸细胞可产生TGFαTGFβ1[8]，嗜酸细胞还可表达VEGFmRNA[9]，从而引起血管新生。新生血管促进了嗜酸细胞的浸润，而嗜酸细胞释放炎性介质引起胃黏膜的损伤，并促进血管新生，二者相互影响，从而在GEG的发生发展中起重要的作用。
3.2 嗜酸细胞与临床病理特征的关系 在本研究中发现，嗜酸细胞计数与GEG病变部位无关，在较大或较深的溃疡中，嗜酸细胞增多，说明嗜酸细胞与GEG病变程度有关，嗜酸细胞可通过自身释放的炎性介质或通过对其它炎性细胞的趋化、激活，引起组织损伤及一系列临床表现。(1)嗜酸细胞及其释放的炎性介质在GEG病变中起重要作用。研究已发现嗜酸细胞活化可释放嗜酸细胞阳离子蛋白和主体碱性蛋白以及白三烯、细胞因子、神经毒素、过氧化酶、蛋白酶及其它酶类，嗜酸细胞也随之增多，嗜酸细胞增多以后，又会使纤维化加重，纤维母细胞减少，从而又会使嗜酸细胞减少。
总之，在GEG病变中，嗜酸细胞不仅是重要的标志性细胞，也是重要的效应细胞，它与微血管的形成密切相关，并与GEG病变程度及纤维化程度具有重要的关系。
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