厄贝沙坦对急性心肌梗死大鼠心室重构的影响

　　作者：孙绍骞 张志国 赵学忠 作者单位：吉林大学医疗一系 吉林大学第一医院心内科 吉林 长春 130021

　　【摘要】 目的 观察厄贝沙坦对急性心肌梗死大鼠心室重构的防治作用。方法 结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死，同时应用厄贝沙坦进行治疗，给药4 w后测定心室重构大鼠血液动力学、生化学及形态学参数。结果 厄贝沙坦对急性心肌梗死心室重构大鼠，能明显升高左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)及其校正值(±dp/dtmax/LVSP)，降低左心室收缩压(LVSP)及左心室舒张末压(LVEDP)，亦能明显降低左心室容积(LVV)、左心室长轴(LVLA)长度、左心室短轴(LVSA)长度、左心室绝对重量(LVAW)、左心室相对重量(LVRW)、右心室绝对重量(RVAW)和右心室相对重量(RVRW)，但对心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)及体重(BW)均无明显影响。此外，可明显降低血清脂质过氧化物 (LPO)及心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和肾上腺素(E) 含量，提高超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结论 厄贝沙坦能有效防治急性心肌梗死大鼠的心室重构。

　　【关键词】 厄贝沙坦;急性心肌梗死;心室重构

　　肾素-血管紧张素系统可作用于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体引起心室重构 〔1〕。厄贝沙坦(Erbesartan)为AngⅡ受体拮抗剂，对急性心肌梗死(AMI)后心室重构的作用少见报道。本研究通过大鼠AMI心室重构模型，观察了厄贝沙坦是否具有防治心室重构的作用，为扩展其临床应用提供实验依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物

　　Wistar大鼠，雌雄各半，体重180～220 g，合格证号为：医动字第10-5112，由长春高新医学动物研究中心供给。

　　1.2 药品与试剂

　　厄贝沙坦片(Erbesartan)，南京长澳制药有限公司;脂质过氧化物 (LPO)，超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供;AngⅡ放免测试盒，北京北方生物技术研究所提供;l-去甲肾上腺素标准品及dl-肾上腺素标准品均为国产试剂。

　　1.3 实验方法

　　1.3.1 AMI模型建立及动物分组

　　大鼠冠脉结扎按文献方法〔2〕，在乙醚麻醉下仰位固定于手术台，自左侧3～4肋间开胸，暴露心脏，于肺动脉圆锥及左心房间找出冠脉左前降支,以0号丝线立即结扎冠脉，将心脏送回胸腔，并挤出胸腔内血液和气体,迅速关闭胸腔，开胸时间不超过30 s，假手术组仅置缝线不结扎冠脉。关胸后动物很快恢复自主呼吸，并能自如行走，部分动物因麻醉过深、术中出血或AMI后诱发心律失常而死亡，手术成功率接近80%。术后24 h，存活大鼠行心电图检查，约90%的模型大鼠可见ST段抬高而用于实验，并按ST段抬高程度随机分组。实验分组如下：(1)正常对照组：不进行心脏手术，灌胃(ig) 生理盐水2 ml/kg。(2) 假手术组：ig生理盐水2 ml/kg;(3) 梗死模型组：ig 生理盐水2 ml/kg;(4)厄贝沙坦组：ig厄贝沙坦100 mg/kg。各组动物(n=25～26)均于术后24 h开始给药，每日1次，连续4 w。为防止大鼠术后感染，每日肌肉注射青霉素40万U/只，连续1 w。

　　1.3.2 血液动力学测定

　　给药4 w后，每组取10只大鼠以3%戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射(ip)麻醉，固定后分离右侧颈总动脉，将内径1 mm的塑料管插入左心室，与RM-6000型多导生理记录仪连接，稳定20 min后测量左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)，同时，分离股动脉，插管测量动脉收缩压(SBP)及舒张压(DBP)，以计算平均动脉压(MAP)，并同步记录心率(HR)。

　　1.3.3 形态学参数测定

　　血液动力学测定后大鼠经股静脉注入10% KCl 2～3 ml，使心室停搏于舒张末期。迅速开胸，经升主动脉向冠状动脉内灌注10%福尔马林20～30 min 固定心脏。然后将心脏置于10%福尔马林溶液中保存。①心脏称重：先用滤纸将心脏拭干，用电子天平分别称取左心室绝对重量(LVAW)和右心室绝对重量(RVAW)，并分别与体重(BW)相除，计算左心室相对重量(LVRW)和右心室相对重量(RVRW)。②左心室容积(LVV)、左心室长轴(LVLA)长度、左心室短轴(LVSA)长度均用直接测量法完成，取3次均值。

　　1.3.4 生化指标测定

　　每组另取10只大鼠以3%戊巴比妥钠30 mg/kg ip麻醉，腹主动脉插管取血，按试剂盒方法测LPO含量，SOD及GSH-Px活性。

　　1.4 统计学方法

　　实验数据以x±s表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验。

　　2 结 果

　　2.1 厄贝沙坦对AMI心室重构大鼠血液动力学的影响

　　假手术组与正常组相比，血液动力学各项指标均无明显差异(P>0.05)，梗死模型组与假手术组相比，SBP、DBP、MAP、LVSP、±dp/dtmax及其校正值(±dp/dtmax/LVSP)均明显降低，而LVEDP则明显增加(P<0.05～0.001)。厄贝沙坦组与梗死模型组相比-dp/dtmax及±dp/dtmax/LVSP明显升高，LVEDP及LVSP降低(P<0.05～0.01)，而SBP、DBP、MAP及HR均无明显变化。见表1。表1 厄贝沙坦对AMI心室重构大鼠血液动力学的影响(略)

　　2.2 厄贝沙坦对AMI心室重构大鼠形态学参数的影响

　　假手术组与正常组相比，LVV、LVLA、LVSA、LVAW、LVRW、 RVAW和RVRW均无明显差异(P>0.05)，梗死模型组与假手术组相比，LVV、LVLA、LVSA、LVAW、LVRW、 RVAW和RVRW均显著增加(P<0.01～0.001)，BW虽有所增加，但与假手术组相比无统计学差异(P>0.05)。厄贝沙坦能明显降低LVV、LVLA、LVSA、LVAW、LVRW、RVAW和RVRW(P<0.05～0.01)，对BW则无明显影响。见表2。表2 厄贝沙坦对AMI心室重构大鼠形态学参数的影响(略)

　　2.3 厄贝沙坦对AMI心室重构大鼠血清LPO含量及SOD和GSH-Px活性的影响

　　假手术组与正常组相比，血清LPO含量及SOD、GSH-Px活性均无明显差异(P>0.05)。梗死模型组与假手术组相比，血清LPO含量明显增加，而SOD、GSH-Px活性明显降低。厄贝沙坦可明显降低血清LPO含量，提高血清SOD、GSH-Px 活性(P<0.05)。见表3。表3 厄贝沙坦对AMI心室重构大鼠血清LPO含量及SOD和GSH-Px活性的影响(略)

　　3 讨 论

　　心肌梗死后的心室重构是心脏对梗死后血液动力学改变的一种代偿性反应过程。当心肌梗死射血分数下降时，心肌受肌纤维拉长的刺激而增加每搏输出量，但同时收缩期及舒张期室壁切应力增加〔3〕，导致心室进一步扩张及心室功能进行性下降，严重影响患者的心功能及存活率，所以心肌梗死后心室重构的防治极其重要。本实验显示，AMI后大鼠左心收缩和舒张功能均明显受损，表现为±dp/dtmax及±dp/dtmax/LVSP明显下降，LVEDP则明显升高，厄贝沙坦能明显升高±dp/dtmax及±dp/dtmax/LVSP，并能明显降低LVEDP，提示其能改善心肌梗死后左心收缩和舒张功能。本研究表明，大鼠AMI后4 w，梗死模型组出现了显著的左室重构，与梗死模型组比较，厄贝沙坦能明显降低大鼠AMI后左心室扩张和肥厚。提示厄贝沙坦有防止AMI大鼠左心室重构作用。

　　Ang Ⅱ与血管紧张素受体1(AT1)结合，介导了心室重构过程中一系列生物化学反应。引起下列作用;① AngⅡ具有生长因子样作用，可直接促进心肌细胞RNA和蛋白质的合成〔4〕;Ang Ⅱ可刺激心肌成纤维细胞产生多种促生长因子,这些因子的促增殖作用使心肌细胞表型向胎儿型转换,进一步促进了心肌细胞肥大;Ang Ⅱ还可通过细胞毒性作用引起心肌细胞的坏死和纤维化〔5〕。 ② Ang Ⅱ与成纤维细胞膜上的AT1结合,引起成纤维细胞代谢和功能的改变,从而使胶原蛋白合成增多〔1〕;Ang Ⅱ可增加冠状动脉渗透性，允许生长因子渗入间质组织，促进成纤维细胞增殖和胶原沉积〔6〕。③Ang Ⅱ使组织和循环中的醛固酮分泌增加，刺激心肌成纤维细胞胶原合成,促进心肌细胞凋亡〔1〕。④ Ang Ⅱ还可通过刺激心脏神经末梢释放去甲肾上腺素,刺激内皮细胞释放内皮素间接介导心肌细胞肥大,诱导成纤维细胞增殖、合成并分泌黏附分子及细胞外基质，从而参与心室重构〔7〕。作为AngⅡ受体拮抗剂，厄贝沙坦可能主要是高度选择性地作用于AngⅡ的靶受体AT1而起到阻断AngⅡ的上述病理生理作用;达到逆转心肌梗死后心室重构、保护心功能的作用。

　　有文献报道〔8〕，氧自由基可能参与心肌重构的发生发展过程，用抗氧化酶或抗氧化剂能减轻心肌重构的发展。这是由于AngⅡ可促进交感神经末梢释放儿茶酚胺，使心脏局部自氧化产物增多，氧自由基生成增加，重构心肌SOD、CAT和GSH-px活力降低，清除氧自由基能力减弱，导致氧自由基堆积，增强了对心肌的毒性作用，使各种离子泵的活性降低。本研究观察到，大鼠AMI 4 w，血清LPO含量明显增加，而SOD、GSH-Px活性明显降低，表明心肌梗死心室重构可产生氧自由基引起心肌损伤。厄贝沙坦可明显降低血清LPO含量，并提高血清SOD、GSH-Px 活性，提示其预防心肌重构作用还可能与其提高心肌的抗氧化能力有关。

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