高原地区先天性心脏病患者核心家庭血清叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸水平及民族相关性研究

　　作者：刘凤云 陈秋红 祁国荣 任庆平 胡 琳 作者单位：青海省心脑血管病专科医院

　　【摘要】 目的 了解高原地区先天性心脏病(CHD)患者血清叶酸(FA)、维生素B12(VB12)、同型半胱氨酸总水平(tHCY)与其父母血清中三者水平的相关性，及不同民族间的差异性。方法 选取 CHD患者及其生物学父母作为病例组,另选取西宁地区无出生缺陷病史及家族史的正常人及其生物学父母作为相应对照。采用化学发光免疫法测定全部对象血清FA、VB12及tHCY水平。结果 CHD患者血清中tHCY含量明显低于正常对照者(P>0.05),而FA、VB12含量明显高于正常对照组，且CHD病例组血清中tHCY、FA、VB12水平同其生物学父母血清中此三项指标无相关性(P>0.05)。藏族CHD患者血清中tHCY、VB12水平明显低于汉族和回族患者(P<0.05)。结论 高原地区先天性心脏病患者核心家庭血清FA、VB12、tHCY水平同CHD的相关性尚不能定论，CHD患者血清中tHCY、VB12水平可能存在民族差异。

　　【关键词】 高原 先天性心脏病 叶酸 维生素B12 同型半胱氨酸

　　RELATIONS BETWEEN SERUM HOMOCYSTEINE

　　And FOLIC ACID LEVELS WITH CONGENITAL

　　HEART DISEASE IN ALTIPLANO

　　Liu Fengyun, Wang Xiaoqing, Chen Qiuhong, Ren Qinpin, Hulin

　　(Qinghai Cardio-vascular Diseases Vocational Hospital)

　　Abstract Objective To investigate the relations among serum homocysteine (HCY), vitamin B12 (VB12)and folic acid(FA) with congenital heart disease (CHD) in CHD nuclear families, and the difference of these index among different nationalities live in altiplano. Methods CHD patients and their biological parents were selected as the case group，and another normal subjects and their parents as contro1.For all members the serum levels of total HCY (tHCY), folic acid and vitamin B12 (VB12) were determined by chemiluminescence immunoassay.Results compared with the control group, the levels of tHCY in CHD patients serum were obviously lower(P<0.05), and the levels of folic acid ,VB12 were obviously higher. In CHD patients, the levels of tHCY, VB12, folic acid was not associated with their biological parents(P>0.05). The levels of tHCY、VB12 in Tibetan CHD patients were obviously lower than that of in Han and Hui CHD patients. Conclusion In this study，the folic acid and tHCY were not significantly related with CHD and it needs further investigations to confirm it.There were obvious nationality distinctions on the levels of tHCY, VB12 in CHD patient's serum.

　　Key words altiplano congenital heart disease Homocysteine Folic acid Vitamin B12

　　先天性心脏病(congenital heart disease，CHD)是指出生时就存在的心血管结构或功能异常，是由于胎儿时期心血管发育异常或发育障碍以及出生后应退化的组织未能退化造成的心血管畸形。除少数CHD是由单基因突变和染色体畸变引起外，大多数CHD是由遗传因素和环境因素相互作用引起的多基因遗传病。近年来研究证明，同型半胱氨酸(homocyateine， HCY)代谢异常是诱发胎儿出生缺陷和血管疾病的一个独立的危险因素，并认为HCY代谢异常在先心病的发病机制中起着重要的作用[1-5]。维生素B 12(VB12)的辅酶具有蛋氨酸合成酶的辅酶作用，可以从5-甲基四氢叶酸盐转移甲基，增强叶酸(folic acid, FA)的代谢，而FA是HCY代谢的重要辅助因子，对高HCY具有拮抗作用。高原地区CHD患者血清中FA、VB12、tHCY水平及与父母血清中三者水平的相关性研究未见报道;不同民族的先心病患者血清中FA、VB12、tHCY水平是否存在差异也未明确。为此,本文进行相关的研究与报道。

　　1 材料与方法

　　1.1 研究对象

　　收集2006年6月～2007年1月就诊于我院心外科，出生并居住在青海当地(最低海拔2183m，最高海拔3287m，平均海拔2735m)确诊为CHD的手术患者36例(男20人，女16人)，年龄5～18岁,平均 (11.66±5.36) 岁，其中世居藏族9例，移居汉族18例，回族9例，用于民族相关性分析。选取其中23例患儿及其生物学父母23例作为病例组，在西宁地区(海拔2360m)选取无出生缺陷病史及家族史的23例正常人及其生物学父母作为对照组(性别、年龄构成见表1)，用于各检测指标测定及家族相关性分析。

　　1.2 标本采集

　　采集所有研究对象空腹静脉血3～5 ml，分离血清与血凝块。

　　1.3 血清叶酸、VB12、tHCY检测

　　应用美国ACS(180全自动化学发光免疫分析仪)采用化学发光免疫法测定，由美国拜耳医药保健有限公司提供试剂盒，青海省人民医院核医学科测定。tHCY≥15 μmol/L可判断为高HCY血症。参考值范围：血清FA为7～39 nmol/L，VB12为150～700 pmol/L。

　　1.4 统计学处理

　　用SPSS10.0统计软件，两组均数比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。

　　2 结果

　　2.1 一般资料(见表1)

　　表1CHD组与对照组的一般临床资料表1显示，CHD组与对照组一般资料的比较，年龄、性别构成无显著性差异(P> 0.05)。

　　2.2 病例组与对照组核心家庭成员血清tHCY、FA和VB12水平比较(见表2)表2 病例组与对照组核心家庭成员血清HCY、FA和VB12水平比较表2结果显示，CHD患者血清中tHCY含量明显低于正常对照组(P<0.05),而FA、VB12含量明显高于正常对照组。CHD患者及正常对照者的生物学父母血清中tHCY、FA、VB12含量无显著性差异(P>0.05)。

　　2.3 父母亲与子代血清FA、tHCY、VB12水平的相关性

　　相关性分析结果表明，CHD病例组血清中tHCY、FA、VB12水平同其生物学父母血清中此三项指标无相关性(P>0.05)，对照组血清中tHCY、FA、VB12水平同其生物学母亲血清中此三项指标有很好的相关性(r值分别为0.725、0.877、0.621，P<0.05),同其父亲无相关性(P>0.05)。

　　2.4 部分民族的CHD患者血清中FA、VB12、tHCY水平(见表3)表3 部分民族的CHD患者血清中FA、VB12、tHCY水平 注：* 同藏族比较，P< 0.05. 表3结果显示，在CHD患者中，汉族血清中三项指标含量同回族相比无显著性差异，血清中tHCY、VB12水平同藏族相比有显著性差异(P<0.05);回族血清中FA、tHCY、VB12三项指标都要高于藏族，tHCY、VB12的水平同藏族的差异有统计学意义(P<0.05)。

　　3 讨论

　　HCY具有细胞毒性，可使巯基氧化产生自由基，引起DNA损伤和细胞凋亡;另外HCY过多还可产生大量S-腺苷蛋氨酸，后者是体内所有甲基转移反应的竞争抑制剂，干扰蛋白质、脂类和DNA等的甲基化反应，产生错误蛋白和无功能蛋白 。许多研究表明高HCY血症是导致CHD的一个危险因素。而FA是HCY代谢途径中重要的甲基供体，FA缺乏则会导致HCY堆积，形成高HCY血症。VB12的辅酶具有蛋氨酸合成酶的辅酶作用，可以从5-甲基四氢叶酸盐转移甲基，增强FA的代谢，从而降低体内高HCY含量。本研究中，CHD患者并未出现文献报道的高tHCY血症(tHCY≥15μmol/L)，相反，CHD患者血清中tHCY含量明显低于正常对照者(P<0.05)。而FA、VB12含量明显高于正常对照组，本结果同朱文丽[6]所得结果相同。

　　本文进一步研究了高原世居藏族、移居汉族、回族CHD患者血清中FA、VB12、tHCY水平，结果表明回族、汉族CHD患者血清中VB12 水平高于正常人群参考值(150～700pmol/L)，高原世居藏族人血液中VB12、tHCY水平要明显低于汉族、回族(P<0.05)，FA水平也低于汉、回族，差异无显著性意义。除VB12 ，其余各组各指标都在正常人群参考值范围内。因此，高原地区有关FA与 CHD发生的确切关系，及是否通过影响HCY代谢而发挥作用尚不能定论。

　　人们公认CHD是遗传与环境共同作用的结果，我们发现CHD病例组血清中tHCY、FA、VB12水平同其生物学父母血清中此三项指标并无相关性(P<0.05)，那么高原地区CHD的高发生率是不是环境因素占主导地位呢?以往研究认为藏族是高原适应民族，高原病的发病率要远低于移居者，本研究中藏族CHD患者血清中FA、VB12、tHCY明显低于移居者，可能是藏族适应不良者患CHD的重要原因 。而回族、汉族CHD患者血清中VB12 水平也高于正常人群参考值，是否可以认为机体内FA和HCY处于一种动态平衡状态，高原缺氧情况下，这种平衡被打破致机体代谢紊乱，FA或VB12与HCY比例失调而容易形成CHD呢?

　　【参考文献】

　　[1]Rosenquist TH， Ratashak SA， Selhub J. Homocysteine induces congenital defects of the heart and neural tube：effect of folic acid[J].Proc Natl Acad Sci USA，1996，93(26)：15227-15232

　　[2]李勇，李竹，陈星，等.同型半胱氨酸对鸡胚早期心血管发育的影响[J].中华预防医学杂志，1999，33(3)：137-139

　　[3]Burgoon JM ，Selhub J，Nadeau M ，et al .Investigation of the effects of folate deficiency on embryonic development through the establishment of a folate deficient mouse mode1[J].Teratology，2002，65(5)：219-27

　　[4]Botto N， Andreassi MG， Manfredi S，et al. Genetic polymorphisms in folate and homocysteine metabolism as risk factors for DNA damage[J].Eur J Hum Genet，2003，11(9)：671-678

　　[5]杨江帆，许月珍，李萍，等.新生儿先天性心脏病患病率的调查和孕妇增补叶酸的预防效果[J].中国当代儿科杂志，2000，2(5)：320-323

　　[6]朱文丽，刀京晶，成君，等，血清同型半胱氨酸及叶酸水平与先天性心脏病的关系，[J].卫生研究，2005，34(6)：740-743