自然铜炮制前后微量元素含量变化研究
发表时间：2012-12-18 浏览次数：1245次
作者 作者单位
高婵 南京中医药大学,江苏省中药炮制重点实验室,江苏 南京 210029;
李伟东 南京中医药大学,江苏省中药炮制重点实验室,江苏 南京 210029;
李俊松 南京中医药大学,江苏省中药炮制重点实验室,江苏 南京 210029;
丁霞 南京农业大学,江苏 南京 210095
蔡宝昌 南京中医药大学,江苏省中药炮制重点实验室,江苏 南京 210029;
自然铜(pyritum)又名石髓铅,为等轴晶系矿物黄铁矿的矿石,主要含FeS2,味辛,性平,归肝经,有破积聚、疗折伤、续筋骨、散瘀排脓、止痛定惊之功效,是自古至今沿用的中医伤科接骨要药,多用于治疗跌打损伤、筋伤骨折、瘀血疼痛等症。传统观点认为,自然铜入药需炮制,临床上广泛应用的是它的炮制品——煅自然铜。本试验利用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP)测定生、煅自然铜水煎液中铁元素及相关伴生元素的含量并进行比较,为初步阐明自然铜炮制机理提供参考。
1 仪器与试药
SXC-4-13C一体化程控高温炉(中国杭州),AG285电子分析天平(0.01 mg,METTLER TOLEDO,Switzerland),TDL-2B台式离心机(上海安亭科学仪器厂),Perkin Elmer Optima 2100DV电感耦合等离子发射光谱仪,ThermoSpec/CID/2.12软件。
自然铜购于四川省成都市药材有限公司,经南京中医药大学陈建伟教授鉴定为硫化物类矿物黄铁矿族自然铜(Pyritum),且符合2005版《中华人民共和国药典》(一部)相关标准[1];煅自然铜,本实验室自制。将以上药物粉碎,过筛,取100目以下粉末放入烘箱内,于105 ℃干燥1.5 h,取出后放入干燥器内,备用。多元素标准溶液(100 μg/mL)含镁、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、铅元素,批号06B27;钙元素标准溶液(1 000 μg/mL),批号07141,均购自国家有色金属及电子材料分析测试中心;高纯氩气(氩体积分数>99.99%)。盐酸为分析纯,水为自制去离子水。
2 方法与结果
2.1 供试液的制备
分别精密称取生、煅自然铜粉末5.00 g,置250 mL圆底烧瓶中,加蒸馏水100 mL,称重。回流提取1.5 h,冷却后加水补至原重,煎液于3 200 r/min离心15 min,取上清液3份,每份25 mL,分置于50 mL量瓶中,加2.8 mL盐酸,加水至标线,摇匀,即得,同时做试剂空白。
2.2 仪器工作条件
高频发生器频率：27.12 MHz;功率：1 300 WATTS;载气压力：28 psi;冷却气流速：15 L/min;辅助气流速：0.8 L/min;蠕动泵转速：100 r/min;观察器高度：3 mm;样品冲洗时间：20 s;积分时间：长波15 s,短波10 s;积分次数：2 次。各元素分析线波长,见表1。表1 各元素分析线波长(略)
2.3 方法学考察
2.3.1 标准曲线的绘制
精密吸取多元素标准溶液0、0.125、0.25、0.5、1.0 mL放入10 mL容量瓶中,用空白溶液定容至刻度,上机测试,得到线性回归方程和相关系数,见表2。
精密吸取钙元素标准溶液 1 mL放入10 mL容量瓶中,用空白溶液定容至刻度,得100 μg/mL 钙元素中间标准储备溶液。精密吸取钙元素中间标准储备溶液0、0.125、0.25、0.5、1.0 mL放入10 mL容量瓶中,用空白溶液定容至刻度,上机测试,得到线性回归方程和相关系数,见表2。表2 线性回归方程和相关系数(略)
2.3.2 精密度试验
取煅自然铜供试液,连续进样7次,测得锌、钴、镍、铁、锰、铬、镁、铜、钙、铅元素的RSD分别为0.78%、0.91%、1.6%、2.2%、0.45%、1.3%、0.84%、0.73%、0.85%、0.76%,表明精密度良好。
2.3.3 稳定性试验
取煅自然铜供试液,分别于0、2、4、8、12、24 h上机测量,测得锌、钴、镍、铁、锰、铬、镁、铜、钙、铅元素的RSD分别为0.87%、0.37%、1.4%、1.2%、0.9%、0.65%、0.33%、0.26%、0.31%、0.81%,可见供试品溶液在24 h内稳定。
2.3.4 加样回收率试验
在5份生、煅自然铜供试液中,分别加入一定量的多元素标准溶液、钙元素中间标准储备溶液,测定各元素含量。结果见表3。 表3 加样回收率试验结果(略)
2.3.5 含量测定
吸取生、煅自然铜供试液,上机测试,结果见表4。表4 自然铜炮制前后煎液中10种元素的含量比较(略)
3 讨论
现代研究认为,骨折愈合需多种元素参与,铁、铜、锰、锌、钴等为人体所必需的元素,铁可以发挥输氧功能,提高氧分压,促进骨折愈合,早期骨痂形成[2];铜能通过对多种酶的激活作用促进成骨细胞活跃增殖[3];锌增强碱性磷酸酶活性,加速骨折及伤口愈合[4]。本次研究发现,煅自然铜煎液中铁元素含量较生自然铜中剧增,除铅以外的其他元素均有不同程度的增加。这说明,临床上使用煅自然铜是有一定道理的,并揭示了其接骨作用可能和微量元素含量变化有一定的相关性。
重金属铅在煅自然铜煎液中的含量低于生自然铜煎液,这与文献报道的自然铜煅淬能够降低毒性的说法是一致的。
本试验为初步阐明自然铜炮制机理提供了参考,但煅自然铜促进骨折愈合是一个复杂的组织修复过程,仍有待进一步研究。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出社,2005.95.
[2] 刘海起,朱 显,赵士林,等.磁与自然铜促进骨折愈合的初步实验研究[J].中华外科杂志,1983,21(1)：1.
[3] 张克勤,刘湘秀,李瑞宗,等.七厘散对骨折愈合作用的初步探讨[J].中华外科杂志,1962,10(5)：305.
[4] 徐经采.微量元素与骨骼[J].中医骨伤科杂志,1987,3(1)：55
