缬沙坦对不稳定型心绞痛患者IFNγ和IL2及预后的影响

　　作者：杨斌 崔彬 于厚志 张玉英 吕 政 张绪洪 苑海涛 张兴华 作者单位：山东大学附属省立医院心血管内科东区，山东 济南 250021

　　【摘要】 目的 研究缬沙坦对不稳定型心绞痛(UAP)患者血浆IFNγ和IL2的影响。方法 将95例经冠状动脉造影证实的UAP患者随机分为常规治疗组和缬沙坦治疗组。以酶联免疫吸附实验(ELISA)测定47例常规治疗组和48例缬沙坦治疗组患者治疗前及治疗6个月后血浆干扰素γ(IFNγ)、白细胞介素(IL)2和IL4水平，并同时观察两组患者出院后6个月内因UAP再次入院、急性心肌梗死、血运重建及死亡等主要心血管不良事件(MACE)情况。结果 两组患者在治疗6个月后血浆中IFNγ和IL2的水平均较治疗前下降(P<0.05)，缬沙坦治疗组下降较常规治疗组更为明显(P<0.05)。两组患者在治疗6个月后血浆中IL4的水平较治疗前无显著变化(P>0.05)。缬沙坦治疗组6个月内的MACE显著减少(P<0.05)。结论 缬沙坦可能通过降低UAP患者血浆中IFNγ和IL2的水平，抑制Th1细胞的过度激活，从而达到稳定斑块，改善预后的作用。

　　【关键词】 心绞痛;不稳定型;T淋巴细胞;辅助性;缬沙坦;干扰素γ;白细胞介素

　　Effects of valsartan on the expressions of IFNγ and IL2 in patients with unstable angina pectoris

　　YANG Bin, CUI Bin, Yü HouZhi, et al.

　　Department of Cardiology, Shandong Provincial Hospital of Shandong University, Jinan 250021, Shandong, China

　　【Abstract】 Objective To investigate the effects of valsartan on the expressions of IFNγ and IL2 in patients with unstable angina pectoris (UAP).Methods 95 UAP patients were randomly divided into conventional (n=47) and valsartan(n=48) therapy group.The levels of IFNγ, IL2 and IL4 were measured by ELISA at baseline and 6 months later. Major adverse cardiovascular events (MACEs) were observed after 6 months. Results The levels of IFNγ and IL2 in two groups after 6 months were all lower than those at baseline(P<0.05)and reduced in valsartan group compared with those in conventional group(P<0.05). No significant difference was observed on the level of IL4 between baseline and 6 months later in two groups(P>0.05).MACEs in valsartan group were significantly improved in 6 months(P<0.05). Conclusions Valsartan could suppress the function of Th1 and its cytokine of IFNγ and IL2 in UAP patients. This may contribute to the stability of atherosclerotic plaque and improvement of myocardial ischemia.

　　【Key words】 Unstable angina; Helper T lymphocyte; Valsartan; Interferongamma; Interleukin

　　不稳定型心绞痛(UAP)等急性冠脉综合征的发病与炎症和免疫反应有密切的关系，多种免疫细胞及效应分子参与其中〔1～3〕。 新近的研究表明不稳定型心绞痛患者辅助性T淋巴细胞亚群1和2 (Th1/Th2)存在明显的失衡，主要表现为Th1细胞功能亢进及其分泌的相关细胞因子干扰素γ(IFNγ)和白细胞介素(IL)2水平升高〔4〕。调节Th1/Th2细胞亚群的失衡，抑制Th1细胞的过度激活也许能够为UAP患者带来临床益处，减少缺血事件的发生。 已有研究证明血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)能够调节Th1/Th2细胞亚群的失衡，抑制T淋巴细胞向Th1的偏移〔5〕，但目前的治疗指南还未将ARB类药物列为UAP患者的常规治疗。本研究首次观察缬沙坦对UAP患者免疫功能及预后的影响，探讨ARB类药物能否调节UAP患者Th1/Th2的失衡、改善患者预后及其可能的机制。

　　1 对象与方法

　　1.1 研究对象 2006年8月～2008年2月，本院心内科收治的95例UAP患者，其中男63 例，女32 例，年龄55～68(平均61±7.5)岁，符合Braunwald分级Ⅱ或Ⅲ级，入院前1个月内出现过静止性胸痛，有一过性的ST段压低或T波倒置，CKMB和CTnT升高小于正常上限的两倍。排除合并严重心力衰竭(LVEF<40%)、高血压、风心病、心肌病、严重的肝肾功能不全、风湿系统疾病、严重感染、恶性肿瘤及应用炎症抑制物如非甾体类抗炎药或类固醇等的患者。将上述95 例患者随机分为两组：缬沙坦治疗组48 例(男33 例，女15 例)和常规治疗组47 例(男30 例，女17 例)，所有患者均行冠状动脉造影检查显示至少有1支血管直径狭窄超过50%。两组患者各项临床资料差异均无显著性。

　　1.2 给药方法 常规治疗组给予常规药物治疗(阿司匹林、低分子肝素、β受体阻滞剂、他汀类、硝酸酯类和钙离子拮抗剂等药物)，缬沙坦治疗组在常规治疗基础上加用缬沙坦80 mg(代文，诺华公司产品)，1次/d，连续服药6个月，用药期间注意观察患者肾功能、血压和血钾的变化。

　　1.3 血浆细胞因子的测定 所有患者于服药前及服药6个月后于清晨空腹抽取肘静脉血2 ml(EDTA抗凝)，1 000 r/min离心15 min后取上清置于80℃冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血浆中IFNγ、IL2和IL4水平，试剂盒购于北京中杉金桥生物技术有限公司，IL2最低检测浓度为16 pg/ml，IFNγ和IL4最低检测浓度为8 pg/ml，并严格按照说明书操作，具体步骤如下：取待测血浆100 μl加入已被IFNγ、IL2和IL4单克隆抗体包被的96孔板，置37℃温箱孵育120 min，用洗涤液洗板6次，再加入生物素化的抗人IFNγ、IL2和IL4 的抗体50 μl，将反应板充分混匀后置37℃温箱孵育60 min后用洗涤液洗板6次。每孔中再加入辣根过氧化物酶标记的Strepavidin 100 μl置 37℃温箱孵育60 min后洗板6次，加OPD底物工作液100 μl，置37℃暗处反应10 min，最后每孔加50 μl终止液混匀。在492 nm处测OD值，并根据标准曲线分别求出IFNγ、IL2和 IL4的浓度。

　　1.4 两组患者出院后6个月内主要心血管不良事件的情况 记录治疗后两组UAP患者在6个月内MACE的发生情况,主要包括不稳定型心绞痛再次入院、急性心肌梗死、血运重建及死亡等。

　　1.5 统计学处理 采用SPSS11.5软件，计量资料以x±s表示，计数资料以百分率(%)表示，分别行t检验和χ2检验。

　　2 结 果

　　2.1 两组患者血浆中IFNγ、IL2和IL4水平的比较 两组患者治疗前血浆中IFNγ、IL2和IL4水平差异均无显著性(P>0.05)。两组患者治疗后血浆中IFNγ、IL2水平较治疗前降低(P<0.05)，但缬沙坦组改变较常规治疗组更为明显(P<0.05)，而IL4的水平在治疗前后无明显变化(P>0.05)。见表1。

　　2.2 两组患者治疗6个月后MACE事件发生率的比较 6个月后常规治疗组发生MACE事件12例(25.5%)，但缬沙坦治疗组仅有4例(8.3%)，差异显著(P<0.05)。

　　2.3 两组患者血压的比较 两组UAP患者血压在治疗前无明显差异(P>0.05)，在治疗后均有所下降(P<0.05)，但两者相比差异无显著性(P>0.05)。见表2。表1 两组患者血浆中IFNγ、IL2、IL4水平的比较 表2 两组患者血压的变化

　　3 讨 论

　　Th细胞可分为主要分泌IFNγ和IL2的Th1细胞和主要分泌IL4的Th2细胞。IFNγ和IL2可激活巨噬细胞，诱其产生活性氧簇和基质金属蛋白酶并能减少其对修饰的低密度脂蛋白的摄取;还可使动脉粥样硬化斑块中的血管平滑肌细胞的数量减少并抑制其胶原基质的合成，从而使动脉粥样硬化斑块的脂质核变大，纤维帽变薄，导致斑块的不稳定和破裂，促进血栓形成和血栓的稳定。充分证据表明UAP患者存在Th1细胞功能的亢进，并且Th1细胞的激活水平与斑块的不稳定有关〔6，7〕。调节Th1细胞的功能可能有助于斑块的稳定，减少临床缺血事件的发生〔8〕。

　　本研究首次观察ARB类药物对UAP患者免疫功能的调节，以及对其预后的影响。结果两组UAP患者经过6个月的治疗，反映Th1细胞功能的IFNγ和IL2水平在常规治疗组和缬沙坦治疗组较治疗前均有所下降，证明UAP的常规治疗包括他汀类等药物可抑制UAP患者体内的炎症和免疫反应。与常规治疗组相比，缬沙坦治疗组IFNγ和IL2水平下降更明显，但是血压水平在两组间差异不显著，说明缬沙坦具有降压以外的抗炎和抑制Th1细胞过度激活的作用。更重要的是缬沙坦治疗组患者6个月后包括心肌梗死在内的主要心血管事件显著减少，提示缬沙坦通过抗炎、抑制Th1细胞功能的作用对稳定UAP患者动脉粥样硬化斑块、改善预后具有积极的意义。

　　有研究发现血管紧张素Ⅱ与受体结合后，通过核转录因子NFkappaB启动多种炎症和免疫反应的基因表达〔9，10〕。推测缬沙坦可能通过拮抗血管紧张素Ⅱ，抑制核转录因子NFkappaB的基因调控靶点，从而抑制IFNγ和IL2基因转录和表达，使UAP患者血浆中IFNγ和IL2的水平下降。总之，本研究证实缬沙坦能通过调节Th1细胞功能，抑制Th1细胞过度激活和炎症因子的表达，达到稳定斑块，减少临床缺血事件的发生。

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